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你好,我正在尝试从我的抗体样本中去除BSA。抗体是来自sigma-aldrich(产品编号:m7939)的兔抗肌球蛋白IIb。我试着用你的抗体纯化试剂盒纯化抗体,但当我洗脱它(你的方案中的第4步)时,我并没有真正看到任何蛋白质(从280nm的吸光度中)。根据Sigma,样本中应该有1.2 mg/ml的抗体和10 mg/ml的BSA。我在80 ul PBS中添加了20 ul的抗体(我不想使用整个样本)。这样我就可以得到100ul的0.24 mg/ml抗体,总共24 ug抗体。我在抗体纯化试剂盒的方案中使用了这100 ul的等分样品。但正如我所说,我并没有真正看到任何蛋白质(280吸光度)从柱中出来。你能告诉我可能出了什么问题吗?
Abcam社区
已验证客户
2012年10月1日询问
感谢您提请我们注意。假设你遵循了孵育和洗脱协议,我不确定可能出了什么问题。过去几个月我们没有收到任何投诉。您是否尝试过获取洗涤液的吸光度读数,或测试BSA溶液,例如0.25 mg/ml?柱子在任何时候都干了吗?
2012年10月1日答复