Your browser does not have JavaScript enabled and some parts of this website will not work without it.
为了使您在阿布卡姆官网的浏览体验更顺畅,请使用最新版本的浏览器比如谷歌浏览器
看看我们的BETA网站,看看我们到目前为止做了什么。
搜索和浏览所选产品
通过通常的分销商购买
欢迎光临
您还没有帐户?
定制化产品和商务合作加速您的诊断和治疗项目
定制化产品
与我们成为伙伴
获取研究建议和支持
查看
一步一步完成您的实验
查看协议
活动说明、摘要提交、演讲者、注册方式及更多信息
查看全球活动安排
查看所有通路
查看交叉通路
打印此协议。
为了防止血小板在手术过程中活化,应避免强力机械力(例如快速移液、剧烈摇晃)。此外,可以使用方案中指出的血小板抑制剂,但也存在其他抑制剂。研究人员选择最适合其研究和实验目标的抑制剂。
分离血小板的应用示例如下:
Western blotting、流式细胞术、ELISA和免疫细胞化学/免疫荧光,以研究血小板内的细胞和信号传递过程。可以研究血小板在各种试剂刺激下的聚集和粘附,以及激活后颗粒成分的释放。
除非血小板用于组织培养实验,否则试剂无需无菌。除非另有说明,否则应在4°C下储存和使用所有缓冲液。
ACD缓冲液(酸-柠檬酸-挤压)
39mM柠檬酸、75mM柠檬酸钠、135mM葡萄糖,pH 7.4。
使用前,预热至室温,必要时调整pH值。
CPD缓冲液(柠檬酸-磷酸-葡萄糖)
16 mM柠檬酸、90 mM柠檬酸钠、16 mM NaH2人事军官4,142 mM葡萄糖,pH 7.4。
血小板清洗缓冲液
10 mM柠檬酸钠、150 mM氯化钠、1 mM EDTA、1%(w/v)葡萄糖,pH 7.4。
使用前,将其加热至室温,并在必要时调整pH值。
HEP缓冲器(HEP指缓冲器中的HEPES)
140 mM NaCl、2.7 mM KCl、3.8 mM HEPES、5 mM EGTA、pH 7.4。
泰罗德缓冲器
134 mM氯化钠,12 mM氯化氢钠三,2.9 mM KCl,0.34 mM Na2高性能操作4,1 mM氯化镁2,10 mM HEPES,pH 7.4。
根据实验结果,将缓冲液加热至室温或在使用前放在冰上。
2X血小板溶解缓冲液
2%NP40,30 mM HEPES,150 mM NaCl,2 mM EDTA,pH 7.4。
采血笔记
该程序的第一步包括获取全血并通过离心制备富含血小板的血浆(PRP)。离心条件可能变化很大(例如,从800 x g持续5分钟到100 x g持续20分钟),但分离效果始终良好。
验血师应将血液抽入Becton Dicinson Vacutainer®(含ACD,黄盖)或放入含有1/10体积CPD缓冲液的塑料注射器中。所需的血容量取决于实验。40–45毫升血液的平均体积为1–3 x 109血小板。血小板数量可能因血液采集对象而异。
图1。血液成分示意图