主要功能和细节
重组生产(无动物),实现高批次一致性和长期供应安全 兔VCAM1单克隆抗体[EPR5047] 适用于:WB、IP、IHC-P、Flow Cyt(Intra)、ICC/IF、间接ELISA 敲除已验证 反应:小鼠、大鼠、人类
相关共轭物和制剂
概述
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产品名称 -
描述 兔单克隆抗体 [EPR5047]至VCAM1 -
宿主 兔子 -
经测试应用 -
种属反应性 与反应: 小鼠、大鼠、人类 -
免疫原 合成肽。 此信息为Abcam和/或其供应商专有。 -
阳性对照 IHC-P:人脾脏和扁桃体组织; 小鼠脾组织。 WB:小鼠肾、脑、脾组织裂解物; 大鼠脑、脾、肾组织裂解物; 人胎肝组织裂解物; NIH/3T3、LADMAC、HuT-78、TNF-a处理的HUVEC和LPS处理的bEnd.3细胞裂解物; 野生型A549和HUVEC TNF-a处理的(10 ng/mL,16h)细胞裂解物 流动细胞周期(内部):K562细胞。 ICC/IF:HUVEC TNF-a处理(10 ng/mL,16h); K562细胞。 IP:人胎肝组织裂解物。
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常规说明
性能
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形式 液体 -
存放说明 在4°C下装运。 短期储存在+4°C下(1-2周)。 交付时,等分。 储存于-20°C。 在-20°C下稳定12个月。 -
存储溶液 pH值:7.2 防腐剂:0.01%叠氮化钠 成分:40%甘油、0.05%BSA、59%PBS -
正在加载浓度信息。。。 -
纯度 蛋白质A纯化 -
克隆 单克隆 -
克隆编号 EPR5047系列 -
同种型 免疫球蛋白G -
研究领域
相关产品
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替代版本 -
兼容的辅助设备 -
同位素控制 -
KO细胞系 -
KO细胞裂解物 -
阳性对照 -
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应用
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靶标
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功能 在细胞间识别中很重要。 似乎在白细胞-内皮细胞粘附中起作用。 与白细胞上的β-1整合素VLA4相互作用,介导粘附和信号转导。 VCAM1/VLA4相互作用可能在免疫反应和白细胞向炎症部位迁移中发挥病理生理作用。 -
组织特异性 在炎症血管内皮细胞以及正常组织和炎症组织中的巨噬细胞样细胞和树突状细胞类型上表达。 -
序列相似性 包含7个Ig样C2型(免疫球蛋白样)结构域。 -
结构域 VLA4依赖性细胞粘附需要第一个或第四个Ig-like C2型结构域。 -
翻译后修饰 唾液糖蛋白。 -
细胞定位 薄膜。 -
UniProt提供的信息 -
数据库链接 -
别名 CD106抗体 CD106抗原抗体 INCAM 100抗体
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图片
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用不同抗体浓度和抗原浓度的ab134047在250 ng/mL下进行ELISA。碱性磷酸酶结合的亲和纯山羊抗狂犬病IgG(H+L)(1/2500)用作二级抗体。 -
所有车道: 1/2000稀释度下的抗-VCAM1抗体[EPR5047](ab134047) 车道1: 野生型A549细胞裂解物 车道2: 野生型A549 TNF-a处理的(10 ng/mL,16h)细胞裂解物 3号车道: VCAM1敲除A549细胞裂解物 车道4: VCAM1敲除物A549 TNF-a处理的(10 ng/mL,16h)细胞裂解物 车道5: HUVEC细胞裂解物 车道6: HUVEC TNF-a处理的(16 ng/mL,16h)细胞裂解物 每车道30µg的裂解液/蛋白质。 在还原条件下进行。 预测的带宽大小: 81千Da 观察到的频带大小: 105千帕 为什么实际的频带大小与预测的不同? 1-6车道: 合并信号(红色和绿色)。 绿色-在105 kDa下观察到ab134047。 红色-加载控制 约7291 (小鼠抗α-管蛋白[DM1A])在55 kDa时观察到。 Western blot显示ab134047在处理的野生型A549细胞中与VCAM1反应,在处理的VCAM1敲除细胞系中观察到信号丢失 约273758 (敲除细胞裂解物 约275504 ). 对野生型A549和VCAM1敲除细胞裂解物进行SDS-PAGE。 TBS-T(0.1%吐温)中3%牛奶中的膜被堵塞 ® )在与ab134047和 约7291 (小鼠抗α-管蛋白[DM1A])在4°C下过夜,稀释率分别为1:2000和1:20000。 将印迹物与HRP结合的山羊抗兔(H+L)和山羊抗小鼠IgG H&L(IRDye)孵育 ® 680RD)预吸收床( 约216776 )二级抗体在成像前在室温下以1:20000稀释1小时。 -
经TNF-α处理的HUVEC细胞中VCAM1的ab134047染色( 约55237 )10 ng/ml,持续16小时。 用4%多聚甲醛固定细胞(10分钟),然后用0.1%Triton X-100渗透5分钟,然后用1%BSA/10%正常山羊血清/0.3M甘氨酸在0.1%PBS-Tween中封闭1小时。 然后用2μg/ml浓度的ab134047培养细胞,并 约7291 (鼠抗α-管蛋白单克隆抗体)在4°C下以1/1000稀释过夜,然后在室温下用山羊抗兔IgG二级抗体(Alexa Fluor ® 488) ( 约150081 )以2μg/ml(绿色显示)和山羊对小鼠IgG的二级抗体(Alexa Fluor ® 647) ( ab150119号 )浓度为2μg/ml(以红色显示)。 核DNA用DAPI标记为蓝色。 使用共焦显微镜(Leica-Microsystems TCS SP8)拍摄图像。 -
所有车道: 1/1000稀释的抗-VCAM1抗体[EPR5047](ab134047) 车道1: 人脐静脉内皮细胞(HUVEC)全细胞裂解物 车道2: 用10 ng/ml TNF-a处理人脐静脉内皮细胞(HUVEC)16 h,全细胞裂解物 3号车道: b末端3(小鼠脑内皮瘤)全细胞裂解物 车道4: b结束3(小鼠脑内皮瘤)用10µg/ml LPS全细胞裂解物治疗24小时 每车道20µg的裂解液/蛋白质。 次要 所有车道: 山羊抗狂犬病IgG H&L(HRP)( ab97051型 )稀释1/20000 预测的带宽大小: 81千Da 观察到的频带大小: 100千Da 为什么实际的频带大小与预测的不同? 其他波段位于: 36千Da。 我们不确定这些额外波段的身份。 暴露时间: 2秒 GAPDH的兔单克隆抗体[EPR16891]( 约181602 )用作加载控制。 阻塞/稀释缓冲液: 5%NFDM/TBST。 由于某些样本中内源性表达水平较低,可能需要刺激才能检测到目标蛋白。 -
所有车道: 稀释1/1000的抗-VCAM1抗体[EPR5047](ab134047) 车道1: Hut-78(人类Sezary综合征皮肤T淋巴细胞)全细胞裂解物 车道2: SK-OV-3(人卵巢癌上皮细胞)全细胞裂解物 3号车道: RAW 264.7(小鼠Abelson小鼠白血病病毒诱导的肿瘤巨噬细胞)全细胞裂解物 车道4: J774A.1(小鼠网状细胞肉瘤-单核-巨噬细胞)全细胞裂解物 车道5: LADMAC(小鼠骨髓单核-巨噬细胞)全细胞裂解物 每车道20µg的裂解液/蛋白质。 次要 所有车道: 山羊抗狂犬病IgG H&L(HRP)( ab97051型 )稀释1/20000 预测的带宽大小: 81千Da 观察到的频带大小: 100千Da 为什么实际的频带大小与预测的不同? 其他波段位于: 36千Da。 我们不确定这些额外波段的身份。 暴露时间: 7秒 GAPDH的兔单克隆抗体[EPR16891]( 约181602 )用作加载控制。 阻塞/稀释缓冲液:5%NFDM/TBST。 -
用稀释1/500的纯化ab134047对石蜡包埋的人扁桃体进行免疫组织化学染色。 使用兔/鼠IgG的预稀释HRP聚合物作为二级抗体,并用苏木精对样品进行反染色。 使用pH 9.0的Tris-EDTA缓冲液进行抗原检索。 使用PBS代替一级抗体作为阴性对照,如插图所示。 -
使用稀释1/250的纯化ab134047对K562细胞(固定在4%PFA中,用0.1%Triton X 100渗透)进行免疫荧光染色。 一种Alexa Fluor ® 488羊抗兔抗体作为次级抗体,稀释1/500,用DAPI对细胞进行反染。 负极控制显示在右下面板中-对于负极控制,Alex Fluor ® 594只山羊抗鼠药以1/500的稀释度使用。 -
用纯化的ab134047在1/40稀释度(10ug/mL)(红色)下标记VCAM1的K562(人类慢性粒细胞白血病)细胞的细胞内流式细胞术分析。 细胞用4%多聚甲醛固定,用90%甲醇渗透。 山羊抗兔IgG(Alexa Fluor ® 488)以1/2000稀释度作为二级抗体。 使用兔单克隆IgG(黑色)作为同型对照,使用未与一级抗体和二级抗体孵育的细胞(蓝色)作为未标记对照。 -
所有车道: 1/10000稀释(纯化)的抗-VCAM1抗体[EPR5047](ab134047) 车道1: 小鼠肾脏 车道2: 大鼠脾脏 每车道20µg的裂解液/蛋白质。 次要 所有车道: HRP山羊抗兔(H+L),稀释度为1/1000 预测的带宽大小: 81千Da 观察到的频带大小: 100千Da 为什么实际的频带大小与预测的不同? 阻塞缓冲区:5%NFDM/TBST 稀释缓冲液:5%NFDM/TBST -
VCAM1是用ab134047在1/110稀释度下从人胎肝裂解液中免疫沉淀的。 用抗体134047在1/1000稀释度下对免疫沉淀物进行蛋白质印迹。 IP二级抗体(过氧化物酶偶联)的VeriBlot用作1/1000稀释度的二级抗体。 车道1: 人胎肝裂解物。 阻塞和稀释缓冲液: 5%NFDM/TBST。 暴露时间: 1秒钟。 -
人脾福尔马林固定石蜡包埋组织切片中VCAM1染色的IHC图像,使用标准方案F在Leica Bond系统上进行。该切片使用柠檬酸钠缓冲液(pH6,表位检索溶液1)热介导抗原检索预处理20分钟。 然后在室温下将切片与未纯化的ab134047(1/200稀释)孵育15分钟,并使用HRP共轭紧凑聚合物系统进行检测。 DAB被用作显色剂。 然后用苏木精对切片进行复染,并用DPX固定。 对于其他IHC染色系统(自动化和非自动化),客户应优化可变参数,如抗原回收条件、初级抗体浓度和抗体孵育时间。 -
1/2000稀释(纯化)的抗-VCAM1抗体[EPR5047](ab134047)+20µg的大鼠肾组织裂解物 次要 HRP山羊抗兔(H+L),稀释度为1/1000 预测的带宽大小: 81千Da 观察到的频带大小: 100千Da 为什么实际的频带大小与预测的不同? 阻塞缓冲区: 5%NFDM/TBST。 稀释缓冲液: 5%NFDM/TBST。 -
1/10000稀释(纯化)的抗-VCAM1抗体[EPR5047](ab134047)+10µg的NIH/3T3细胞裂解液 次要 HRP山羊抗兔(H+L),稀释度为1/1000 预测的带宽大小: 81千Da 观察到的频带大小: 100千Da 为什么实际的频带大小与预测的不同? 阻塞缓冲区: 5%NFDM/TBST。 稀释缓冲液: 5%NFDM/TBST。 -
1/10000稀释(纯化)的抗-VCAM1抗体[EPR5047](ab134047)+20µg的人胎肝组织裂解物 次要 HRP山羊抗兔(H+L),稀释度为1/1000 预测的带宽大小: 81千Da 观察到的频带大小: 100千Da 为什么实际的频带大小与预测的不同? 阻塞缓冲区: 5%NFDM/TBST。 稀释缓冲液: 5%NFDM/TBST。 -
1/10000稀释(纯化)的抗-VCAM1抗体[EPR5047](ab134047)+10µg的HuT-78细胞裂解液 次要 HRP山羊抗兔(H+L),稀释度为1/1000 预测的带宽大小: 81千Da 观察到的频带大小: 100千Da 为什么实际的频带大小与预测的不同? 阻塞缓冲区: 5%NFDM/TBST。 稀释缓冲液: 5%NFDM/TBST。 -
小鼠脾脏福尔马林固定石蜡包埋组织切片中VCAM1染色的IHC图像,使用标准方案B在Leica Bond™系统上进行。该切片使用柠檬酸钠缓冲液(pH6,表位检索溶液1)进行热介导抗原检索预处理20分钟。 然后在室温下用未纯化的ab134047,1/200稀释液培养切片15分钟。 用山羊抗兔生物素化二级抗体检测初级抗体,并用HRP偶联ABC系统进行可视化。 DAB被用作显色剂。 然后用苏木精对切片进行复染,并用DPX固定。 对于其他IHC染色系统(自动化和非自动化),客户应优化可变参数,如抗原回收条件、初级抗体浓度和抗体孵育时间。 -
所有车道: 1/1000稀释(未净化)时的抗-VCAM1抗体[EPR5047](ab134047) 车道1: 人胎肝组织裂解物 车道2: HuT 78细胞裂解物 3号车道: NIH/3T3细胞裂解物 车道4: 小鼠脑组织裂解物 车道5: 小鼠肾组织裂解物 车道6: 小鼠脾组织裂解物 7号车道: 大鼠脑组织裂解物 车道8: 大鼠肾组织裂解物 9号车道: 大鼠脾组织裂解物 每条泳道10µg的裂解物/蛋白质。 次要 所有车道: 山羊抗狂犬病IgG H&L(HRP)( ab6721型 )稀释1/2000 预测的带宽大小: 81千Da
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文献 (258)
乔·T 等。 在人源化小鼠模型中,pembrolizumab和贝伐单抗联合治疗可有效抑制非小细胞肺癌的生长,并防止术后复发和转移。 癌症免疫疗法 72:1169-1181 (2023). 公共医学:36357599 巴甘哈F 等。 磷酸胆碱单克隆抗体治疗减少小鼠静脉移植物斑块内血管生成和斑块内出血。 国际分子科学杂志 23:不适用(2022年)。 公共医学:36362449 吴杰 等。 骨肉瘤血管生成亚群的血管状态和免疫浸润以及预测模型的构建。 前部免疫 13:992266 (2022). 公共医学:36405691 阿克曼JE 等。 定义纤维化肌腱愈合的空间分子图以及巩膜系细胞命运和功能的驱动因素。 单元格代表 41:111706 (2022). 公共医学:36417854 Mastrogiacomo L和Werstack GH 研究内皮糖原合酶激酶3α/β在低密度脂蛋白受体敲除小鼠动脉粥样硬化发生中的作用。 国际分子科学杂志 23:不适用(2022年)。 公共医学:36499109