简介

  • 产品名称

    抗α平滑肌肌动蛋白抗体[1A4]
    参见所有α-平滑肌肌动蛋白一级抗体
  • 描述

    小鼠单克隆[1A4]对α平滑肌肌动蛋白的影响
  • 寄主种

    鼠标
  • 特异性

    该抗体与血管平滑肌和肠、睾丸和卵巢实质组织反应。

  • 测试应用

    适用于:ICC/IFELISAIHC-P免疫复合物受体世界银行流式细胞术国际商会更多细节
  • 物种反应性

    与之反应:小鼠,大鼠,绵羊,兔,人,猪
    预计工作:牛,哺乳动物,Baboon
  • 免疫原

    与人α平滑肌肌动蛋白(N末端)相对应的合成肽。
    数据库链接:P627

  • 阳性对照

    • WB:HeLa全细胞裂解液AB1500)和核裂解物,HEK-293全细胞裂解物。(FC:FS:4040-SMC)。IHC-P:人乳腺导管癌组织。
  • 一般注释

    该抗体克隆[1A4]由ABCAM制造。

    如果你需要这种抗体在特定的缓冲配方或实验中的特定结合物,请联系Orths@ abcAM.com或者你可以找到更多的信息在这里.

     

性能

应用

我们的保证担保覆盖使用AB7817在以下测试应用中。

应用注意事项包括推荐的起始稀释液;最佳稀释/浓度应由最终用户确定。

应用 退让 笔记
ICC/IF 使用浓度为1~5μg/ml。
ELISA 1/200—1/1000。
IHC-P 使用浓度为0.1~0.5μg/ml。用柠檬酸盐缓冲液pH 6进行热介导的抗原检索,然后用IHC染色方案开始。
免疫复合物受体 使用依赖于测定的浓度。
世界银行 1/100—1/300。
流式细胞术 使用0.1克10细胞。
国际商会 使用依赖于测定的浓度。

目标

图像

  • AB7817免疫组化荧光染色法检测小鼠小肠组织中α-平滑肌肌动蛋白的表达。用甲醛固定组织,在室温下用100% CAS块封闭30分钟,用热介导的柠檬酸缓冲液PH6进行抗原提取。样品在4℃下以1/200稀释液一次抗体孵育16小时。®488羊抗小鼠IgG作为1/400倍稀释的二次抗体。Autofluorescence在70%乙醇中用0.1%苏丹红在室温下经抗原提取后10分钟封闭,然后在抗原提取后用PBS-T进行3X洗涤。图像采用共焦显微镜观察。

    见复审

  • α-平滑肌肌动蛋白染色在人乳腺导管癌福尔马林固定石蜡包埋组织切片中,使用标准协议F在徕卡邦德系统上进行,该切片用热介导的抗原检索用柠檬酸钠缓冲液(PH6,表位检索溶液1)预处理20分钟。然后将该切片与AB7817,0.1μg/ml孵育,在室温下15分钟,并用HRP缀合的紧凑聚合物系统检测。使用DAB作为显色剂。然后切片用苏木精复染,并安装DPX。

     

    对于其他IHC染色系统(自动化和非自动化),客户应优化可变参数,如抗原检索条件,一级抗体浓度和抗体孵育时间。

    *由人类研究组织库获得的组织,由NIHR剑桥生物医学研究中心支持

  • 所有车道:抗α平滑肌肌动蛋白抗体[1A4](AB7817),在1μg/ml

    第1巷:Hela(人上皮癌细胞系)全细胞裂解物
    第2巷:Hela(人上皮癌细胞系)核裂解物
    第3巷:A431(人)全细胞裂解液
    第4巷:Jurkat(人)全细胞裂解液
    第5巷:HEK293(人)全细胞裂解物

    裂解物/蛋白质,每车道20盎司。

    次要的
    所有车道:绵羊IgG -H和L预富集(HRP)1/5000稀释多克隆

    采用ECL技术开发。

    在还原条件下进行。

    曝光时间:30秒
  • 抗α平滑肌肌动蛋白抗体[1A4](AB7817)在1/200稀释(样品在4℃用TBS TWEN 0,5% LaIT 5% NaN3)孵育16小时+小鼠肠组织在14℃,5%毫升牛奶在25℃下1小时。

    次要的
    山羊抗小鼠IgG(H+L)1/5000稀释液

    采用ECL技术开发。

    在还原条件下进行。

    曝光时间:1秒

    见复审

  • AB7817通过ICC/IF(免疫细胞化学/免疫荧光)在小鼠原代结肠肌成纤维细胞中染色α-平滑肌肌动蛋白(Green)。用丙酮固定细胞,在25°C下用5%的BSA封闭30小时。样品在25℃下与原代抗体(1/100个PBS+5% BSA)孵育2小时。驴抗鼠IgG H&L(DyLable®488)(AB9675)(1/1000)作为第二抗体。共染色AB92547兔抗Vimentin(红)。

    见复审

  • AB7817通过免疫组化(PFA灌注固定冷冻切片)染色人脑组织切片中的α平滑肌肌动蛋白。将组织标本用多聚甲醛灌注固定,切割成20微米切片,用0.1 M PBS和1% Triton X渗透,在24℃下用10%血清封闭60分钟,样品在4℃下与原抗体(1/200μm的0.1M PBST和10%驴血清)孵育24小时。阿列克萨氟®568的驴单克隆抗体(1/1000)作为第二抗体。

    见复审

  • Ab7817在Sv40LT-SMC细胞中染色。在室温下用4%多聚甲醛(10min)固定细胞,并与含有10%山羊血清、0.3甘氨酸、1% BSA和0.1% Triton的1BS在室温下孵育1h,使细胞通透并阻断非特异性蛋白-蛋白质相互作用。然后将细胞与抗体AB7817孵育在5μg/ml过夜+ 4°C。第二抗体是山羊抗小鼠IgG H&L(Alexa For Orth®488)预吸附(AB15117(绿色)在室温下使用1μg/ml,持续1小时。DAPI用于在室温下以1.43μm的浓度染色细胞核(蓝色)1h。

  • 戴维斯FM等人研究了乳腺干细胞在成人中的分化潜能。AB7817对R26 EYFP+细胞平滑肌肌动蛋白的染色[Ca] 30EYFP小鼠在1:200稀释。

  • AB7817通过IC/IF(免疫细胞化学/免疫荧光)在人IMR-90(人肺成纤维细胞)细胞中染色α-平滑肌肌动蛋白。用多聚甲醛固定细胞,用0.1% Triton X-100透皮,在室温下用100% CAD块封闭30分钟。样品在抗体稀释缓冲液中与初级抗体1/200一起孵育4小时。®488的多克隆山羊抗小鼠IgG(稀释1/400)作为二级抗体。

    见复审

  • AB7817通过ICC/IF(免疫细胞化学/免疫荧光)在小鼠心脏细胞中染色α-平滑肌肌动蛋白。用多聚甲醛固定细胞,用Triton X-100透皮,在室温下用5%的BSA封闭30分钟。样品在阻断缓冲液中与一级抗体1/100一起孵育2小时。阿列克萨氟®488单克隆抗体单克隆抗体,小鼠IgG,稀释1/200,被用作二级抗体。

    见复审

  • AB7817通过免疫组织化学染色(IHC-P -多聚甲醛固定,石蜡包埋切片)染色α-平滑肌肌动蛋白在人肝组织切片。用多聚甲醛固定组织,用TWEN对洗涤缓冲液进行透皮吸收,在TIDS-EDTA缓冲液中热调解,pH 9。样品在20℃下用一次抗体(阻断缓冲液中的1/100)孵育30分钟,用HRP缀合的山羊抗小鼠IgG多克隆(未稀释)作为第二抗体。

    见复审

  • 叠加直方图显示,用AB7817(红线)染色的S40LT-SMC细胞。用4%甲醛(10分钟)固定细胞,然后用0.1%个PBS Triton X-100渗透15分钟,然后在1X PBS/10%正常山羊血清中孵育以阻断非特异性蛋白-蛋白相互作用,随后是抗体(AB7817、0.1μg/1x10)。细胞)在22°C下30分钟,所用的第二抗体是山羊抗小鼠IgG H&L(Alexa Furor®488)。AB15113在22℃下稀释1/2000分钟30分钟

    同种型对照抗体(黑线)为小鼠IgG2A[18C8BC7AD10]AB170191在与原抗体相同的浓度和条件下使用。未标记的样品(蓝线)也被用作对照。

    用50 MW蓝光激光器(48 8nm)和530/30带通滤波器采集5000个事件。

    该抗体在80%甲醇(5分钟)固定的HeLa细胞中产生阳性信号,在相同条件下用0.1% PBS Triton X-100渗透15分钟。

  • 小鼠主动脉(A)或皮肤(B)组织的免疫组化分析,用AB7817染色α平滑肌肌动蛋白。

    用10%中性缓冲福尔马林固定组织,用1%血清封闭45分钟21和DEGC;用酶法回收0.0001%胰蛋白酶CaCl中的抗原。样品与原抗体(4和微克/毫升在0.3%个Triton X-100在PBS)孵育1小时,在21和DEGC。以生物素结合的马抗鼠多克隆IgG(1/50)作为第二抗体。

    见复审

推荐信

该产品已被引用:

  • 蔡X等。 miR-124a增强骨髓基质细胞移植治疗糖尿病肾病相关的上皮间质转化和纤维化。 J细胞生物化学 一百二十一:29~312(2020)。阅读更多(PubMed:31190436)
  • 沙菲克米等。 使用神经肽物质p-共轭小直径血管移植物原位血管再生。 生物制药公司 一百零七:16691683:(2019)。阅读更多(PubMed:30315717)
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客户评论与问答

-属于91评论或问答

应用
免疫组化法(福尔马林/PFA固定石蜡切片)
样品
绵羊组织切片(骨)
抗原检索步骤
透化作用
是- 0.025% Triton X100
规格
骨头
阻塞步骤
血清阻断剂为30分钟(S)·浓度:20%℃:20℃
固定剂
多聚甲醛

用户社区

核实客户

2019 9月19日提交

应用
免疫组化(冰冻切片)
样品
猪组织切片(牙槽骨)
透化作用
规格
牙槽骨
阻塞步骤
血清作为30分钟(s)·浓度的阻断剂:5%
固定剂
多聚甲醛

Jie Pan博士

核实客户

2019 9月17日提交

应用
免疫组化(冰冻切片)
样品
人体组织切片(牙槽骨)
透化作用
规格
牙槽骨
阻塞步骤
血清阻断剂为30分钟(S)·浓度:5%℃:25℃
固定剂
多聚甲醛

Jie Pan博士

核实客户

2019 9月17日提交

应用
免疫组化法(福尔马林/PFA固定石蜡切片)
样品
马组织切片(子宫内膜)
抗原检索步骤
热介导缓冲液/酶:柠檬酸盐缓冲液pH 6
透化作用
规格
子宫内膜
阻塞步骤
血清阻断剂为1小时(s)和0分钟(s)·浓度:10%℃:温度20℃
固定剂
甲醛

用户社区

核实客户

2019 7月29日提交

应用
免疫细胞化学
样品
人培养细胞(人冠状动脉平滑肌细胞)
透化作用
是- 0.1% Triton X-100
规格
人冠状动脉平滑肌细胞
阻塞步骤
BSA作为30分钟(s)·浓度的阻断剂:3%℃:25℃
固定剂
甲醛

用户社区

核实客户

2019 4月16日提交

应用
免疫组化法(福尔马林/PFA固定石蜡切片)
样品
小鼠组织切片(胰腺)
抗原检索步骤
热介导缓冲液/酶:柠檬酸钠pH 6
透化作用
规格
胰腺
固定剂
10% NBF

David Burk博士

核实客户

2018 12月10日提交

应用
免疫组化法(福尔马林/PFA固定石蜡切片)
样品
兔组织切片(小肠)
抗原检索步骤
热传导缓冲液/酶:柠檬酸钠
透化作用
是- Triton X-100
规格
小肠
阻塞步骤
BSA作为20分钟(S)·浓度的阻断剂:5%℃:RT°C
固定剂
甲醛

Egi Kardia博士

核实客户

十二月07日提交2018

应用
蛋白质印迹法
样品
人细胞裂解物-全细胞(人原代真皮成纤维细胞)
凝胶运行条件
变性变性(15%)
装载量
25μg
规格
人原代真皮成纤维细胞
阻塞步骤
牛奶作为30分钟(s)·浓度的封闭剂:5%℃:23℃

Vladimir Milenkovic博士

核实客户

2018 11月29日提交

应用
免疫组化(冰冻切片)
样品
人体组织切片(胰腺癌)
透化作用
是- 0.5% TX100
规格
胰腺癌
阻塞步骤
血清阻断剂为20分钟(S)·浓度:5%℃:23℃
固定剂
多聚甲醛

Vladimir Milenkovic博士

核实客户

2018 10月24日提交

应用
免疫组化(冰冻切片)
样品
小鼠组织切片(胰腺)
透化作用
是- 0.5% TX100
规格
胰腺
阻塞步骤
血清阻断剂为20分钟(S)·浓度:5%℃:23℃
固定剂
多聚甲醛

Vladimir Milenkovic博士

核实客户

2018 10月24日提交

-属于91评论或问答

请注意:所有产品仅用于研究用途。不用于诊断程序
有关许可证查询,请联系PosisSts@ ABCAMC.

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