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产品代码:76424批号:GR81000-1查询:1) 抗体储存条件(温度/重组等):抗体储存在-20℃2) 问题描述(高背景、错误的频带大小、更多频带、无频带等):无频带检测3) 样品(物种/细胞提取物/核提取物/纯化蛋白/重组蛋白等):全细胞裂解液ZL55 e ZL34细胞系4) 样品制备(缓冲液/蛋白酶抑制剂/加热样品等):RIPA缓冲液加蛋白酶和磷酸酶抑制剂5) 蛋白质负载量:25和50 ug6) 电泳/凝胶条件(还原或非还原凝胶,凝胶%等):变性SDS-PAGE(12%)7) 转移和阻断条件(缓冲液/时间段、阻断剂等):半干法转移阻断:5%的牛奶用TBS+吐温配制(0.01%)8) 初级抗体(制造商/物种/稀释剂/稀释液/培养时间,洗涤步骤):一抗:抗生存素一抗(Abcam cat n°ab76424)。在封闭缓冲液中稀释1/2000和1/1000培养时间:4°C过夜清洗步骤:TBS+吐温10分钟(三次)9) 二级抗体(制造商/品种/稀释剂/稀释/培养时间,清洗步骤):二级抗体:阻断缓冲液中抗兔穿孔稀释1/2000培养时间:室温下1小时清洗步骤:TBS+吐温10分钟(三次)10) 检测方法(ECL、ECLPlus等):超信号West femto化学发光底物(Thermo Scientific)。11) 使用的阳性和阴性对照物(请注明):HeLa细胞的全裂解物 12) 你吃过几次西餐三次 13) 您是否运行了无主控件不 客户没有图像,因为根本没有信号。
Abcam社区
已验证客户
2012年10月16日被问及
感谢您花时间填写我们的问卷并与我们联系。很遗憾听到客户很难从这种抗体中获得满意的结果。 您所提供的详细信息将为我们监控产品质量提供重要信息。我想再次向您保证,这种抗体已经过测试,并且在我们对WB和人体样本的保证范围内。 我很感激你在实验室里度过的时间,并理解你的担忧。令人遗憾的是,结果没有取得成功。回顾这些细节,我很抱歉在这个场合没有什么技巧可以帮助改进结果。我可以建议你可能很遗憾地收到了一个坏瓶子。 我建议您考虑尝试以下选项: 1.您能否确认是否已使用加载控制对转移到膜上的样品和样品质量进行了评估? 2.当前的二级抗体小瓶与其他兔抗体是否有效? 3.我可以建议尝试使用BSA而不是牛奶来阻止。改变阻断剂有时有助于改善效果。 或者,如果这些提示不起作用,我很高兴为您提供免费更换或信用票据作为补偿。 谢谢合作。我期待着收到您的详细信息,了解您希望如何继续。
回复于 2012年10月16日