主要功能和细节
重组生产(无动物),实现高批次一致性和长期供应安全 兔单克隆抗体[E104]至SIRT1 适用于:ICC/IF、Flow Cyt(Intra)、WB、IP、IHC-P 反应对象:人类
相关共轭物和制剂
概述
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产品名称 -
描述 兔单克隆抗体 [E104]至SIRT1 -
宿主 兔子 -
特异性 这种抗体不会与其他sirtuin家族成员发生交叉反应。 目标蛋白的表达水平因样本类型而异,可能需要进行一些优化。 对于蛋白质印迹,使用组织样品时可能需要更高浓度的裂解物。 -
经测试应用 -
种属反应性 与反应: 人类 -
免疫原 人SIRT1 aa 700-800(C末端)内的合成肽。 确切的顺序是专有的。 -
阳性对照 WB:HeLa、Jurkat、HEK293、SW480、MDA-MB-231和A549细胞裂解物。 IHC-P:人结肠癌和人肺鳞癌组织。 流程:HeLa细胞。 IP:Jurkat全细胞裂解物( ab7899年 ).
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常规说明
性能
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形式 液体 -
存放说明 在4°C下装运。 交付后,将等分样品储存在-20°C下。 避免冷冻/解冻循环。 -
存储溶液 pH值:7.20 防腐剂:0.01%叠氮化钠 成分:59%PBS,40%甘油,0.05%BSA -
正在加载浓度信息。。。 -
纯度 蛋白质A纯化 -
克隆 单克隆 -
克隆编号 E104型 -
同种型 免疫球蛋白G -
研究领域
相关产品
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替代版本 -
检测试剂盒 -
兼容的辅助设备 -
同位素控制 -
阳性对照 -
重组蛋白
应用
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靶标
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功能 NAD依赖性蛋白脱乙酰酶,将转录调控直接与细胞内能量学联系起来,并参与多种分离细胞功能的协调,如细胞周期、对DNA损伤的反应、代谢、凋亡和自噬。 可以通过组蛋白的去乙酰化调节染色质功能,并可以促进组蛋白和DNA甲基化的改变,导致转录抑制。 脱乙酰化广泛的转录因子和协同调节因子,从而对目标基因的表达进行正调控和负调控。 作为NAD(+)/NADH细胞溶质比率的传感器,该比率因葡萄糖缺乏和与热量限制相关的代谢变化而改变。 对骨骼肌细胞分化至关重要,对低营养素的反应介导对骨骼肌成肌细胞分化的抑制作用,这也涉及5'-AMP活化蛋白激酶(AMPK)和烟酰胺磷酸核糖转移酶(NAMPT)。 eNoSC(能量依赖性核仁沉默)复合物的成分,该复合物可调节rDNA沉默以响应细胞内能量状态,并通过招募组蛋白修饰酶发挥作用。 eNoSC复合物能够感知细胞的能量状态:在葡萄糖饥饿时,NAD(+)/NADP(+)比率的升高激活SIRT1,导致组蛋白H3脱乙酰化,然后通过SUV39H1将H3在“Lys-9”(H3K9me2)二甲基化,并在rDNA基因座中形成沉默的染色质。 将SUV39H1的“Lys-266”去乙酰化,导致其活化。 通过脱乙酰PCAF和MYOD1抑制骨骼肌分化。 HIST1H1E的去乙酰化H2A和'Lys-26'。 组蛋白H4的去乙酰化酶“Lys-16”(体外)。 通过染色质重塑参与NR0B2/SHP共表达功能:通过NR0B2/SHP招募到LRH1靶基因启动子,从而刺激组蛋白H3和H4脱乙酰化,导致转录抑制。 建议通过积极调节端粒长度来促进基因组完整性; 然而,关于着丝粒周围异染色质定位的报道相互矛盾。 建议通过调节核SUV39H1的可用池,在组成异染色质(CH)的形成和/或维护中发挥作用。 氧化/代谢应激通过MDM2抑制SUV39H1多泛素化来减少SUV39H2降解。 SUV39H1水平的增加增加了CH中SUV39H2的周转,这反过来似乎加快了异染色质的更新,异染色素在应激反应期间与更大的基因组完整性相关。 去乙酰化p53/TP53的“Lys-382”并损害其诱导转录依赖性促凋亡程序和调节细胞衰老的能力。 脱乙酰化TAF1B,从而通过RNA聚合酶I抑制rDNA转录。脱乙酰化MYC,促进MYC与MAX的结合,降低MYC稳定性,导致转化能力受损。 去乙酰化FOXO3以应对氧化应激,从而提高其诱导细胞周期阻滞和抗氧化应激抵抗的能力,但抑制FOXO3-介导的凋亡转录活性诱导; 也导致FOXO3泛素化和蛋白质体降解。 在转录活性和细胞凋亡的调节中,似乎对MLLT7/FOXO4具有类似的作用。 去乙酰化物DNMT1; 从而损害DNMT1甲基转移酶诱导的依赖性转录抑制因子活性,调节DNMT1细胞周期调节功能和DNMT1介导的基因沉默。 脱乙酰化酶RELA/NF-kappa-B p65从而抑制其反式激活潜能并增强对TNF-α的反应中的凋亡。 脱乙酰HIF1A、KAT5/TIP60、RB1和HIC1。 去乙酰化FOXO1导致其核保留并增强其转录活性,从而增加肝脏中的糖异生。 抑制E2F1转录活性和凋亡功能,可能通过去乙酰化。 参与HES1和HEY2介导的转录抑制。 与MYCN合作似乎参与了DUSP6/MAPK3的转录抑制,从而通过“Ser-62”磷酸化使MYCNs稳定。 脱乙酰MEF2D。 对可能与组蛋白H3的局部脱乙酰化有关的AR依赖基因的拮抗剂介导的转录抑制所必需。 抑制HNF1A介导的转录。 CREBZF用于抑制ESRRG。 调节AP-1转录因子活性。 脱乙酰化物NR1H3和NR1H2以及‘Lys-434’处NR1H3脱乙酰化正调控NR1H3:RXR靶基因的转录,促进NR1H4蛋白体降解,导致胆固醇外流; 提出了reach轮转录后启动子清除机制。 参与脂质代谢。 通过抑制PPARG(可能与NCOR1和SMRT/NCOR2相关)调节白色脂肪细胞的脂肪生成和脂肪动员。 去乙酰化ACSS2导致其活化,以及HMGCS1。 参与肝脏和肌肉代谢。 通过去乙酰化和激活PPARGC1A,在低血糖条件下激活骨骼肌中的脂肪酸氧化,并参与葡萄糖稳态。 参与肝脏PPARA和脂肪酸β氧化的调节。 参与葡萄糖对胰岛β细胞胰岛素分泌的正向调节; 该功能似乎暗示了UCP2的转录抑制。 建议去乙酰化IRS2,从而促进其胰岛素诱导的酪氨酸磷酸化。 去乙酰化SREBF1亚型SREBP-1C,从而降低其在脂肪生成基因表达中的稳定性和反式激活。 通过抑制参与DNA修复的基因(如XPC和TP73)参与DNA损伤反应,脱乙酰化XRCC6/Ku70,促进补充额外因子到受损DNA位点,如SIRT1-脱乙酰化NBN可以招募ATM来启动DNA修复,SIRT1-去乙酰化XPA与RPA2相互作用。 还通过同源重组和特异性单链退火(独立于XRCC6/Ku70和NBN)参与DNA双链断裂的DNA修复。XPC的转录抑制可能涉及E2F4:RBL2抑制复合物和蛋白激酶B(AKT)信号。 TP73的转录抑制可能涉及E2F4和PCAF。 脱乙酰化WRN,从而调节其解旋酶和核酸外切酶活性,并调节WRN核转位以应对DNA损伤。 在“Lys-6”和“Lys-7”处脱乙酰APEX1,并通过促进APEX1与XRCC1的结合刺激细胞AP内切酶活性。 通过阻断细胞质p53/TP53的核转位并可能将其重定向至线粒体,增加p53/TP33介导的转录依赖性凋亡。在“Lys-539”和“Lys-542”处脱乙酰化XRCC6/Ku70,使其将BAX与线粒体隔离,从而抑制应激诱导的凋亡。 可能通过去乙酰化ATG5、ATG7和MAP1LC3B/ATG8参与自噬。 去乙酰化AKT1,导致AKT1和PDK1与PIP3的结合增强,并促进其活化。 建议在调节与细胞衰老相关的STK11/LBK1依赖性AMPK信号通路中发挥作用,这似乎涉及调节STK11/LBK1的乙酰化状态。 能去乙酰化STK11/LBK1,从而增加其活性、细胞质定位和与STRAD的结合; 然而,这种活性在正常细胞中的相关性尚不清楚。 内皮细胞中显示出抑制STK11/LBK1活性并促进其降解。 在“Lys-64”和“Lys-70”处对SMAD7进行去乙酰化,从而促进其降解。 去乙酰化CIITA并增强其MHC II类转录激活,并有助于其稳定性。 终止MECOM/EVI1。 在“Lys-487”处脱乙酰化PML,这种脱乙酰化促进PML对PER2核定位的控制。 在神经原性转换期间,通过抑制选择性NOTCH1靶基因 异构体2:异构体2显示为p53/TP53的去乙酰化'Lys-382',但活性低于异构体1。 结合起来,这两种亚型发挥相加作用。 异构体2调节p53/TP53的表达和细胞应激反应,并被p53/TP3抑制,呈现SIRT1异构体依赖的自身调节环。 (微生物感染)如果HIV-1感染,与病毒Tat蛋白相互作用并使其脱乙酰。 病毒Tat蛋白抑制SIRT1对RELA/NF-kappa-B p65的去乙酰化活性,从而增强其转录活性,SIRT1被认为有助于感染期间T细胞的过度激活。 SirtT1 75kDa片段:催化失活的75SirT1可能参与细胞凋亡的调控。 可能通过与细胞色素C结合和干扰凋亡小体组装,参与保护软骨细胞免受凋亡死亡。 -
组织特异性 广泛表达。 -
序列相似性 属于sirtuin家族。 I类亚科。 包含1个去乙酰化酶sirtuin型结构域。 -
翻译后修饰 多个赖氨酸残基甲基化; DNA损伤后甲基化增强,对p53/TP53的脱乙酰酶活性来说是必不可少的。 磷酸化。 STK4/MST1磷酸化,导致SIRT1介导的p53/TP53脱乙酰化受到抑制。 丝氨酸-27、丝氨酸-47和丝氨酸-530的MAPK8/JNK1磷酸化导致核定位和酶活性增加。 DYRK1A和DYRK3在Thr-530处的磷酸化激活脱乙酰酶活性并促进细胞存活。 雷帕霉素复合物1(mTORC1)在Ser-47的哺乳动物靶点磷酸化抑制脱乙酰活性。 被CaMK2磷酸化,导致p53/TP53和NF-kappa-B p65/RELA脱乙酰活性增加(通过相似性)。 涉及MAPK9的Ser-27磷酸化与蛋白质稳定性有关。 一些磷酸化位点存在一些模糊性:Ser-159/Ser-162和Thr-544/Ser-545。 经TNF-α处理后,组织蛋白酶B进行蛋白质水解,生成催化活性但稳定的SirtT1 75kDa片段(75SirT1)。 GAPDH对S-亚硝基化,导致抑制NAD依赖性蛋白脱乙酰酶活性。 -
细胞定位 细胞质。 线粒体和细胞核,PML体。 细胞质。 核心。 通过与PML的互动招募到核机构(PubMed:12006491)。 在细胞核中用APEX1染色(PubMed:19934257)。 可在核仁、核常染色质、异染色质和内膜中发现(PubMed:15469825)。 细胞核和细胞质之间的穿梭(根据相似性)。 利用XBP1亚型2在细胞核中进行结肠酸化(PubMed:20955178)。 -
UniProt提供的信息 -
数据库链接 -
别名 75SirT1抗体 hSIR2抗体 hSIRT1抗体
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图片
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所有车道: 稀释1/1000的抗SIRT1抗体[E104](ab32441) 车道1: 野生型HEK-293细胞裂解物 车道2: SIRT1 CRISPR/Cas9编辑的HEK-293细胞裂解物 3号车道: MDA-MB-231细胞裂解物 车道4: HeLa细胞裂解物 每车道20µg的裂解液/蛋白质。 在还原条件下进行。 预测的带宽大小: 82千帕 观察到的频带大小: 110千帕 为什么实际的频带大小与预测的不同? 车道1-4: 合并信号(红色和绿色)。 绿色-在110 kDa下观察到ab32441。 红色-装载控制, 约8245 (小鼠抗GAPDH抗体[6C5])。 在western blot中,ab32441与SIRT1反应。 在110kDa以下的CRISPR/Cas9编辑的裂解物通道中观察到的条带可能代表截断形式和裂解碎片。 尚未对此进行进一步调查。 TBS-T(0.1%吐温)中3%牛奶中的膜被堵塞 ® )在与ab32441和 约8245 (小鼠抗GAPDH抗体[6C5])分别以1/1000和1/20000稀释度在4°C下过夜。 印迹与山羊抗兔IgG H&L(IRDye)孵育 ® 800CW)预吸收床( ab216773号 )和山羊抗鼠IgG H&L(IRDye ® 680RD)预吸收床( 约216776 )二级抗体在成像前在室温下以1/20000稀释1小时。 -
Leica BOND上福尔马林固定石蜡包埋正常人结肠切片SIRT1染色的IHC图像 TM公司 系统使用标准方案F。使用柠檬酸钠缓冲液(pH6,表位检索溶液1)热介导抗原检索对切片进行20分钟的预处理。 然后在室温下用ab32441,1/250稀释液培养该切片15分钟,并使用HRP共轭紧凑聚合物系统进行检测。 DAB被用作显色剂。 然后用苏木精对切片进行复染,并用DPX固定。 对于其他IHC染色系统(自动化和非自动化),客户应优化可变参数,如抗原回收条件、初级抗体浓度和抗体孵育时间。 * 组织取自人类研究组织库,由NIHR剑桥生物医学研究中心支持 -
所有车道: 1/20000稀释(纯化)的抗SIRT1抗体[E104](ab32441) 车道1: Jurkat细胞裂解物 车道2: HeLa细胞裂解物 3号车道: HEK293细胞裂解物 车道4: A549细胞裂解物 车道5: SW480细胞裂解液 每车道20µg的裂解液/蛋白质。 次要 所有车道: HRP山羊抗兔IgG(H+L)(1/1000稀释) 预测的带宽大小: 82千帕 其他波段位于: 110 kDa(可能的糖基化形式) 封闭缓冲液和浓度:5%NFDM/TBST。 稀释缓冲液和浓度:5%NFDM/TBST。 -
ab32441(纯化)在1/30免疫沉淀SIRT1的Jurkat细胞(1巷)中。 对于western blotting,使用HRP结合的抗兔IgG(H+L)作为二级抗体(1/1000)。 封闭缓冲液和浓度:5%NFDM/TBST。 稀释缓冲液和浓度:5%NFDM/TBST。 -
所有车道: 1/20000稀释的抗SIRT1抗体[E104](ab32441) 车道1: HeLa全细胞裂解物 车道2: HepG2全细胞裂解物 3号车道: 人睾丸组织裂解物 车道4: 人结肠组织裂解物 每车道20µg的裂解液/蛋白质。 次要 所有车道: 羊抗狂犬病IgG H&L(HRP)以1/10000稀释度预吸附 使用ECL技术开发。 在还原条件下进行。 预测的带宽大小: 82千帕 观察到的频带大小: 110千帕 为什么实际的频带大小与预测的不同? 暴露时间: 150秒 该印迹是在MOPS缓冲系统下使用4-12%双三凝胶生成的。 凝胶在200V下运行50分钟,然后在30V下转移到硝化纤维膜上70分钟。 然后使用3%牛奶将膜封闭一小时,然后在4°C下与ab32441孵育过夜。 使用与HRP结合的抗兔抗体检测抗体结合,并使用ECL显影液进行可视化。 -
Leica BOND上福尔马林固定石蜡包埋正常人结肠切片SIRT1染色的IHC图像 TM公司 系统使用标准方案F。使用柠檬酸钠缓冲液(pH6,表位检索溶液1)热介导抗原检索对切片进行20分钟的预处理。 然后在室温下用ab32441,1/250稀释液培养该切片15分钟,并使用HRP共轭紧凑聚合物系统进行检测。 DAB被用作显色剂。 然后用苏木精对切片进行复染,并用DPX固定。 插入的二级对照图像取自无一级抗体的相同分析。 对于其他IHC染色系统(自动化和非自动化),客户应优化可变参数,如抗原回收条件、初级抗体浓度和抗体孵育时间。 * 组织取自人类研究组织库,由NIHR剑桥生物医学研究中心支持 -
用纯化的ab32441以1/150的工作稀释度对石蜡包埋的人类大脑皮层进行免疫组织化学染色。 使用的二级抗体是兔IgG的HRP聚合物。 用苏木精对样品进行反染色。 使用pH 9.0的Tris-EDTA缓冲液进行抗原检索。 使用PBS代替一级抗体作为阴性对照,如插图所示。 -
使用未纯化的ab32441在1/100稀释度下对石蜡包埋的人结肠癌进行免疫组织化学分析。 -
使用未纯化的ab32441在1/100稀释度下对石蜡包埋的人肺鳞癌进行免疫组织化学分析。
实验方案
数据表及文件
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SDS下载 -
数据表下载
文献 (144)
马丁内斯·伊格莱西亚斯 等。 抗甘氨酸:一种在培养细胞系中具有抗肿瘤特性的表皮营养生物制品。 人寿保险(巴塞尔) 12:不适用(2022年)。 公共医学:35054489 庄A 等。 二甲双胍通过抑制眼部黑色素瘤的自噬作用促进视神经蛋白的组蛋白去乙酰化并抑制肿瘤生长。 临床翻译医学 12:e660(2022)。 公共医学:35075807 王莉(Wang L) 等。 右美托咪定通过调节四甲基胞嘧啶双加氧酶1-介导的Sirtuin1的DNA去甲基化来防止心肌细胞缺氧/复氧损伤。 生物工程 13:9369-9386 (2022). 公共医学:35387565 张H 等。 乳腺癌中SIRTs表达的预后意义:一项系统综述和荟萃分析。 迪斯科舞厅 13:69 (2022). 公共医学:35927590 Tunca U公司 等。 中等强度游泳运动对老年大鼠学习和记忆的影响:Sirtuin-1的作用。 伊朗基础医学杂志 24:1413-1420 (2021). 公共医学:35096300