主要功能和细节
分析类型:直接
概述
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产品名称 -
分析类型 直接 -
产品概述 Abcam的细胞分离试剂盒(标准)允许从哺乳动物和其他物种的培养细胞中快速简单地制备线粒体、细胞质和细胞核部分。
细胞分馏试剂盒旨在生产高浓缩的组分,以便通过各种细胞隔室监测感兴趣的蛋白质。 它不是为了生产纯化的细胞组分而设计的。
该套件不需要对样品进行机械破坏。 这一点很重要,因为机械破坏会破坏线粒体膜,导致蛋白质的生物相关释放。 该试剂盒在研究细胞凋亡和细胞色素c等促凋亡蛋白的运动方面特别有用。
提供足够的材料用于1x10的分馏 8 或用于制备40个样品,每个样品对应于一个100 mm的2.5 x 10的板 6 细胞/平板。
还提供了一种配套产品,可以对96孔板中生长的细胞进行分级:细胞分级试剂盒HT( 澳大利亚银行109718 ). -
笔记
属性
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储存说明 请参阅协议。 -
组件 1套 5X SDS样品缓冲液 1 x 10毫升 缓冲液A 2x浓缩液 1 x 175毫升 洗涤剂I 1 x 25微升 洗涤剂II 1 x 1毫升 -
研究领域 -
替代名称 微软862
图像
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样品从左到右依次加载:(1)标记物,(2)全细胞裂解物,(3)胞质部分裂解物,,(4)膜部分裂解物和(5)核部分裂解物。 用质膜分馏WB鸡尾酒对膜进行印迹 ab140365型 含有抗钠钾ATP酶抗体(110kDa)、抗GAPDH抗体(37kDa”)和抗组蛋白H3(二甲基K9)抗体。 -
HepG2细胞的细胞溶胶(C)、线粒体(M)和核(N)部分按照方案中的描述制备。 使用Abcam的ApoTrack™细胞色素c凋亡WB抗体鸡尾酒通过Western blotting分析组分( 约110415 )含有抗线粒体基质(丙酮酸脱氢酶亚基E1α,PDH E1α)、线粒体内膜(F1-ATPaseα),线粒体膜间间隙(细胞色素c)和细胞溶质(甘油醛-3-磷酸脱氢酶,GAPDH)标记物的抗体,以及抗额外线粒体基质(Hsp70)的抗体 和核(聚(ADP-核糖)聚合酶、PARP和SP1)标记物,然后进行适当的HRP缀合的山羊二级抗体和ECL检测。 -
在本实验中,用staurosporine诱导Jurkat、HeLa和143B骨肉瘤细胞凋亡,或用FAS诱导Jurkot细胞凋亡。 分离线粒体和细胞质部分(使用ab109719),并使用 约110415 如凝胶所示,细胞色素c在FAS诱导的细胞和STS处理的骨肉瘤细胞中部分移位,在STS处理过的Jurkat和HeLa细胞中几乎完全移位。 这三个控制目标允许验证细胞分馏的“清洁度”。
协议
数据表和文件
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SDS下载 -
数据表下载
工具书类 (106)
克鲁克尼卡A 等。 REC驱动重组以修复动物线粒体DNA中的双链断裂。 J细胞生物学 222:不适用(2023年)。 公共医学:36355348 巴瓦尼M 等。 Triap1上调可促进逃避有丝分裂滑移诱导的G1期阻滞。 单元格代表 42:112215 (2023). 公共医学:36917609 张Y 等。 合成维甲酸通过诱导RARγ-转移介导的张力降低和染色质去凝聚作用杀死耐药肿瘤干细胞。 高级科学(Weinh) 9:e2203173(2022)。 公共医学:36031407 刘毅 等。 lncRNA ZFAS1在糖尿病视网膜病变中通过miR-7-5p/ACSL4轴积极促进内皮细胞铁下垂。 氧化介质细胞Longev 2022:9004738 (2022). 公共医学:36092160 李浩 等。 CircRNA CircEHBP1调节MiR-129的成熟,增加急性髓系白血病中癌细胞对阿霉素的耐药性。 Mediter J血液传染病 14:e2022062(2022)。 公共医学:36119459