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打印缓冲液和母液
目录
里帕日本
里帕缓冲液含有离子去垢剂脱氧胆酸钠作为活性成分,特别适用于破坏核膜提取细胞核内物质。里帕分析下拉实验带来一些问题。
50 mM Tris HCl,pH 8.0150 mM氯化钠1%NP-400.5% 脱氧胆酸钠0.1%十二烷基硫酸钠
10% 脱氧胆酸钠母液(5克脱氧胆酸钠溶于 50毫升溶液中)避光保存。
NP-40型日本
20 mM Tris HCl,pH 8.0137 mM氯化钠10% 甘油1%NP-402 mM乙二胺四乙酸二乙酯
细胞骨架结合蛋白提取缓冲液
10 mM Tris,pH 7.4100 mM氯化钠1 mM乙二胺四乙酸二乙酯1 mM EGTA1 mM氟化钠20毫摩尔钠4P(P)2O(运行)72 mM钠三VO(旁白)41%Triton®声波风廓线仪X-10010% 甘油0.1%十二烷基硫酸钠0.5% 酸菜
可溶蛋白缓冲液
20 mM Tris-HCl,pH值7.51 mM EGTA(钙2+ 螯合剂)
制备原钒酸钠
所有流程必须在通风橱中进行。
1. 用双蒸水制备 100毫摩尔原钒酸钠溶液
2. 用 盐酸将 酸碱度完9
3. 煮沸至无色
4. 冷却至室温
5. 再次将 酸碱度完9
6. 再次煮沸至无色
7. 重复以上循环,直到煮沸并冷却溶液之后的 酸碱度保持 9
8. 用水补至初始体积
9. 分装之后保存于 -20℃
10. 如果样品变黄,丢弃样品
避免煮沸期间体积变化过大,可用盖子稍微盖住容器上方,减少蒸发。
TBS 10×(浓缩 特里斯缓冲盐溶液)
1升溶液:24克Tris碱(式量:121.1克)88克氯化钠(式量:58.4克)溶于 900毫升蒸馏水中用 12 N盐酸将 酸碱度完7.6加入蒸馏水至终体积为 1升
要制备 1× 溶液,将 1份 10倍溶液与 9份蒸馏水混合,并再次将 酸碱度完7.6。1× 溶液的最终摩尔浓度为 20 mM三通和 150 mM氯化钠
特里斯缓冲液的替代配方同时含有 特里斯碱和 三氯化氢这可避免大量使用具有潜在危险性的盐酸来中和单独的 特里斯碱。
TBS 10倍替代配方(浓缩 特里斯缓冲盐溶液)
1升溶液:24克Tris-HCl(式量:157.6克)5.6克Tris碱(式量:121.1克)88克氯化钠(式量:58.4克)溶于 900毫升蒸馏水中
1. 在室温下将溶液 酸碱度调节至约 7.6。如果溶液过碱,用浓 盐酸将 酸碱度完7.6;如果溶液过酸,用浓 氢氧化钠将 酸碱度完7.6。
2. 加入蒸馏水至终体积为 1升
3. 要制备 1× 溶液,将 1份 10× 溶液与 9份蒸馏水混合,并再次将 酸碱度完7.6。
4. 1× 溶液的最终摩尔浓度为 20 mM三通和 150 mM氯化钠
TBST(三个缓冲盐溶液,0.1%吐温20)
1升溶液:100毫升TBS 10×900毫升蒸馏水1毫升吐温20
中国
15克甘氨酸1克十二烷基硫酸钠10 mL吐温20
1. 用超纯水将体积调节至 800毫升
2. 将 酸碱度完2.2。
3. 加蒸馏水至 1升
高强膜再生液
需要在通风橱中进行。
100毫升意大利:20 mL十二烷基硫酸钠10%12.5 mL Tris HCl,pH 6.8,0.5 M67.5毫升蒸馏水在通风橱中加入 0.8毫升β-巯基乙醇
细胞核分离实验方案试剂缓冲液 A类
10 mM水电站1.5 mM氯化镁210 mM氯化钾0.5 DTT0.05%NP-40(或0.05%伊格帕或 Tergitol),pH 7.9
要制备 250毫升缓冲液 A类的母液:高效微粒子:1 M=238.3 g/L因此 10 mM=0.59克/250毫升氯化镁2:1M=203.3 g/L因此 1.5 mM=0.076克/250毫升氯化钾:1 M=74.5 g/L因此 10 mM=0.187克/250毫升DTT:1 M=154.2 g/L因此 0.5 mM=0.019克/250毫升NP-40:0.05%
细胞核分离实验方案试剂缓冲液 B类
5 mM水电站1.5 mM氯化镁0.2 mM乙二胺四乙酸0.5毫米DTT26% 甘油 (v/v),pH值7.9
要制备 250毫升缓冲液 B类的母液:高效微粒子:1 M=238.3 g/L因此 5 mM=0.295克/250毫升MgCl2:1 M=203.3 g/L完1.5 mM=0.076克/250毫升乙二胺四乙酸:1 M=372.2 g/L因此 0.2 mM=0.0186克/250毫升DTT:1 M=154.2 g/L因此 0.5 mM=0.019克/250毫升26% 甘油 (v/v)=65毫升
TBS 0.025%Triton X-100
1升溶液:250µL Triton®声波风廓线仪X-1001升TBS,pH值7.6–7.8
1.6%高2O(运行)2(过氧化氢)的 TBS(待定)溶液
400毫升溶液:6.4毫升(高)2O(运行)2(GPR=30%w/w)393.6毫升TBS,pH 7.6–7.8
一抗的 TBS(待定)溶液(含 1%BSA)
以使用稀释度为 1:10 的一抗为例。
1毫升溶液:100微升一抗10毫克牛血清白蛋白900µL TBS,pH值7.6–7.8
生物素化二抗的 TBS(待定)意大利(含 1%BSA)
以使用稀释度为 1:200 的生物素化二抗为例。
1毫升溶液:5微升生物素化二抗995µL TBS,pH值7.6–7.8
美国广播公司(抗生物素-生物素复合物)的 待定溶液
以每种组分的使用稀释度为 1:100 的 基础知识为例。
1毫升溶液:10微升链霉亲和素10微升HRP(或 亚太地区)-生物素980µL TBS,pH 7.6–7.8
碳酸氢盐/碳酸盐包被缓冲液 (100毫米)
3.03克钠2合作三6.0克NaHCO三(1升蒸馏水),pH值9.6PBS:1.16克钠2高性能操作40.1克氯化钾0.1克K三人事军官44克氯化钠(500毫升蒸馏水),pH值7.4