主要功能和细节
重组生产(无动物),实现高批次一致性和长期供应安全 β-连环蛋白兔单克隆抗体[IGX4794R-3] 适用人群:WB、ICC/IF、IHC-Fr、IHC-P 敲除已验证 反应对象:老鼠、人类
概述
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产品名称 -
描述 β-连环蛋白兔单克隆抗体[IGX4794R-3] -
寄主物种 兔子 -
经过测试的应用程序 -
物种反应性 与以下物质反应: 老鼠,人类 -
免疫原 重组全长蛋白。 此信息为Abcam和/或其供应商专有。 -
阳性对照 WB:HCT116、A549、Caco2、Hues7、NIH3T3、mES、E14Tg2a和野生型HAP1全细胞和人结肠组织裂解物。 IHC-P:FFPE人结肠(正常)和人结肠腺癌组织切片。 ICC/IF:MCF-7和野生型HAP1细胞。
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一般注意事项 本产品使用 合成文库与噬菌体展示技术 . 该抗体是一种重组嵌合抗体。 兔嵌合单克隆抗体(人Fab/兔Fc)。
属性
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表格 液体 -
储存说明 在4°C下装运。 短期储存在+4°C下(1-2周)。 交付时,等分。 长期储存于-20°C。 避免冷冻/解冻循环。 -
存储缓冲区 pH值:7.2 防腐剂:0.01%叠氮化钠 成分:0.05%BSA、59%PBS、40%甘油(甘油、甘油) -
正在加载浓度信息。。。 -
克隆性 单克隆 -
克隆编号 IGX4794R-3型 -
同位素 免疫球蛋白G -
研究领域
相关产品
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KO细胞系 -
KO细胞裂解物 -
重组蛋白
应用程序
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目标
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功能 典型Wnt信号通路的关键下游成分。 在缺乏Wnt的情况下,与AXIN1、AXIN2、APC、CSNK1A1和GSK3B形成复合物,促进N末端Ser和Thr残基的磷酸化,并通过BTRC泛素化CTNNB1,随后被蛋白酶体降解。 在Wnt配体的存在下,CTNNB1不是泛素化的,而是聚集在细胞核中,在细胞核中充当TCF/LEF家族转录因子的辅激活剂,从而激活Wnt应答基因。 参与细胞粘附的调节。 大多数β-catenin定位于细胞膜,是E-cadherin/catenin粘附复合物的一部分,拟将钙粘蛋白偶联到肌动蛋白细胞骨架。 -
组织特异性 表达于几种毛囊细胞类型:基底和外周基质细胞,以及内外根鞘细胞。 以冒号表示。 -
参与疾病 CTNNB1缺陷与结直肠癌(CRC)相关[MIM:114500]。 注:CTNNB1的激活突变具有致癌活性,导致肿瘤发展。 体细胞突变存在于各种肿瘤类型中,包括结肠癌、卵巢癌和前列腺癌、肝母细胞瘤(HB)、肝细胞癌(HCC)。 乙肝是一种恶性胚胎性肿瘤,主要影响生命最初三年的幼儿。 CTNNB1缺陷是毛瘤(PTR)的原因[MIM:132600]; 一种常见的良性皮肤肿瘤。 CTNNB1缺陷是髓母细胞瘤(MDB)的原因[MIM:155255]。 MDB是一种恶性的、侵袭性的小脑胚胎性肿瘤,在儿童中最常见。 CTNNB1缺陷是卵巢癌(OC)易感性的一个原因[MIM:167000]。 卵巢癌起源于卵巢组织的常见恶性肿瘤。 尽管已经描述了许多卵巢肿瘤的组织学类型,但上皮性卵巢癌是最常见的形式。卵巢癌通常没有症状,公认的体征和症状,即使是晚期疾病,也很模糊。 因此,大多数患者被诊断为晚期疾病。 注=涉及CTNNB1的染色体畸变见于涎腺多形性腺瘤,这是涎腺最常见的良性上皮肿瘤。 用PLAG1易位t(3;8)(p21;q12)。 -
序列相似性 属于beta-catenin家族。 包含12个ARM重复。 -
翻译后 修改 GSK3B的磷酸化需要另一激酶预先磷酸化Ser-45。 然后,磷酸化从Thr-41进行到Ser-37和Ser-33。 EGF刺激酪氨酸磷酸化。 Tyr-654上的磷酸化降低CDH1结合并增强TBP结合。 当GSK3B磷酸化时,SCF(BTRC)E3连接酶复合物泛素化,导致其降解。 被包含UBE2D1、SIAH1、CACYBP/SIP、SKP1、APC和TBL1X的E3泛素连接酶复合物泛素化,导致其随后的蛋白酶体降解。 -
手机定位 细胞质。 核心。 细胞质>细胞骨架。 细胞连接>粘附连接。 细胞连接。 细胞膜。 当其不稳定(高水平磷酸化)或与CDH1结合时为细胞质。 当其稳定时转移到细胞核(低水平磷酸化)。 与GLIS2和MUC1的相互作用促进核移位。 与EMD的相互作用抑制核定位。 -
UniProt提供的信息 -
数据库链接 -
替代名称 b-连环蛋白抗体 β连环蛋白抗体 β-连环蛋白抗体
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图像
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所有车道: 抗β-连环蛋白抗体[IGX4794R-3](ab223075),1µg/ml 车道1: 野生型HCT 116细胞裂解物 车道2: CTNNB1 CRISPR-Cas9编辑的HCT 116细胞裂解物 每车道20µg的裂解液/蛋白质。 在还原条件下进行。 预测的带宽大小: 85千帕 观察到的频带大小: 95千Da 为什么实际的频带大小与预测的不同? Western blot假彩色图像:抗β-连环蛋白抗体[IGX4794R-3]以1 ug/ml染色,以绿色显示; 小鼠抗GAPDH抗体[6C5]( 约8245 )以1/20000稀释度进行负荷对照染色,以红色显示。在Western blot中,ab223075显示与β-连环蛋白特异结合。 在野生型HCT 116细胞裂解液中观察到95kDa的条带,在CTNNB1 CRISPR-Cas9编辑的细胞系中未观察到该大小的信号 约273712 (CRISPR-Cas9编辑的细胞裂解物 ab275247号 ). 在CRISPR-Cas9编辑的低于95 kDa的裂解物通道中观察到的条带可能代表β-连环蛋白的截断形式。 这还没有进一步研究,基因产物的功能特性也没有确定。 为了生成此图像,分析了野生型和CTNNB1 CRISPR-Cas9编辑的HCT 116细胞裂解物。 首先,样品在SDS-PAGE凝胶上运行,然后转移到硝化纤维素膜上。 TBS-0.1%吐温中3%牛奶中的膜被堵塞 ® 20(TBS-T),然后在4°C下与一级抗体孵育过夜。 在TBS-T中清洗四次斑点,在室温下与二级抗体孵育1小时,再次清洗四次,然后成像。 使用的二级抗体是山羊抗兔IgG H&L(IRDye ® 800CW)预吸收床( ab216773号 )和山羊抗鼠IgG H&L(IRDye ® 680RD)预吸收床( 约216776 )稀释1/20000。 -
所有车道: 抗β-连环蛋白抗体[IGX4794R-3](ab223075),1µg/ml 车道1: 野生型HCT116细胞裂解物 车道2: CTNNB1敲除HCT116细胞裂解物 每车道20µg的裂解液/蛋白质。 在还原条件下进行。 预测的带宽大小: 85千帕 观察到的频带大小: 95千Da 为什么实际的频带大小与预测的不同? 1-2车道: 合并信号(红色和绿色)。 绿色-在95 kDa下观察到ab223075。 红色-加载控制 约8245 (小鼠抗GAPDH抗体[6C5])。 western blot显示ab223075与HCT 116野生型细胞中的抗β-连环蛋白反应,在CTNNB1敲除细胞系中观察到信号丢失 约273712 (CTNNB1敲除细胞裂解物 ab275247号 ). 对HCT 116野生型和CTNNB1敲除细胞裂解物进行SDS-PAGE分析。 在TBS-T(0.1%吐温)中50%(v/v)的荧光蛋白印迹(TBS-based)封闭溶液中封闭膜 ® )在与ab223075和 约8245 (小鼠抗GAPDH抗体[6C5])分别以1µg/ml和1:20000稀释液在4°C下过夜。 印迹与山羊抗兔IgG H&L(IRDye)孵育 ® 800CW)预吸收床( ab216773号 )和山羊抗鼠IgG H&L(IRDye ® 680RD)预吸收床( 约216776 )二级抗体在成像前在室温下以1:20000稀释1小时。 -
ab223075染色野生型HAP1细胞中的β-连环蛋白(顶部)和CTNNB1(β-连环素)敲除HAP1的细胞(底部)。 细胞用100%甲醇固定(5分钟),用0.1%Triton X-100渗透5分钟,然后用1%BSA/10%正常山羊血清/0.3M甘氨酸在0.1%PBS-Tween中封闭1小时。 然后将细胞与ab223075以0.05μg/ml孵育 约195889年 以1/250稀释(显示为红色),在+4°C下过夜,然后在室温下与山羊抗兔IgG第二抗体(Alexa Fluor 488)进一步孵育1h( 约150081 )浓度为2μg/ml(以绿色显示)。 核DNA用DAPI标记为蓝色。 使用共焦显微镜(Leica-Microsystems,TCS SP8)拍摄图像。 -
Leica Bond上福尔马林固定石蜡包埋的人类结肠(正常)*切片中CTNNB1染色的IHC图像 TM公司 用柠檬酸钠缓冲液(pH6,表位检索溶液1)进行热介导抗原检索预处理20分钟,然后使用 约64212 然后在室温下用ab223075(0.25ug/ml)培养切片15分钟,并使用HRP结合ABC系统检测。 DAB被用作显色剂。 然后用苏木精对切片进行复染,并用DPX固定。 插入阴性对照图像取自无一级抗体的相同分析。 对于其他IHC染色系统(自动化和非自动化),客户应优化可变参数,如抗原回收条件、初级抗体浓度和抗体孵育时间。 * 组织取自人类研究组织库,由NIHR剑桥生物医学研究中心支持 -
所有车道: 抗β-连环蛋白抗体[IGX4794R-3](ab223075),1µg/ml 车道1: A549(人肺腺癌上皮细胞系)全细胞裂解液 车道2: Caco 2(人结肠癌细胞系)全细胞裂解液 3号车道: HUES7(人胚胎干细胞系)全细胞裂解液 车道4: NIH 3T3(小鼠胚胎成纤维细胞系)全细胞裂解液 车道5: mES(小鼠胚胎干细胞)全细胞裂解液 车道6: E14Tg2a(小鼠胚胎干细胞系)全细胞裂解液 7号车道: 结肠(人)组织裂解物-成人正常组织 车道8: 野生型HAP1全细胞裂解物 9号车道: β-连环蛋白敲除HAP1全细胞裂解物 每条泳道10µg的裂解物/蛋白质。 次要 所有车道: 1/50000稀释度的过氧化物酶亲和纯山羊抗狂犬病IgG(H+L) 使用ECL技术开发。 在还原条件下进行。 预测的带宽大小: 85千帕 观察到的频带大小: 92千帕 为什么实际的频带大小与预测的不同? 暴露时间: 3分钟 该印迹是在MOPS缓冲系统下使用4-12%双三凝胶生成的。 凝胶在200V下运行50分钟,然后在30V下转移到硝化纤维膜上70分钟。 然后用3%的牛奶封闭膜一小时,然后用ab223075在4°C下孵育过夜。 使用与HRP结合的抗兔抗体检测抗体结合,并使用ECL显影液进行可视化 约133406 . -
车道1: 野生型HAP1全细胞裂解物(10µg) 车道2: CTNNB1(β-连环蛋白)敲除HAP1全细胞裂解物(10µg) 3号车道: A431全细胞裂解物(10µg) 车道4: Caco-2全细胞裂解物(10µg) 车道1-4: 合并信号(红色和绿色)。 绿色-在95 kDa下观察到ab223075。 红色-装载控制, 约9484 ,在37 kDa下观察到。 ab223075在野生型HAP1细胞中与CTNNB1(β-连环蛋白)特异性反应,并伴有额外的交叉反应带。 使用剔除样品时未观察到条带。 对野生型和CTNNB1(β-连环蛋白)敲除样品进行SDS-PAGE分析。 ab223075和 约9484 (小鼠抗GAPDH负荷对照)分别在4℃、1µg/ml和1/10000稀释度下培养过夜。 用山羊抗兔IgG H&L(IRDye ® 800CW)预吸收床 ab216773号 和山羊抗鼠IgG H&L(IRDye ® 680RD)预吸收 约216776 二级抗体在成像前在室温下以1/20000稀释1小时。 -
ab223075染色MCF-7细胞中的CTNNB1。 用100%甲醇固定细胞(5分钟),用1%BSA/10%正常山羊血清/0.3M甘氨酸在0.1%PBS吐温中封闭1h。 然后将细胞与浓度为0.05µg/ml的ab223075在+4°C下孵育过夜,然后用Alexa Fluor检测 ® 488羊抗兔二级抗体( 约150081 )稀释度为1/1000(以绿色显示)。 用DAPI标记核DNA(以蓝色显示) 约195889年 ,小鼠单克隆抗α-管蛋白(Alexa Fluor ® 594),稀释度为1/250(以红色显示)。 使用共焦显微镜(Leica-Microsystems,TCS SP8)拍摄图像。 在相同的测试条件下,该产品在4%甲醛(10分钟)固定的MCF-7细胞中也发出阳性信号。 -
Leica BOND上福尔马林固定石蜡包埋人结肠腺癌切片CTNNB1染色的IHC图像 TM公司 用柠檬酸钠缓冲液(pH6,表位检索溶液1)进行热介导抗原检索预处理20分钟。 然后在室温下用ab223075,0.1ug/ml稀释液培养该切片15分钟,并使用HRP共轭紧凑聚合物系统检测。 DAB被用作显色剂。 然后用苏木精对切片进行复染,并用DPX固定。 插入阴性对照图像取自无一级抗体的相同分析。 对于其他IHC染色系统(自动化和非自动化),客户应优化可变参数,如抗原回收条件、初级抗体浓度和抗体孵育时间。 * 组织取自人类研究组织库,由NIHR剑桥生物医学研究中心支持
数据表和文件
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数据表下载
工具书类 (18)
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