TMB酶联免疫吸附试验 底物 (最慢动力学速率)(ab171527)
概述
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产品名称 -
经测试应用 -
常规说明 Abcam的TMB ELISA底物(最慢动力学速率)在弱酸性缓冲液中含有3,3',5,5'-四甲基联苯胺。 基质是作为一种即用即用的溶液提供的。 未反应基质的外观应为无色或极淡黄色。 当该底物系统与过氧化物酶反应时,可获得可溶的蓝色反应产物。 可使用适当的停止溶液(见下文)停止反应,根据所用的停止试剂,生成可溶黄色或可溶蓝色反应产物,该产物至少稳定1小时。 ab171527不推荐用于需要沉淀反应产物的膜或免疫组织化学应用。 产品用途: 1.使用前,让基板平衡至室温(25°C)。 在这个过程中,一定要防止光线照射。 2.在完成最终抗体培养和清洗步骤后,轻敲ELISA板以去除多余液体,并添加100µL TMB底物。 底物的用量应根据您的化验要求进行调整。 3.可溶的蓝色将缓慢发展,并且可以在650纳米处读取。 4.显色时间可能在10-40分钟之间,具体取决于分析结果,也取决于用于停止反应的方法(见下文)。 建议根据您的特定分析条件优化显影时间,但不建议底物颜色显影时间小于10分钟,以确保结果的一致性。 5.在终点测定中,可以使用等体积的1N HCl、0.6N硫酸或TMB底物的停止溶液之一来停止底物反应。 (外径建议见6a和6b) 6.停止解决方案已根据所需端点进行优化。 a) 450 nm停止解决方案是 约171529 它们产生可溶性黄色产物。 由于停止反应会使样品吸光度值增加约2.5倍,因此650 nm处的最大外径应为1.2至1.3。 b) 650 nm停止解决方案是 约171531 保持可溶性蓝色。 停止使用这些试剂,可以在650 nm处生成高达3.0的外径值,高于该值时,吸光度值不再与浓度呈线性关系。 对于需要较大动态范围而不牺牲检测限的分析,建议使用650 nm停止试剂。 7.如果反应颜色太浓,建议稀释抗体或结合物。 不建议稀释TMB基板。 储存说明: 由于TMB分子的光敏特性,应避免直接暴露在阳光和其他紫外线源下。
性能
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形式 液体 -
存放说明 储存于+4°C。 请参阅注释部分。 -
存储溶液 pH值:1.00 成分:0.05%3,3',5,5'-四甲基联苯胺,79%水,0.1%过氧化氢 -
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应用
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实验方案
数据表及文件
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