主要功能和细节
兔多克隆至CD74 适用人群:WB、ICC/IF、IP、IHC-P 敲除已验证 反应对象:人类 同位素:IgG
使用重组抗体获得更好的批间重现性
充满信心的研究——每批产品的结果一致且可重复 长期和可扩展的供应–由重组技术提供动力,实现快速生产 第一次实验的成功——通过广泛验证证实了特异性 符合道德标准–生产无动物
概述
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产品名称 -
描述 兔多克隆至CD74 -
寄主物种 兔子 -
经过测试的应用程序 -
物种反应性 与以下物质反应: 人类 预计用于: 非人类灵长类 -
免疫原 合成肽。 此信息为Abcam和/或其供应商专有。 -
阳性对照 WB:Raji和Daudi细胞裂解物。 IF/ICC:Raw246.7细胞系。 IHC-P:人类扁桃体和淋巴结组织。 IP:Raji全细胞提取物。
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一般注意事项 多年来,生命科学行业一直面临着再现性危机。 Abcam正在通过我们的一系列重组单克隆抗体和用于金标准验证的敲除编辑细胞系引领解决这一问题。 购买前请检查此产品是否满足您的需求。 如果您有任何问题、特殊要求或疑虑,请在购买前向我们发送询问和/或联系我们的支持团队。 以下是本产品的推荐替代品,以及出版物、客户评论和问答
属性
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表格 液体 -
储存说明 在4°C下装运。 短期储存在+4°C下(1-2周)。 交付时,等分。 储存于-20°C或-80°C。 避免冷冻/解冻循环。 -
存储缓冲区 pH值:7.40 防腐剂:0.02%叠氮化钠 成分:PBS 浓度<1mg/ml的该产品批次可添加BSA作为稳定剂。 如果您想了解有关特定批次配方的信息,请联系我们的科学支持团队,他们将乐于提供帮助。 -
正在加载浓度信息。。。 -
纯度 免疫原亲和力纯化 -
克隆性 多克隆 -
同位素 免疫球蛋白G -
研究领域
相关产品
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兼容的辅助设备 -
同位素控制 -
KO细胞系 -
KO细胞裂解物 -
重组蛋白
应用
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目标
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功能 通过在合成无肽II类α/β异二聚体后不久将其稳定在复合体中,并将复合体从内质网运输至内质体/溶酶体系统,从而在MHC II类抗原处理中发挥关键作用,抗原肽与MHC II级抗原的结合需要 地点。 作为细胞因子MIF的细胞表面受体。 -
序列相似性 含有1个甲状腺球蛋白1型结构域。 -
手机定位 细胞膜。 内质网膜。 高尔基体>转高尔基体网络。内切体。 溶酶体。 在内吞途径中通过许多细胞内隔间。 它既可以进行蛋白水解,也可以到达细胞膜。 -
UniProt提供的信息 -
数据库链接 -
替代名称 CD74抗体 CD74抗体 CD74抗原(主要组织相容性复合体的不变多肽,II类抗原相关)抗体
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图像
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所有车道: 1µg/ml时的抗CD74抗体(ab64772) 车道1: 野生型Raji(人类Burkitt淋巴瘤细胞系)全细胞裂解物 车道2: CD74敲除Raji(人Burkitt淋巴瘤细胞系)全细胞裂解物 3号车道: Daudi(人Burkitt淋巴瘤细胞系)全细胞裂解物 车道4: Jurkat(外周血T细胞白血病细胞系)全细胞裂解物 每车道20µg的裂解液/蛋白质。 在还原条件下进行。 预测的带宽大小: 34千帕 观察到的频带大小: 35千帕 为什么实际的频带大小与预测的不同? 1-4车道: 合并信号(红色和绿色)。 绿色-在35 kDa下观察到ab64772。 红色-加载控制 约7291 (小鼠抗α-管蛋白[DM1A])在55 kDa时观察到。 Western blot显示ab64772与野生型Raji细胞中的CD74反应,在CD74敲除细胞系中观察到信号丢失 约273876 (敲除细胞裂解物 约273830 ). 对野生型Raji和CD74敲除细胞裂解物进行SDS-PAGE分析。 TBS-T(0.1%吐温)中3%牛奶中的膜被堵塞 ® )在与ab64772和 约7291 (小鼠抗α-管蛋白[DM1A])分别在4°C、1µg/ml和1:20000稀释液中过夜。 印迹与山羊抗兔IgG H&L(IRDye)孵育 ® 800CW)预吸收床( ab216773号 )和山羊抗鼠IgG H&L(IRDye ® 680RD)预吸收床( 约216776 )二级抗体在成像前在室温下以1:20000稀释1小时。 -
ab64772(1:160)使用自动化系统(Ventana Discovery)在石蜡包埋的人类扁桃体(左侧面板)中对CD74进行染色。 右侧面板显示阴性对照(无一级抗体)。 使用该方案,生发中心的活化B细胞和滤泡套区的B细胞以及滤泡间区的分散细胞(皮层旁B细胞)的膜染色较强。 使用Ventana轻度检索程序对切片进行再水化,并在CC1细胞调节缓冲液中检索抗原。 幻灯片在3%H内被阻挡 2 O(运行) 2 /4分钟/37°C,用ab64772培养(1:160稀释/2小时/37°C)。 然后阻断切片(4分钟/37°C)并用Dako猪抗兔抗体孵育(1:50,28分钟/37℃)。 通过使用Ventana Streptavidin ABC系统(16 min/37°C)和Ventana-DAB map试剂(8 min/37℃)进行培养来扩增和检测染色。 幻灯片用血红素复染 -
使用0.5mg Raji全细胞提取物、5µg兔CD74多克隆和50µl g蛋白磁珠(+)对CD74进行免疫沉淀。 对照组(-)未添加抗体。 将抗体与蛋白G珠搅拌培养10分钟,将稀释在RIPA缓冲液中的Raji全细胞提取物裂解液添加到每个样品中,并在搅拌下再培养10分钟。 通过添加40µl SDS负载缓冲液洗脱蛋白质,并在70°C下培养10分钟; 在SDS-PAGE凝胶上分离10µl每个样品,转移到硝化纤维素膜上,用5%BSA封闭,并用ab64772进行探测。 次要:鼠单克隆[SB62a]兔IgG轻链二级抗体( ab99697型 ). 频带:34kDa; CD74型 -
所有车道: 1µg/ml时的抗CD74抗体(ab64772) 车道1: 野生型Raji细胞裂解物 车道2: CD74 CRISPR/Cas9编辑的Raji细胞裂解物 3号车道: Jurkat细胞裂解物 车道4: HepG2细胞裂解物 每车道30µg的裂解液/蛋白质。 在还原条件下进行。 预测的带宽大小: 34千帕 观察到的频带大小: 35千帕 为什么实际的频带大小与预测的不同? 1-4车道: 合并信号(红色和绿色)。 绿色-在35kDa下观察到ab64772。 红色-装载控制, 约7291 (小鼠抗α-管蛋白[DM1A])在55 kDa时观察到。 western blot显示ab64772与CD74反应。 CD74 CRISPR/Cas9编辑细胞系中观察到的条带 约273378 (CRISPR/Cas9编辑的裂解物 约275529 )低于35kDa可能代表一种截断形式。这还没有进一步研究。 在用ab64772和 约7291 (小鼠抗α-管蛋白[DM1A])分别在4°C、1µg/ml和1:20000稀释液中过夜。 印迹与山羊抗兔IgG H&L(IRDye)孵育 ® 800CW)预吸收床( ab216773号 )和山羊抗鼠IgG H&L(IRDye ® 680RD)预吸收床( 约216776 )二级抗体在成像前在室温下以1:20000稀释1小时。 -
1µg/ml的抗CD74抗体(ab64772)+10µg的Raji(人类Burkitt淋巴瘤细胞系)全细胞裂解液 次要 山羊多克隆至兔IgG-H&L-Pre-Adsorbed(HRP),稀释度为1/3000 在还原条件下进行。 预测的带宽大小: 34千帕 观察到的频带大小: 34千帕 暴露时间: 2分钟 -
使用自动化系统(Ventana Discovery)对石蜡包埋的人类淋巴结(左侧面板)进行ab64772(1:80)染色CD74。 右侧面板显示阴性对照(无一级抗体)。 使用该方案,生发中心的活化B细胞和滤泡套区的B细胞以及滤泡间区的分散细胞(皮层旁B细胞)的膜染色较强。 使用Ventana轻度检索程序对切片进行再水化,并在CC1细胞调节缓冲液中检索抗原。 幻灯片在3%H内被阻挡 2 O(运行) 2 /4分钟/37℃,用ab64772培养(1:80稀释/1小时/37℃)。 然后阻断切片(3mins/37°C)并用Dako猪抗兔抗体孵育(1:50,28 min/37°C)。 通过使用Ventana Streptavidin ABC系统(16 min/37°C)和Ventana-DAB map试剂(8 min/37℃)进行培养来扩增和检测染色。 幻灯片用血红素复染 -
ab64772(1/250)染色石蜡包埋人扁桃体组织中的CD74。 组织经过甲醛固定、过氧化物酶阻断、蛋白质阻断和热介导抗原回收。 第二抗体是与HRP偶联的山羊抗兔抗体。 有关更多实验细节,请参阅abreview。 -
ab64772染色的RAW246.7细胞的ICC/IF图像。 细胞被4%多聚甲醛固定(10分钟),然后在1%牛血清/10%正常山羊血清/0.3M甘氨酸和0.1%PBS-Tween中孵育1小时,以使细胞渗透并阻断非特异性蛋白-蛋白质相互作用。 然后将细胞与抗体(ab64772,1µg/ml)在+4°C下孵育过夜。 二级抗体(绿色)为 约96899 ,DyLight®488山羊抗兔IgG(H+L),以1/250稀释度使用1h。 Alexa Fluor®594 WGA用于在1/200稀释度下标记质膜(红色)1小时。 采用DAPI对浓度为1.43µM的细胞核(蓝色)进行染色。
数据表和文件
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SDS下载 -
数据表下载
工具书类 (4)
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