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在现代生物医学研究中,流式细胞术是一项非常有价值的技术。这项技术广泛用于细胞群的表征和蛋白质标记物的表达分析。但是,欠考虑的实验设计可能会导致实验结果作废。本文旨在为您提供有价值的提示,帮助您设计实验和制备样品。
对照物
所含物质
目的
说明
未染色对照
这是一个很好的例子
用于检测自发荧光,也可用作额外的阴性对照。
与微珠相比,有助于确定自发荧光的相对量。如果自发荧光水平过高,可考虑使用不同的激发光源。
内部阴性对照
不表达目标抗原且经过完全处理的细胞群。
用于避免非特异性结合产生的假阳性结果。
获取
同型对照
与同型对照抗体一同培养的细胞(细胞中不应包含由某种抗原产生的抗体)。
用于检测一抗的非特异性结合。
同型对照至少应与一抗或二抗的重链(IgA、IgG、IgD、IgE或 免疫球蛋白M)匹配,并且可与相同的荧光团偶联。
二抗对照
仅用二抗培养的细胞。
用于检测二抗的非特异性结合。
仅当使用二抗时需要。
阳性对照
表达所关注靶标的细胞。
用于避免错误抗体产生的假阴性结果。
有时候获得阳性对照细胞并不容易。