概述
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产品名称 -
产品概述 Western blot数据表明,CRISPR基因编辑可能导致相关蛋白的截短。 请参阅数据图像。 -
亲代细胞系 希拉牌手表 -
有机体 人类 -
突变描述 CRISPR/Cas9实现的淘汰; X=11 bp缺失,5 bp缺失; 移架:99.5% -
通道编号 <20 -
淘汰验证 下一代测序(NGS) -
重组说明 为了用作白细胞对照,将冻干液重新悬浮在50µL LDS*样品缓冲液中,使最终浓度达到2 mg/ml。对于还原条件,我们建议最终浓度为0.1 M DTT。 *不建议将SDS样品缓冲液用于这些冻干溶血物。 -
笔记 裂解液制备: 我们的裂解产物是使用RIPA缓冲液制成的,我们在其中添加了蛋白酶抑制剂鸡尾酒和磷酸酶抑制剂鸡尾液(比例:300:100:10)。 这意味着感兴趣的蛋白质变性了。 如果您需要天然形式的蛋白质,请使用活细胞版本-找到 在这里 。请参阅我们的裂解协议,了解我们裂解产物的制备方法的更多详细信息。 用户存储说明: 冻干液可在4°C下储存。 复原后,在-20°C下短期保存或-80°C下长期保存。 获取数千种由常用癌症细胞系产生的敲除细胞裂解物。 有关敲除细胞裂解物的更多信息,请参阅此处。 Abcam没有也不打算申请客户使用含有欧洲授权清单(附件十四)物质的产品的REACH授权。 我们的客户有责任检查REACH授权和任何其他相关授权在其预期用途中应用的必要性。 本产品受The Broad Institute和ERS Genomics limited的有限使用许可,并采用专利技术开发。 有关有限使用许可证和相关专利的详细信息,请参阅我们的 有限使用许可证 和 专利页 . -
经过测试的应用程序
属性
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储存说明 储存于-80°C。 请参阅协议。 -
组件 1套 ab280487-人NFE2L2敲除HeLa细胞裂解物 1 x 100微克 ab269597-人类野生型HeLa细胞裂解物 1 x 100微克 -
研究领域 -
单元格类型 上皮的 -
疾病 腺癌 -
性别 女性
目标
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功能 与靶基因启动子区的抗氧化反应(ARE)元件结合的转录激活剂。 对氧化应激反应中基因的协调上调很重要。 可能通过介导β-珠蛋白基因座控制区超敏位点2的增强子活性参与β-珠蛋白簇基因的转录激活。 -
组织特异性 广泛表达。 在成人肌肉、肾脏、肺、肝脏和胎儿肌肉中表达最高。 -
序列相似性 属于bZIP家族。 CNC子系列。 包含1个bZIP域。 -
域 N端的酸性激活域和C端的DNA结合域。 -
翻译后 修改 氧化应激反应中PKC对Ser-40的磷酸化使NFE2L2与其细胞质抑制剂KEAP1分离,促进其转位到细胞核。 -
手机定位 细胞质>胞浆。 核心。 细胞质在无应力条件下,在亲电试剂的诱导下易位到细胞核。 -
UniProt提供的信息 -
替代名称 红系衍生2 HEBP1型 类似2
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应用
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图像
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Western blot假彩色图像:抗-Nrf2抗体[EP1808Y]-ChIP级染色,稀释1/500,以绿色显示; 小鼠抗GAPDH抗体[6C5]( 约8245 )以1/20000稀释度进行负荷控制染色,以红色显示。在Western blot中, 第62352页 显示为与Nrf2特异结合。 在野生型HeLa细胞裂解液中在85 kDa处观察到一条带,在NFE2L2 CRISPR-Cas9编辑的细胞系中未观察到该大小的信号 约262507 (CRISPR-Cas9编辑的细胞裂解物ab263934)。 在CRISPR-Cas9编辑的低于85kDa的裂解液通道中观察到的谱带可能代表Nrf2的截断形式。 这还没有进一步研究,基因产物的功能特性也没有确定。 为了生成该图像,分析了野生型和NFE2L2 CRISPR-Cas9编辑的HeLa细胞裂解物。 首先,样品在SDS-PAGE凝胶上运行,然后转移到硝化纤维素膜上。 TBS-0.1%吐温中3%牛奶中的膜被堵塞 ® 20(TBS-T),然后在4°C下与一级抗体孵育过夜。 在TBS-T中清洗四次斑点,在室温下与二级抗体孵育1小时,再次清洗四次,然后成像。 使用的二级抗体是山羊抗兔IgG H&L(IRDye ® 800CW)预吸收床( ab216773号 )和山羊抗鼠IgG H&L(IRDye ® 680RD)预吸收床( 约216776 )以1/2000稀释。 通道1:野生型HeLa对照MG132(0 uM,18 h)细胞裂解物。 通道2:野生型HeLa处理的MG132(2 uM,18 h)细胞裂解物。 通道3:NFE2L2敲除HeLa对照MG132(0 uM,18 h)细胞裂解物。 泳道4:NFE2L2敲除HeLa处理的MG132(2μM,18小时)细胞裂解物。 通道5:HCT 116细胞裂解物。 -
CRISPR/Cas9实现的淘汰; X=11 bp缺失,5 bp缺失; 移架:99.5%
协议
数据表和文件
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SDS下载 -
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