主要功能和细节
检测方法:比色法 样品类型:细胞裂解液、组织裂解液 灵敏度:0.2 ng
概述
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产品名称 岩石活性测定 试剂盒 -
检测方法 比色法 -
样品类型 细胞裂解液,组织裂解液 -
灵敏度 0.2克 -
种属反应性 以下内容: 人类 -
产品概述 ROCK活性测定试剂盒(ab211175)提供了一种非同位素、灵敏和特异的方法,可利用其生理底物MYPT1(肌球蛋白磷酸靶亚基1)监测ROCK1(ROKβ)和ROCK2(Rho激酶)。 该试剂盒也可用于筛选纯化蛋白样品中的Rho激酶抑制剂分子。
该产品使用基于酶的免疫分析检测ROCK1和ROCK2在苏氨酸696(T696)处对MYPT1的特异性磷酸化。 该底物最初与含有ROCK1和ROCK2的样品(例如纯化的激酶或细胞裂解物)一起培养。 在激酶反应后,将样品溶液转移到底物捕获板,在那里磷酸化的MYPT1-Thr696抗体检测到MYPT1。 提供重组活性ROCK2作为阳性对照。 该试剂盒的灵敏度极限为200 pg活性ROCK2。 -
说明 Rho家族成员是信号通路的重要调节成分,通过肌动蛋白细胞骨架的重组来指导细胞运动、粘附和胞质分裂。 Rho被细胞外信号如溶血磷脂酸(LPA)激活。 Rho的作用由下游Rho效应器介导。 这些效应物之一是Rho相关激酶(ROCK)。 已鉴定出两种ROCK亚型:ROCK1(也称为ROKβ)和ROCK2(也称为Rho激酶和ROKα)。 ROCK介导Rho信号传导,并通过几种底物的磷酸化重组肌动蛋白细胞骨架,这些底物有助于肌动蛋白丝的组装和收缩性。 例如,ROCK通过Thr696处肌球蛋白磷酸酶靶亚基1(MYPT1)的特异性磷酸化使肌球蛋白磷酸化失活,这导致20-kDa肌球蛋白轻链(MLC20)的磷酸化含量增加。
性能
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存放说明 请参阅协议。 -
组件 1 x 96测试 5 x 96测试 10X激酶缓冲液 1 x 20毫升 5 x 20毫升 10X洗涤缓冲液 1 x 100毫升 5 x 100毫升 活性ROCK-II(0.5µg/mL) 1 x 20微升 5 x 20微升 抗磷蛋白MYPT1(Thr696)抗体 1 x 20微升 5 x 20微升 检测稀释液 1 x 50毫升 5 x 50毫升 ATP溶液(100 mM) 1 x 100微升 5 x 100微升 Rho激酶基板涂层板 1 x 96测试 5 x 96测试 二级抗体,HRP结合物 1 x 20微升 5 x 20微升 停止解决方案 1 x 12毫升 5 x 12毫升 基底溶液 1 x 12毫升 5 x 12毫升 -
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细胞定位 岩石2:细胞质。 细胞膜。 细胞质,与肌动蛋白微丝和质膜相关。 ROCK1:细胞质。 细胞质,细胞骨架,微管组织中心,中心体,中心粒。 高尔基体膜。 细胞投射,气泡。 细胞质,细胞骨架。 细胞膜。 细胞投射,跛足。 细胞突起,皱褶。 与母亲中心粒和一个中心粒间连接子相关。 在细胞膜上用ITGB1BP1和ITGB1进行结肠酸化,主要在跛足和膜皱褶中,也在回缩纤维中。 以ITGB1BP1依赖方式定位于细胞膜(通过相似性)。 一小部分与高尔基体膜有关。 -
数据库链接
实验方案
数据表及文件
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SDS下载 -
数据表下载
文献 (3)
陈X 等。 Circ_0057558通过靶向miR-206调节ROCK1/AMPK信号通路,促进非酒精性脂肪性肝病。 细胞死亡疾病 12:809 (2021). 公共医学:34446693 Jin L公司 等。 在HPV阳性和阴性宫颈鳞癌中,lncRNA HAND2-AS1通过下调ROCK1抑制癌细胞增殖、迁移和侵袭。 实验治疗学 18:2512-2518 (2019). 公共医学:31555362 杨杰(Yang J) 等。 利帕舒地尔通过ROCK2/eNOS信号传导减弱脂多糖(LPS)介导的肺微血管内皮细胞凋亡和炎症。 医学科学莫尼特 24:3212-3219 (2018). 公共医学:29766980