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询问:我将对粘附但也很脆弱的细胞进行BrdU检测。在其他类似的分析中,由于细胞在这个过程中很容易分离,所以我在重复之间的可变性方面遇到了困难。我想知道是否可以使用DAPI将BrdU信号正常化为每个孔中仍然存在的细胞数量(无论这些细胞是死的还是活的)?你对如何实现这一目标有什么建议吗?
Abcam社区
已验证客户
2016年4月11日被问及
BrdU细胞增殖ELISA试剂盒(ab126556)提供的固定液能够很好地将细胞保存在微孔中。因此,没有必要再做任何事情来将信号标准化为细胞数量。 也就是说,这样做是一个有趣的想法。如果阅读器能够检测到DAPI,则可以使用随试剂盒提供的固定液和底物/停止液测试DAPI。最大的未知数是DAPI将如何与添加的基质和停止溶液反应。如有必要,可在不使用停止溶液的情况下读取基板(650 nm),但会失去灵敏度。 因此,如果你有能力读取DAPI和TMB信号,你可以尝试。然而,这可能不起作用,我们无法保证。因此,如果你想尝试,我们建议在分析设计中建立对照,并了解已接种的细胞数量。坏的CV可以通过增加复制次数来处理。
2016年4月11日答复