OXPHOS啮齿动物WB总数 抗体 鸡尾酒(ab110413)
主要功能和细节
检测类型:半定量
(美国)
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产品名称 OXPHOS啮齿动物WB总数 抗体 鸡尾酒会 -
检测类型 半定量 -
种属反应性 与反应: 小鼠、大鼠、奶牛、人类、食蟹猴 -
产品概述 总OXPHOS啮齿动物WB抗体鸡尾酒ab110413是一种优质抗体的优化鸡尾酒,用于通过western blot分析大鼠或小鼠线粒体中OXPHOS复合物的相对水平。
这种OXPHOS鸡尾酒含有5个小鼠单克隆抗体,每个单克隆抗体针对CI亚单位NDUFB8( ab110242号 ),CII-30kDa( 公元14714年 ),CIII-核心蛋白2( 约14745 ),CIV亚单位I( 约14705 )和CVα亚基( 约14748 )作为一种优化的预混合鸡尾酒。 该试剂盒适用于小鼠、大鼠、人或牛来源的线粒体制剂中5种OXPHOS复合物的相对水平的Western印迹分析。 鸡尾酒提供的阳性对照是 约110341 .
组装水平的改变可能由单个亚单位的突变、复合物组装因子的突变、线粒体DNA缺失或生理和或病理变化(例如激素治疗、运动、饮食或氧化应激)引起。
之所以选择鸡尾酒中的单克隆抗体,是因为它们各自针对的是一个亚基,当其复合物未组装时,该亚基是不稳定的。 此外,不同的亚单位很容易在SDS-PAGE中解析(见协议)。
注:小鼠组织样本很容易被动物血液中的抗体污染。 为了避免出现背景带,使用ab110413和抗鼠次级抗体。 此外,COXI是一种高度疏水的蛋白质,在约35 kDa处出现宽带(并非在其真实分子量为57 kDa时)。 它对加热非常敏感。 因此,样品(包括阳性对照)在装入凝胶之前不应加热超过50°C。
Western blot鸡尾酒的浓度为1.5 mg/mL。
当使用这种抗体进行Western blot时,我们建议使用高pH值CAPS/PVDF转移协议。
将抗体鸡尾酒存放在4°C,将对照样品存放在-80°C。 -
说明 -
经测试应用
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阳性对照 -
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美国
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图片
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用ab110413(MS604)标记大鼠肝线粒体。 通道1中的样品保持在室温下,而其余三个样品分别加热到37°C、50°C和100°C。 该斑点显示,由于蛋白质聚集,样品煮沸导致信号降低,因此不建议在煮沸或接近煮沸时加热样品。 -
从小鼠大脑(对照组和阿尔茨海默病(AD))分离的线粒体,在5%BSA中以1/1000稀释度标记ab110413。 此图像显示了复合物I的NADH脱氢酶β亚复合物亚单位8(NDUFB8)、复合物II的琥珀酸脱氢酶亚单位B(SDHB)、复合体IV的细胞色素c氧化酶亚单位1(MTCO1)、复合体内的细胞色素B-c1复合物亚基2(UQCRC2)和复合物V的ATP合酶亚单位α(ATP5A)。 -
从人类(5µg-通道1)、奶牛(1 ug-通道2)、大鼠(10µg-通道3)、小鼠(10µ-通道4)心脏分离的线粒体,标记CI亚基NDUFB8 ab110242号 0.5 ug/ml 小鼠样品(第4道)中的额外条带是由于IgG特异性山羊抗鼠二级抗体与心脏组织中残留的小鼠血液发生反应,因为很难完全清除这些小器官中的血液。 -
从人(5µg-车道1)、牛(1 ug-车道2)、大鼠(10µg-车道3)、小鼠(10µ的g-车道4)、HepG2(人肝细胞癌细胞系)全细胞裂解液(20µg–车道5)的心脏分离的线粒体,标记CII-30kDa 公元14714年 第二抗体是一种山羊抗鼠抗体。 小鼠样品(第4道)中的额外条带是由于IgG特异性山羊抗鼠二级抗体与心脏组织中残留的小鼠血液发生反应,因为很难完全清除这些小器官中的血液。 -
人类骨骼肌组织裂解物(10µg-车道1)和Ramos(人类Burkitt淋巴瘤细胞系)全细胞裂解物(10-车道2)标记CIII-Core蛋白2 约14745 在5µg/mL时,二级抗体是山羊对小鼠IgG-H&L-Pre-Adsorbed(HRP)的多克隆抗体,稀释度为1/3000。 -
从人(5µg-通道1)、牛(1 ug-通道2)、大鼠(10µg-通道3)、小鼠(5µ-通道4)心脏分离的线粒体,用 约14705 0.5µg/mL。二级抗体为山羊抗鼠抗体。 小鼠样品(第4道)中的额外条带是由于IgG特异性山羊抗鼠二级抗体与心脏组织中残留的小鼠血液发生反应,因为很难完全清除这些小器官中的血液。 -
从人类心脏(10µg-车道1)、牛心脏(4µg-2)、大鼠心脏(10μg-车道3)、小鼠心脏(10¦Μg-道路4)、HepG2(人肝细胞癌细胞系)全细胞裂解液(20µg-车道5)中分离的线粒体,用 约14748 浓度为1µg/mL -
人肝组织裂解物(10µg-Lane 1)和HepG2(人肝细胞癌细胞系)全细胞裂解物 约14748 在1µg/mL的条件下,二级抗体是山羊对小鼠IgG-H&L-Pre-Adsorbed(HRP)的多克隆抗体,稀释度为1/3000。
实验方案
数据表及文件
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SDS下载 -
数据表下载
文 (1024)
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