主要功能和细节
重组生产(无动物),实现高批次一致性和长期供应安全 抗c-Myc-BSA和无叠氮化合物的兔单克隆抗体[Y69] 适用于:流周期(内部)、WB、ICC/IF、ChIP排序、IP、IHC-P、ChIC/CUT和RUN-seq 敲除已验证 反应对象:小鼠、大鼠、人类
相关共轭物和制剂
概述
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产品名称 -
描述 兔抗c-Myc-BSA单克隆抗体[Y69]和不含叠氮化合物 -
寄主物种 兔子 -
特异性 该抗体对内源性c-Myc具有特异性。 它没有检测到Myc标签。 目标蛋白的表达水平因样本类型而异,可能需要进行一些优化。 -
经过测试的应用程序 -
物种反应性 与以下物质反应: 老鼠、老鼠、人 -
免疫原 合成肽。 此信息为Abcam和/或其供应商专有。 -
阳性对照 WB:Jurkat、HeLa、HEK-293T、Raji、MCF-7、K562、A20、AR42J、Rat-1、大鼠胰腺、Neuro-2a细胞裂解物、L363 MM和CA46细胞。 ICC/IF:HEK293和HeLa细胞。 IHC-P:人类Burkitt淋巴瘤、弥漫性大B细胞淋巴瘤、结肠腺癌、肺腺癌、胃腺癌、膀胱移行癌、食道、胶质母细胞瘤和低度胶质瘤组织、人类皮肤组织。 IP:Jurkat细胞裂解物。 Flow Cyt(intra),ChIP-seq,ChIC/C&R-seq:HeLa细胞,HEK293细胞。
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一般注意事项 ab168727是的无运营商版本 约32072 . 我们的 无载体 抗体通常以只含PBS的配方提供,纯化后不含BSA、叠氮化钠和甘油。 无载体缓冲液和高浓度可提高共轭效率。 这种共轭-成熟格式设计用于荧光色素、金属同位素、寡核苷酸和酶,使其成为抗体标记、功能和基于细胞的分析、基于流的分析(例如,质谱仪)和多重成像应用的理想选择。 使用我们的 接合试剂盒 抗体结合物在20分钟内即可使用,动手时间<1分钟,抗体回收率100%:可用于荧光染料、HRP、生物素和金。 此产品与Maxpar兼容 ® Fluidigm抗体标记试剂盒,无需抗体制备。 Maxpar公司 ® 是Fluidigm Canada Inc.的商标。 该产品是一种重组单克隆抗体,具有以下优点: -高批次一致性和再现性 -提高敏感性和特异性 -长期供应安全 -无动物制作
有关更多信息 请看这里 . 我们的RabMAb ® 该技术是一种基于杂交瘤的专利技术,用于制备兔单克隆抗体。 有关我们专利的详细信息,请参阅 拉布MAb ® 专利 .
属性
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表格 液体 -
储存说明 在4°C下装运。 储存于+4°C。 请勿冻结。 -
存储缓冲区 成分:PBS -
无运营商 是的 -
正在加载浓度信息。。。 -
纯度 蛋白质A纯化 -
克隆性 单克隆 -
克隆编号 Y69年 -
同位素 免疫球蛋白G -
研究领域
相关产品
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替代版本 -
检测试剂盒 -
兼容的辅助设备 -
共轭试剂盒 -
同位素控制 -
KO细胞系 -
KO细胞裂解物 -
重组蛋白 -
相关产品
应用
目标
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功能 参与基因转录的调节。 以非特异性方式结合DNA,同时也特异性识别核心序列5'-CAC[GA]TG-3'。 似乎激活了生长相关基因的转录。 -
参与疾病 注:MYC的过度表达与多种造血肿瘤的病因有关。 注:涉及MYC的染色体畸变可能是一种B细胞慢性淋巴细胞白血病的病因。 用BTG1移位t(8;12)(q24;q22)。 MYC缺陷是Burkitt淋巴瘤(BL)的原因[MIM:113970]。 一种未分化恶性淋巴瘤,通常表现为颌骨中的大溶骨性病变或腹部肿块。注:涉及MYC的染色体畸变通常见于Burkitt淋巴瘤。 将MYC并列到重链或轻链免疫球蛋白基因位点之一的易位t(8;14)、t(8,22)或t(2;8)。 -
序列相似性 包含1个基本螺旋-环-螺旋(bHLH)域。 -
翻译后 修改 通过PRKDC进行磷酸化。 GSK3在Thr-58和Ser-62处的磷酸化是蛋白酶体泛素化和降解所必需的。 当在Thr-58和Ser-62磷酸化时,SCF(FBXW7)复合物泛素化,导致其被蛋白酶体降解。 在核质中,泛素化被USP28抵消,USP28与FBXW7的同种型1(FBW7α)相互作用,导致其去泛素化并防止降解。 然而,在核仁中,由于FBXW7亚型4(FBW7gamma)和USP28之间缺乏相互作用,USP28不能抵消泛素化,这解释了核仁中选择性MYC降解的原因。 DCX(TRUSS)复合物也具有多泛素化作用。 -
手机定位 细胞核>核质。 核仁>核仁。 -
UniProt提供的信息 -
数据库链接 Entrez基因: 4609 人类 Entrez基因: 17869 鼠标 Entrez基因: 24577 老鼠 Omim公司: 190080 人类 瑞士保护银行: P01106号 人类 瑞士保护银行: P01108故障码 鼠标 瑞士保护银行: P09416号 老鼠 尤尼金: 202453 人类
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表格 c-Myc也在细胞质中表达。 -
替代名称 AU016757抗体 禽骨髓细胞瘤病病毒癌基因同源抗体 bHLHe39抗体
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图像
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该数据是在含有PBS、BSA、甘油和叠氮化钠的不同缓冲液配方中使用相同的抗体克隆得到的( 约32072 ). 流式细胞术重叠直方图显示野生型HEK293(绿线)和MYC敲除型HEK2903 约32072 (红线)。 用80%甲醇固定细胞(5分钟),然后用0.1% PBS-Triton X-100渗透15分钟。然后将细胞培养在含有10%正常山羊血清的1x PBS中,以阻断非特异性蛋白-蛋白质相互作用,然后再接种抗体( 约32072 )(1个10 6 在22°C下,以0.2μg/ml(1/11500)的浓度在100μl中放置30分钟。 将二级抗体山羊抗狂犬病IgG H&L(Alexa Fluor®488)预吸附液在1/4000的温度下于22°C孵育30分钟 同位素对照抗体重组兔IgG,单克隆[EPR25A]-同位素对照在与一级抗体相同的浓度和条件下使用(野生型HEK293-黑线,MYC敲除型HEK2903-灰线)。 未标记样本也用作对照(为了简单起见,未显示此行)。 使用50 mW蓝光激光器(488nm)和525/40带通滤波器采集了超过5000个事件。 该抗体在HEK293中发出阳性信号,用4%甲醛固定(10分钟)/用0.1% PBS-Triton X-100在相同条件下渗透15分钟。 -
所有车道: 抗-c-Myc抗体[Y69]-ChIP级( 约32072 )稀释度为1/1000 车道1: 野生型HEK-293T细胞裂解物 车道2: MYC CRISPR-Cas9编辑的HEK-293T细胞裂解物 3号车道: Jurkat细胞裂解物 车道4: SH-SY5Y细胞裂解液 每车道20µg的裂解液/蛋白质。 在还原条件下进行。 预测的带宽大小: 48千Da 观察到的频带大小: 45,57千Da 为什么实际的频带大小与预测的不同? Western blot假彩色图像:抗-c-Myc抗体[Y69]在1/1000稀释度下染色,以绿色显示; 小鼠抗GAPDH抗体[6C5]( 约8245 )以1/20000稀释度进行负荷控制染色,以红色显示。在Western blot中, 约32072 显示与c-Myc特异结合。 在野生型HEK-293T细胞裂解液中观察到45/57 kDa的带,在MYC CRISPR-Cas9编辑的细胞系中未观察到该大小的信号 约256500 (CRISPR-Cas9编辑的细胞裂解物 约263850 ). 在CRISPR-Cas9编辑的45/57 kDa以下裂解物通道中观察到的条带可能代表c-Myc的截断形式。 这还没有进一步研究,基因产物的功能特性也没有确定。 为了生成该图像,分析了野生型和MYC CRISPR-Cas9编辑的HEK-293T细胞裂解物。 首先,样品在SDS-PAGE凝胶上运行,然后转移到硝化纤维素膜上。 TBS-0.1%吐温中5%牛奶中的膜被堵塞 ® 20(TBS-T),然后在4°C下与一级抗体孵育过夜。 在TBS-T中清洗四次斑点,在室温下与二级抗体孵育1小时,再次清洗四次,然后成像。 使用的二级抗体是山羊抗兔IgG H&L(IRDye ® 800CW)预吸收床( ab216773号 )和山羊抗鼠IgG H&L(IRDye ® 680RD)预吸收床( 约216776 )稀释1/20000。 -
所有车道: 抗-c-Myc抗体[Y69]-ChIP级( 约32072 )稀释度为1/1000 车道1: HeLa(人宫颈腺癌上皮细胞)全细胞裂解物 车道2: MDA-MB-231(人乳腺癌上皮细胞)全细胞裂解物 3号车道: DLD-1(人大肠腺癌上皮细胞)全细胞裂解物 车道4: HepG2(人肝癌上皮细胞)全细胞裂解物 车道5: A549(人肺癌上皮细胞)全细胞裂解物 车道6: HCT 116(人结直肠癌上皮细胞)全细胞裂解物 每车道20µg的裂解液/蛋白质。 次要 所有车道: 山羊抗狂犬病IgG H&L(HRP)( ab97051型 )稀释1/20000 预测的带宽大小: 48千Da 观察到的频带大小: 45,57千Da 为什么实际的频带大小与预测的不同? 暴露时间: 20秒 阻塞缓冲区:5%NFDM/TBST。 -
所有车道: 抗-c-Myc抗体[Y69]-ChIP级( 约32072 )稀释度为1/1000 车道1: 小鼠脑组织裂解物 车道2: 小鼠脑癌组织裂解物 3号车道: 小鼠皮肤组织裂解物 车道4: 小鼠皮肤癌组织裂解物 每车道20µg的裂解液/蛋白质。 次要 所有车道: 山羊抗狂犬病IgG H&L(HRP)( ab97051型 )稀释1/20000 预测的带宽大小: 48千Da 观察到的频带大小: 45,57千Da 为什么实际的频带大小与预测的不同? 暴露时间: 60秒 阻塞缓冲区:5%NFDM/TBST。 -
所有车道: 抗-c-Myc抗体[Y69]-ChIP级( 约32072 )稀释度为1/1000 车道1: Jurkat细胞裂解物 车道2: HeLa细胞裂解物 3号车道: 野生型HEK-293T细胞裂解物 车道4: MYC敲除HEK-293T细胞裂解物 每车道20µg的裂解液/蛋白质。 预测的带宽大小: 48千Da 观察到的频带大小: 57千帕 为什么实际的频带大小与预测的不同? 该数据是在不同的缓冲液配方中使用相同的抗体克隆得到的( 约32072 ). 1-4车道: 合并信号(红色和绿色)。 绿色- 约32072 在57 kDa时观察到。 红色-装载控制, 约8245 在37 kDa时观察到。 约32072 在野生型HEK-293T细胞中显示与MYC反应。 敲除细胞系时观察到信号丢失 约256500 (敲除细胞裂解物 约263850 )已使用。 对野生型和MYC基因敲除样品进行SDS-PAGE分析。 约32072 和抗-GAPDH抗体[6C5]-负荷控制( 约8245 )分别在4°C下以1/1000稀释度和1/20000稀释度培养过夜。 用山羊抗兔IgG H&L(IRDye ® 800CW)预吸附床( ab216773号 )和山羊抗鼠IgG H&L(IRDye ® 680RD)预吸附床( 约216776 )二级抗体在成像前在室温下以1:20000稀释1小时。 -
使用0.5mg Jurkat(来自外周血的人类T细胞白血病细胞系)全细胞提取物、5µg未纯化的兔抗c-Myc[Y69]单克隆抗体和50µl蛋白g磁珠(+)免疫沉淀c-Myc。 对照组(-)未添加抗体。 将抗体与蛋白G珠搅拌培养10分钟,将稀释在RIPA缓冲液中的Jurkat全细胞提取物裂解物添加到每个样品中,并在搅拌下再培养10分钟。 通过添加40µl SDS负载缓冲液洗脱蛋白质,并在70°C下培养10分钟; 在SDS-PAGE凝胶上分离10µl每个样品,转移到硝化纤维素膜上,用5%BSA封闭,并用未净化的 约32072 . 次要:山羊多克隆至小鼠IgG轻链特异性(HRP),稀释度为1/20000。 频带:57kDa; c-Myc【Y69】 该数据是在含有PBS、BSA、甘油和叠氮化钠的不同缓冲液配方中使用相同的抗体克隆得到的( 约32072 ). -
该数据是在不同的缓冲液配方中使用相同的抗体克隆得到的( 约32072 ). 约32072 野生型HEK293细胞中MYC染色(顶面板)和MYC敲除细胞( 约256500 )(底部面板)。 用4%多聚甲醛固定细胞(10分钟),然后用0.1%Triton X-100渗透5分钟,然后用1%BSA/10%正常山羊血清/0.3M甘氨酸在0.1%PBS-Tween中封闭1小时。 然后将细胞与 约32072 浓度为5μg/ml 约7291 (鼠抗α-管蛋白单克隆抗体)在4°C下以1/1000稀释过夜,然后在室温下用山羊抗兔IgG二级抗体(Alexa Fluor ® 488) ( 约150081 )以2μg/ml(绿色显示)和山羊对小鼠IgG的二级抗体(Alexa Fluor ® 594) ( ab150120型 )浓度为2μg/ml(以红色显示)。 核DNA用DAPI标记为蓝色。 使用共焦显微镜(Leica-Microsystems TCS SP8)拍摄图像。 -
抗c-Myc抗体[Y69]-ChIP级-无BSA和阿齐德(ab168727)+Raji(人伯基特淋巴瘤)全细胞裂解物,15µg 次要 山羊抗狂犬病IgG H&L(HRP)( ab97051型 ) 预测的带宽大小: 48千Da 观察到的频带大小: 57千帕 为什么实际的频带大小与预测的不同? 暴露时间: 10秒 封闭缓冲液和浓度:5%NFDM/TBST。 稀释缓冲液和浓度:5%NFDM/TBST。 -
克隆Y69(ab168727)已被Abcam成功偶联。 此图像是使用抗-c-Myc抗体[Y69](Alexa Fluor®647)生成的。 请参阅 约190560 了解协议详细信息。 约190560 panc1细胞c-Myc染色。 细胞用100%甲醇固定(5分钟),在0.1%Triton X-100中渗透5分钟,然后在1%BSA/10%正常山羊血清/0.3M甘氨酸在0.1%PBS-Tween中封闭1小时。 然后将细胞与 约190560 工作稀释度为1/100(以红色显示) 约195887年 ,小鼠单克隆[DM1A]到α-管蛋白(Alexa Fluor ® 488,以绿色显示),温度为2µg/ml,在+4°C下过夜。 核DNA用DAPI标记为蓝色。 在相同的测试条件下,该产品在4%甲醛(10分钟)固定的panc1细胞中也发出阳性信号。 使用共焦显微镜(Leica-Microsystems,TCS SP8)拍摄图像。 -
克隆Y69(ab168727)已被Abcam成功偶联。 此图像是使用抗-c-Myc抗体[Y69](Alexa Fluor®488)生成的。 请参阅 约190026 了解协议详细信息。 约190026 Panc-1细胞c-myc染色。 用4%甲醛固定细胞(10分钟),用0.1%Triton X-100渗透5分钟,然后用1%牛血清/10%正常山羊血清/0.3M甘氨酸在0.1%PBS-Tween中封闭1小时。 然后将细胞在+4°C下培养过夜 约190026 稀释度为1/100(以绿色显示) 约195889年 ,小鼠单克隆抗α-管蛋白(Alexa Fluor ® 594),稀释度为1/250(以红色显示)。 用DAPI标记细胞核DNA(以蓝色显示)。 使用共焦显微镜(Leica-Microsystems,TCS SP8)拍摄图像。 -
约32072 宫颈腺癌人上皮细胞系HeLa细胞c-Myc染色。 细胞用4%甲醛固定(10分钟),用0.1%Triton X-100渗透5分钟,然后用1%牛血清/10%正常山羊血清/0.3M甘氨酸在0.1%PBS-Tween中封闭1小时。 然后将细胞在+4°C下培养过夜 约32072 稀释10μg/ml(以绿色显示)和 约195889年 ,小鼠单克隆抗α-管蛋白(Alexa Fluor®594),浓度为2µg/ml(以红色显示)。 用DAPI标记细胞核DNA(以蓝色显示)。 使用共焦显微镜(Leica-Microsystems,TCS SP8)拍摄图像。 该数据是在含有PBS、BSA、甘油和叠氮化钠的不同缓冲液配方中使用相同的抗体克隆得到的( 约32072 ). -
纯化的c-Myc标记人宫颈腺癌上皮细胞HeLa的免疫细胞化学/免疫荧光分析 约32072 在1/100。 细胞用4%多聚甲醛固定,并用0.1%Triton X-100渗透 山羊抗狂犬病IgG H&L(Alexa Fluor®488)(ab150077)二级抗体 (1/500)作为二级抗体。 DAPI(蓝色)用作核染色。 对照:一级抗体(1/100)和二级抗体 山羊抗鼠IgG H&L(Alexa Fluor®594)预吸附剂(ab150120) (1/500). 该数据是在含有PBS、BSA、甘油和叠氮化钠的不同缓冲液配方中使用相同的抗体克隆得到的( 约32072 ). -
重叠直方图显示HeLa(子宫颈腺癌人上皮细胞系)细胞染色 约32072 (红线)。 用80%甲醇固定细胞(5分钟),然后用0.1%PBS-Tween渗透20分钟。然后在1x PBS/10%正常山羊血清/0.3M甘氨酸中培养细胞,以阻断非特异性蛋白-蛋白质相互作用,然后用抗体( 约32072 ,1/76稀释)在22°C下保持30分钟。 使用的二级抗体是山羊抗狂犬病IgG H&L(Alexa Fluor ® 488)预吸附层( 约150081 )二级抗体在22°C下以1/2000稀释30分钟。 同型对照抗体(黑线)为兔IgG[EPR25A](单克隆)( 约172730 ,1微克/1x10 6 电池)在相同条件下使用。 未标记样本(蓝线)也用作对照。 使用20mW氩离子激光器(488nm)和525/30nm带通滤波器采集了超过5000个事件。 该数据是在含有PBS、BSA、甘油和叠氮化钠的不同缓冲液配方中使用相同的抗体克隆得到的( 约32072 ). -
选定肿瘤和c-Myc染色反应组织的显微照片(阳性染色=棕色细胞核)。 阳性对照(确诊为Burkitt淋巴瘤 c-Myc公司 易位)在>90%的肿瘤细胞(Burkitt)中显示出均匀、强烈的染色。 相反,反应性淋巴组织仅在10%的正常淋巴细胞核(扁桃体)中显示出可变染色。 弥漫性大B细胞淋巴瘤(DLBCL)病例和相关c-Myc+肿瘤细胞核百分比的代表性图像:病例1,90%Myc+; 病例7,70%MYC+; 病例35和38,30%为c-Myc+。 在所述染色条件下,所有病例的c-Myc染色均为纯核染色。 该数据是在含有PBS、BSA、甘油和叠氮化钠的不同缓冲液配方中使用相同的抗体克隆得到的( 约32072 ). -
石蜡包埋小鼠脾组织标记c-Myc的免疫组织化学分析 约32072 稀释1/500,然后 山羊抗狂犬病IgG H&L(HRP)(ab97051)二级抗体 稀释1/500。 小鼠脾脏的核染色。 计数器用苏木精染色。 仅二级抗体对照:使用PBS代替一级抗体,二级抗体 山羊抗狂犬病IgG H&L(HRP)(ab97051)二级抗体 稀释1/500。 该数据是在含有PBS、BSA、甘油和叠氮化钠的不同缓冲液配方中使用相同的抗体克隆得到的( 约32072 ). -
IHC图像 约32072 在Leica Bond上对人类食管福尔马林固定石蜡包埋组织切片进行c-Myc染色。 用柠檬酸钠缓冲液(pH6,表位检索溶液1)进行热介导抗原检索预处理20分钟。 然后将该部分与 约32072 1µg/ml,在室温下保持15分钟,并使用HRP共轭紧凑聚合物系统进行检测。 DAB被用作显色剂。 然后用苏木精对切片进行复染,并用DPX固定。 二级对照组(如插图所示)未使用一级抗体。 对于其他IHC染色系统(自动化和非自动化),客户应优化可变参数,如抗原回收条件、初级抗体浓度和抗体孵育时间。 该数据是在含有PBS、BSA、甘油和叠氮化钠的不同缓冲液配方中使用相同的抗体克隆得到的( 约32072 ). -
用纯化的c-Myc标记人结肠腺癌组织的免疫组织化学(福尔马林/PFA-固定石蜡包埋切片)分析 约32072 1/500。 使用Tris/EDTA缓冲液pH 9进行热介导抗原检索 山羊抗狂犬病IgG H&L(HRP)(ab97051)二级抗体 作为二级抗体(1/500)。 阴性对照使用PBS代替一抗。 苏木精沉彩。 该数据是在含有PBS、BSA、甘油和叠氮化钠的不同缓冲液配方中使用相同的抗体克隆得到的( 约32072 ). -
人弥漫性大B细胞淋巴瘤组织标记c-Myc的免疫组织化学(福尔马林/PFA-固定石蜡包埋切片)分析 约32072 1/500。 使用Tris/EDTA缓冲液pH 9进行热介导抗原检索 山羊抗狂犬病IgG H&L(HRP)(ab97051)二级抗体 作为二级抗体(1/500)。 阴性对照使用PBS代替一抗。 苏木精沉彩。 该数据是在含有PBS、BSA、甘油和叠氮化钠的不同缓冲液配方中使用相同的抗体克隆得到的( 约32072 ). -
未净化的ICC/IF图像 约32072 HeLa(宫颈腺癌人上皮细胞系)细胞染色。 将细胞固定在4%PFA中(10分钟),然后在1%BSA/10%正常山羊血清/0.3M甘氨酸和0.1%PBS-Tween中孵育1小时,以使细胞渗透并阻断非特异性蛋白-蛋白质相互作用。 然后用抗体培养细胞( 约32072 ,1µg/ml)在+4°C下过夜。 二级抗体(绿色)为 山羊抗狂犬病IgG H&L(DyLight®488)预吸附床(ab96899) 以1/250的稀释度使用1h。 Alexa Fluor公司 ® 594 WGA用于标记1/200稀释1h的质膜(红色)。 采用DAPI对浓度为1.43µM的细胞核(蓝色)进行染色。 该数据是在含有PBS、BSA、甘油和叠氮化钠的不同缓冲液配方中使用相同的抗体克隆得到的( 约32072 ).
数据表和文件
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数据表下载
工具书类 (5)
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