概述
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产品名称 -
产品概述 CRISPR/Cas9实现的敲除细胞裂解物。 -
亲代细胞系 A549型 -
有机体 人类 -
突变描述 利用CRISPR/Cas9实现敲除,纯合子:在第5外显子中插入78 bp,引入过早的STOP密码子 -
通道编号 <20 -
淘汰验证 Sanger测序,Western Blot(WB) -
重组说明 为了用作白细胞对照,将冻干液重新悬浮在50µL LDS*样品缓冲液中,使最终浓度达到2 mg/ml。对于还原条件,我们建议最终浓度为0.1 M DTT。 *不建议将SDS样品缓冲液用于这些冻干溶血物。 -
笔记 裂解液制备: 我们的裂解产物是使用RIPA缓冲液制成的,我们在其中添加了蛋白酶抑制剂鸡尾酒和磷酸酶抑制剂鸡尾液(比例:300:100:10)。 这意味着感兴趣的蛋白质变性了。 如果您需要天然形式的蛋白质,请使用活细胞版本-找到 在这里 。请参阅我们的裂解协议,了解我们裂解产物的制备方法的更多详细信息。 用户存储说明: 冻干液可在4°C下储存。 复原后,在-20°C下短期保存或-80°C下长期保存。 获取数千种由常用癌症细胞系产生的敲除细胞裂解物。 有关敲除细胞裂解物的更多信息,请参阅此处。 Abcam没有也不打算申请客户使用含有欧洲授权清单(附件十四)物质的产品的REACH授权。 我们的客户有责任检查REACH授权和任何其他相关授权在其预期用途中应用的必要性。 本产品受The Broad Institute、ERS Genomics limited和Sigma-Aldrich Co.LLC的有限使用许可,并采用专利技术开发。 有关许可证和专利的详细信息,请参阅我们的 有限使用许可证 和 专利页 . -
经过测试的应用程序
属性
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储存说明 储存于-80°C。 请参阅协议。 -
组件 1套 ab277304-人BSG敲除A549细胞裂解物 1 x 100微克 ab277305-人类野生型A549细胞裂解物 1 x 100微克 -
研究领域 -
单元格类型 上皮的 -
疾病 癌 -
性别 男性
目标
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功能 在精子发生、胚胎植入、神经网络形成和肿瘤进展中发挥关键作用。 刺激邻近的成纤维细胞产生基质金属蛋白酶(MMPS)。 可能将单羧酸转运体SLC16A1、SLC16A3和SLC16A8靶向视网膜色素上皮和神经视网膜的质膜。 似乎是寡甘露糖苷聚糖的受体。 在体外,促进星形细胞突起的生长。 -
组织特异性 仅存在于大脑非肿瘤区域的血管内皮细胞中,而存在于肿瘤细胞中,但不存在于恶性胶质瘤的增殖血管中。 -
序列相似性 包含1个Ig样C2型(免疫球蛋白样)结构域。 包含1个Ig样V型(免疫球蛋白样)结构域。 -
翻译后 修改 N-糖基化。 -
手机定位 细胞膜。 褪黑激素组。 与SLC16A1和SLC16A8配色(根据相似性)。 通过质谱鉴定第一阶段至第四阶段的黑素体组分。 -
UniProt提供的信息 -
替代名称 5A11抗原 5楼7层 基本_胡曼
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应用
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图像
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车道1: 野生型A549细胞裂解物30 ug 车道2: BSG敲除A549细胞裂解物30 ug 3号车道: Raji细胞裂解物30 ug 车道4: Jurkat细胞裂解物30 ug 1-4车道: 合并信号(红色和绿色)。 绿色- ab666型 在55-70 kDa时观察到。 红色-加载控制 约52866 (兔抗α-管蛋白抗体[EP1332Y])在55kDa下观察到。 ab666型 western blot显示与野生型A549细胞中的CD147反应,在BSG敲除细胞系中观察到信号丢失 约273748 (敲除细胞裂解物ab275500)。 对野生型和BSG敲除A549细胞裂解物进行SDS-PAGE分析。 用荧光蛋白印迹(TBS)封闭溶液封闭膜,然后用 ab666型 和 约52866 (兔抗α-管蛋白抗体[EP1332Y])于4时过夜 ° C的浓度分别为1微克/毫升和1/2000的稀释度。 印迹与山羊抗鼠IgG H&L(IRDye)孵育 ® 800CW)预吸收床( 约216772 )和山羊抗兔IgG H&L(IRDye ® 680RD)预吸收床( ab216777号 )二级抗体在成像前在室温下以1:20000稀释1小时。 -
车道1: 野生型A549细胞裂解物30 ug 车道2: BSG敲除A549细胞裂解物30 ug 3号车道: Raji细胞裂解物30 ug 1-3车道: 合并信号(红色和绿色)。 绿色- 约108308 在42-70 kDa时观察到。 红色-加载控制 约7291 (在55kDa下观察到小鼠抗α-管蛋白[DM1A]。 约108308 western blot显示与野生型A549细胞中的CD147反应,在BSG敲除细胞系中观察到信号丢失 约273748 (敲除细胞裂解物ab275500)。 对野生型和BSG敲除A549细胞裂解物进行SDS-PAGE分析。 用荧光蛋白印迹(TBS)封闭溶液封闭膜,然后用 约108308 和 约7291 (小鼠抗α-管蛋白[DM1A]在4时过夜 ° C,稀释度分别为1000分之一和20000分之一。 印迹与山羊抗兔IgG H&L(IRDye)孵育 ® 800CW)预吸收床( ab216773号 )和山羊抗鼠IgG H&L(IRDye ® 680RD)预吸收床( 约216776 )二级抗体在成像前在室温下以1:20000稀释1小时。 -
车道1: 野生型A549细胞裂解物30 ug 车道2: BSG敲除A549细胞裂解物30 ug 3号车道: Raji细胞裂解物30 ug 车道4: Jurkat细胞裂解物30 ug 1-4车道: 合并信号(红色和绿色)。 绿色- ab119020号 在55-70 kDa时观察到。 红色-加载控制 约52866 (兔抗α-管蛋白抗体[EP1332Y])在55kDa下观察到。 ab119020号 在野生型A549细胞中显示与CD147反应,在BSG敲除细胞系中观察到信号丢失 约273748 (敲除细胞裂解物ab275500)。 对野生型和BSG敲除A549细胞裂解物进行SDS-PAGE分析。 用荧光蛋白印迹(TBS)封闭溶液封闭膜,然后用 ab119020号 和 约52866 (兔抗α-管蛋白抗体[EP1332Y])于4时过夜 ° C,稀释度分别为1:2000和1:20000。 印迹与山羊抗鼠IgG H&L(IRDye)孵育 ® 800CW)预吸收床( 约216772 )和山羊抗兔IgG H&L(IRDye ® 680RD)预吸收床( ab216777号 )二级抗体在成像前在室温下以1:20000稀释1小时。 -
车道1: 野生型A549细胞裂解物30 ug 车道2: BSG敲除A549细胞裂解物30 ug 3号车道: Raji细胞裂解物30 ug 车道4: Jurkat细胞裂解物30 ug 1-4车道: 合并信号(红色和绿色)。 绿色- ab230921型 在42-70 kDa时观察到。 红色-加载控制 约52866 (兔抗α-管蛋白抗体[EP1332Y])在55kDa下观察到。 ab230921型 western blot显示与野生型A549细胞中的CD147反应,在BSG敲除细胞系中观察到信号丢失 约273748 (敲除细胞裂解物ab275500)。 对野生型和BSG敲除A549细胞裂解物进行SDS-PAGE分析。 在与孵育之前,将膜封闭在荧光蛋白质印迹(基于TBS)封闭溶液中 ab230921型 和 约52866 (兔抗α-管蛋白抗体[EP1332Y])于4时过夜 ° C,稀释度分别为1/500和1/20000。 印迹与山羊抗鼠IgG H&L(IRDye)孵育 ® 800CW)预吸收床( 约216772 )和山羊抗兔IgG H&L(IRDye ® 680RD)预吸收床( ab216777号 )二级抗体在成像前在室温下以1:20000稀释1小时。 -
等位基因1:在第5外显子插入78 bp,引入过早的STOP密码子。
协议
数据表和文件
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SDS下载 -
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