主要功能和细节
重组生产(无动物),实现高批次一致性和长期供应安全 兔抗α-同核蛋白单克隆抗体[MJFR1] 适用于:Flow Cyt(Intra)、WB、IHC-P、IP、ICC/IF 敲除已验证 反应对象:人类
相关偶联物和制剂
概述
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产品名称 -
描述 兔抗α-同核蛋白单克隆抗体[MJFR1] -
宿主物种 兔子 -
经过测试的应用程序 -
物种反应性 与以下物质反应: 人类 -
免疫原 人α-同核蛋白aa 1内的重组全长蛋白到C末端。 确切的顺序是专有的。 数据库链接: 第37840页 -
表位 表位被映射到氨基酸118-123(VDPDNE)。 -
阳性对照 WB:重组人α-同核蛋白( 约51189 )、HAP1和HEK293-T细胞裂解物; 人脑全细胞裂解物; 人脑组织裂解物。 IHC-P:FFPE人正常大脑皮层; FFPE人类正常和帕金森黑质组织。 流式细胞周期(内部):Hap1细胞。 ICC/IF:Hap1和U87-MG细胞。
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一般注意事项 Alpha-Synuclein主要在大脑中表达,集中在突触前神经末梢。 大量突触前脑蛋白α-同核蛋白作为纤维聚集物沉积在神经元或胶质细胞中是神经退行性疾病的一个特征性病变。 这些疾病包括帕金森氏病(PD)、路易体痴呆(DLB)和多系统萎缩,统称为同核蛋白病。 帕金森氏病(PD)是一种常见的神经退行性疾病,其特征是含有α-同核蛋白和泛素的蛋白内含物在特定神经元中进行性积累。 这种抗体是在迈克尔·J·福克斯基金会的支持下,与迈克尔·施洛斯马赫博士(渥太华大学)的实验室合作开发的。 Abcam推荐的二级犬-山羊抗狂犬病HRP( 约205718 )和山羊抗兔Alexa Fluor®488( 约150077 ). 或者搜索我们广泛的二级抗体用于您的实验。 该产品是一种重组单克隆抗体,具有以下优点: -高批次一致性和再现性 -提高敏感性和特异性 -长期供应安全 -无动物生产
有关更多信息 请看这里 . 我们的RabMAb ® 该技术是一种基于杂交瘤的专利技术,用于制备兔单克隆抗体。 有关我们专利的详细信息,请参阅 拉布MAb ® 专利 . 大鼠:我们有初步的内部测试数据,表明该抗体可能不会与该物种发生反应。 请联系我们了解更多信息。
属性
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表格 液体 -
储存说明 在4°C下装运。 短期储存在+4°C下(1-2周)。 交付时,等分。 储存于-20°C。 避免冷冻/解冻循环。 -
存储缓冲区 防腐剂:0.01%叠氮化钠 成分:40%甘油、0.05%BSA、59%PBS -
浓度信息加载。。。 -
纯度 蛋白质A纯化 -
克隆性 单克隆 -
克隆编号 MJFR1型 -
同位素 IgG抗体 -
研究领域
相关产品
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替代版本 -
共轭试剂盒 -
同位素控制 -
KO细胞系 -
KO细胞裂解物 -
阳性对照 -
重组蛋白 -
相关产品
应用
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目标
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功能 可能参与多巴胺释放和转运的调节。 诱导微管相关蛋白tau的纤维化。 降低神经元对各种凋亡刺激的反应性,导致caspase-3活化降低。 -
组织特异性 主要在大脑中表达,但在除肝脏外的所有检查组织中也以低浓度表达。 集中于突触前神经末梢。 -
参与疾病 SNCA的基因改变导致异常聚合为原纤维,与几种神经退行性疾病(突触核蛋白病)有关。 SNCA纤维聚集物是阿尔茨海默病淀粉样斑块的主要非A-β成分,也是路易体内含物的主要成分。 在1型脑铁蓄积性神经退行性变的路易体(LB)样神经元内包涵体、胶质包涵体和轴突球体中也发现了它们。 帕金森病1 帕金森病4 路易痴呆体 -
序列相似性 属于突触核蛋白家族。 -
域 “阿尔茨海默病淀粉样斑块的非A-β成分”域(NAC域)参与原纤维的形成。 中间的疏水区域形成了纤丝的核心。 C末端可以调节聚集并决定纤丝的直径。 -
翻译后 修改 磷酸化,主要是丝氨酸残基。 CK1的磷酸化作用似乎发生在不同于其他激酶磷酸化的残基上。 在同核蛋白病变中,Ser-129的磷酸化是选择性的和广泛的。 在体外,Ser-129的磷酸化促进了不溶性纤维的形成。 渗透胁迫下通过PTK2B依赖途径对Tyr-125进行磷酸化。 神经退行性同核蛋白病的标志性病变包含α-同核蛋白,该蛋白通过酪氨酸残基的硝化进行修饰,并可能通过二酪氨酸交联生成稳定的低聚物。 泛素化的。 主要的共轭物是双泛素形式。 Met-1处的乙酰化对正确折叠和天然低聚物结构似乎很重要。 -
手机定位 细胞质,胞浆。 膜。 核心。 细胞连接,突触。 保密。 多巴胺能神经元的膜结合。 -
UniProt提供的信息 -
数据库链接 -
替代名称 α-突触核蛋白抗体 α-同核蛋白抗体 α-同核蛋白,NACP140亚型抗体
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图像
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所有车道: 抗α-同核蛋白抗体[MJFR1](ab138501),稀释度为1/10000 车道1: 野生型HEK-293T细胞裂解物 车道2: SNCA敲除HEK-293T细胞裂解物 每车道20µg的裂解液/蛋白质。 在还原条件下进行。 预测的带宽大小: 14千Da 观察到的频带大小: 18千Da 为什么实际的频带大小与预测的不同? 1-2车道: 合并信号(红色和绿色)。 绿色-在18 kDa时观察到ab138501。 红色-抗-GAPDH抗体[6C5]-负荷控制( 约8245 )在37 kDa时观察到。 western blot显示ab138501与野生型HEK-293T细胞中的SNCA反应。 敲除细胞系时观察到信号丢失 ab255433号 (敲除细胞裂解物 约263769 )已使用。 野生型HEK-293T和SNCA敲除型HEK-29.3T细胞裂解物接受SDS-PAGE。 在室温下,将膜在0.1%的TBST和3%的脱脂奶粉中封闭1小时。 ab138501和抗-GAPDH抗体[6C5]-负荷控制( 约8245 )在4°C下过夜,分别以1/10000和1/20000稀释。 用山羊抗兔IgG H&L(IRDye ® 800CW)预吸附床( 邮编:216773 )和山羊抗鼠IgG H&L(IRDye ® 680RD)预吸附床( 约216776 )二级抗体在成像前在室温下以1:20000稀释1小时。 -
正常人大脑皮层福尔马林固定石蜡包埋组织切片中α-Synuclein染色的IHC图像,使用标准方案F在Leica Bond™系统上进行。该切片使用柠檬酸钠缓冲液(pH6,表位检索溶液1)进行热介导抗原检索预处理20分钟。 然后在室温下用ab138501(5µg/ml)孵育该切片15分钟,并使用HRP共轭紧凑聚合物系统进行检测。 DAB被用作显色剂。 然后用苏木精对切片进行复染,并用DPX固定。 对于其他IHC染色系统(自动化和非自动化),客户应优化可变参数,如抗原回收条件、初级抗体浓度和抗体孵育时间。 -
ab138501染色野生型Hap1细胞中的Alpha-Synuclein(上图)和SNCA敲除Hap1的细胞(下图)。 用4%多聚甲醛固定细胞(10分钟),然后用0.1%Triton X-100透化5分钟,然后用1%BSA/10%正常山羊血清/0.3M甘氨酸在0.1%PBS吐温中封闭1小时。 然后用浓度为0.1μg/ml的ab138501培养细胞,并 约7291 (鼠抗α-管蛋白单克隆抗体)在4°C下以1/1000稀释过夜,然后在室温下用山羊抗兔IgG二级抗体(Alexa Fluor ® 488) ( 约150081 )以2μg/ml(绿色显示)和山羊对小鼠IgG的二级抗体(Alexa Fluor ® 594) ( ab150120型 )浓度为2μg/ml(显示为红色)。 核DNA用DAPI标记为蓝色。 使用共聚焦显微镜(Leica Microsystems TCS SP8)拍摄图像。 -
用纯化的ab138501在1/150稀释度下标记α-突触核蛋白的U87-MG(人胶质母细胞瘤-星形细胞瘤上皮细胞系)细胞的免疫细胞化学/免疫荧光分析(左面板)。 细胞用4%多聚甲醛固定。 山羊抗兔IgG(Alexa Fluor ® 第二抗体为555)(1/200)。 DAPI(蓝色)作为核反染剂(右侧)。 -
所有车道: 抗α-同核蛋白抗体[MJFR1](ab138501),稀释度为1/10000 车道1: 野生型HAP1全细胞裂解物 车道2: SNCA敲除HAP1全细胞裂解物 车道3: 人脑全细胞裂解物 车道4: 小鼠脑全细胞裂解物 每车道40µg的裂解液/蛋白质。 预测的带宽大小: 14千Da 1-4车道: 合并信号(红色和绿色)。 绿色-在14 kDa时观察到ab138501。 红色-装载控制, 约8245 ,在37 kDa下观察到。 ab138501在野生型HAP1细胞中与SNCA特异性反应。 使用SNCA敲除样品时未观察到条带。 对野生型和SNCA敲除的样品进行SDS-PAGE。 Ab138501和 约8245 (小鼠抗GAPDH负荷对照)分别在4°C下以1/10000和1/10000稀释度孵育过夜。 用山羊抗兔IgG H&L(IRDye ® 800CW)预吸收床 邮编:216773 和山羊抗小鼠IgG H&L(IRDye ® 680RD)预吸收床 约216776 二级抗体在成像前在室温下以1/10000稀释1小时。 -
重叠直方图显示用ab138501染色的HAP1野生型(绿线)和HAP1-SNCA敲除细胞(红线)。 用80%甲醇固定细胞(5分钟),然后用0.1%PBS-Triton X-100渗透15分钟。然后在1x PBS/10%正常山羊血清中培养细胞,以阻止非特异性蛋白质相互作用,随后在22°C下用抗体(ab138501,1µg/ml)培养30分钟。 使用的二级抗体是Alexa Fluor ® 488山羊抗兔IgG(H&L)预吸收( 约150081 )在22°C下以1/2000稀释30分钟。 一种兔IgG同型控制抗体( 约172730 )在与第一抗体相同的浓度和条件下使用(HAP1野生型-黑线,HAP1-SNCA敲除-灰线)。 未标记样本也用作对照(为了简单起见,未显示此行)。 使用50 mW蓝光激光器(488nm)和530/30带通滤波器采集了超过5000个事件。 -
抗α-同核蛋白抗体[MJFR1](ab138501),稀释(纯化)1/10000+人胎脑,20µg 次要 抗狂犬病IgG(HRP),针对1/1000稀释度的非还原型IgG 预测的带宽大小: 14千Da 观察到的频带大小: 18千Da 为什么实际的频带大小与预测的不同? 封闭和稀释缓冲液和浓度:5%NFDM/TBST -
2%多聚甲醛固定HeLa(宫颈腺癌人上皮细胞)细胞的细胞内流式细胞术分析,用纯化的ab138501在1/200稀释度下标记α-突触核蛋白。 次级抗体为羊抗兔IgG(FITC),稀释度为1/150。 同种型对照为兔单克隆IgG(绿线)。 -
正常人黑质福尔马林固定石蜡包埋组织切片中α-突触核蛋白染色的IHC图像,使用标准方案F在Leica Bond™系统上进行。该切片使用柠檬酸钠缓冲液(pH6,表位检索溶液1)进行热介导抗原检索预处理20分钟。 然后在室温下用ab138501(5µg/ml)孵育该切片15分钟,并使用HRP共轭紧凑聚合物系统进行检测。 DAB被用作显色剂。 然后用苏木精对切片进行复染,并用DPX固定。 对于其他IHC染色系统(自动化和非自动化),客户应优化可变参数,如抗原回收条件、初级抗体浓度和抗体孵育时间。 -
帕金森病患者黑质福尔马林固定石蜡包埋组织切片中α-突触核蛋白染色的IHC图像,使用标准方案F在Leica Bond™系统上进行。该切片使用柠檬酸钠缓冲液(pH6,表位检索溶液1)进行热介导抗原检索预处理20分钟。 然后在室温下用ab138501(5µg/ml)孵育该切片15分钟,并使用HRP共轭紧凑聚合物系统进行检测。 DAB被用作显色剂。 然后用苏木精对切片进行复染,并用DPX固定。 对于其他IHC染色系统(自动化和非自动化),客户应优化可变参数,如抗原回收条件、初级抗体浓度和抗体孵育时间。 *组织取自人类研究组织库,由NIHR剑桥生物医学研究中心支持 -
使用纯化的ab138501以1/600稀释度从人胎脑组织中免疫沉淀α-突触核蛋白。 使用纯化的ab138501对免疫沉淀物进行蛋白质印迹。 山羊抗狂犬病IgG,(H+L),过氧化物酶偶联物用作次级抗体,稀释度为1/1000。 阻塞和稀释缓冲液和浓度:5%NFDM/TBST。 -
人肾透明细胞癌的免疫组织化学(福尔马林/PFA固定石蜡包埋切片)分析用1/150稀释的纯化ab138501标记α-突触核蛋白。 使用Tris/EDTA缓冲液pH 9进行热介导抗原检索。 兔IgG的HRP预稀释聚合物用作二级抗体。 苏木精反染。
数据表和文件
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SDS下载 -
数据表下载
工具书类 (118)
拉费里埃F 等人。 MSA和帕金森病的α-突触核蛋白聚集体中存在类似的神经元印迹,没有交叉种子纤维。 NPJ帕金森病 8:10 (2022). 公共医学:35027576 于Z 等人。 用于帕金森病诊断的红细胞α-突触核蛋白及其与临床特征的相关性。 前老化神经科学 14:827493 (2022). 公共医学:35185529 刘Z 等人。 含α-突触核蛋白的红细胞胞外小泡:帕金森病单核细胞过度激活的重要因素。 J神经炎症 19:53 (2022). 公共医学:35193594 刘W 等人。 一种新型丝氨酸-129磷酸化α-突触核蛋白单克隆抗体的鉴定:在临床和基础研究中的潜在应用。 前Neurol 13:821792 (2022). 公共医学:35250825 吴Z 等人。 SNCA及其甲基化在膀胱癌中的预后意义。 BMC癌症 22:330 (2022). 公共医学:35346107