Your browser does not have JavaScript enabled and some parts of this website will not work without it.
为了使您在阿布卡姆官网的浏览体验更顺畅,请使用最新版本的浏览器比如谷歌浏览器
看看我们的BETA网站,看看我们到目前为止做了什么。
搜索和浏览所选产品
通过通常的分销商购买
欢迎光临
您还没有帐户?
定制化产品和商务合作加速您的诊断和治疗项目
定制化产品
与我们成为伙伴
获取研究建议和支持
查看支持中心
一步一步完成您的实验
查看协议
活动说明、摘要提交、演讲者、注册方式及更多信息
查看全球活动安排
查看所有通路
查看
2021年11月11日审核
下载或打印该方案。
在细胞凋亡的早期,磷脂酰丝氨酸 (PS)残基(通常隐藏在质膜内)会暴露于细胞表面,可用于细胞凋亡的发现和检测。细胞凋亡过程中,PS(聚苯乙烯)从质膜的细胞质面转移到细胞表面。膜联蛋白V是一种 钙离子依赖性蛋白,对 PS(聚苯乙烯)具有很强的亲和力,因此可用作检测细胞凋亡的探针。
下文是基于膜联蛋白V-FITC细胞凋亡检测试剂盒 (ab14085)缔约方膜联蛋白V进行 PS(聚苯乙烯)暴露检测的方案示例。需要注意的是,当使用某一试剂盒时,请务必使用数据表提供的方案,因为这一方案是专为该产品设计的,用于该产品时效果最好。
1.1按照预期的方法诱导细胞凋亡。
1.2离心收集 1-5 x 105个细胞。
1.3在 500μL 1X膜联蛋白V结合缓冲液中重悬细胞。
1.4加入 5μL膜联蛋白V-FITC和 5微升碘化丙啶(PI、可选)。
1.5室温下避光孵育 5分钟。
替代步骤:对于贴壁细胞,用 annexin V-FITC公司孵育前,先用胰蛋白酶轻轻消化细胞并用含血清的培养基洗涤细胞一次(步骤 1.3-1.5)。
1.6根据分析方法,分别进行下述 B类或 C类工作
2.1利用 FITC公司信息(通常为 FL1)在技术(Ex=488纳米;Em=350纳米)中分析 annexin V-FITC公司的结合情况
2.2如果添加碘化丙啶,则通过藻红蛋白发射信号检测器(通常为 FL2)分析 圆周率染色。
3.1将步骤 1.5得到的细胞悬液置于载玻片上。用盖玻片覆盖细胞。
替代步骤:如需分析贴壁细胞,可直接在盖玻片上培养细胞。
3.2孵育(步骤 1.5)完成后,翻转载玻片上的盖玻片,并观察细胞。观察细胞前,还可以用 1X膜联蛋白V结合缓冲液洗涤细胞,并在 2%福尔马林中固定细胞。
提示:固定前,必须用 膜联蛋白V-FITC孵育细胞,因为细胞膜破裂会导致 膜联蛋白V与细胞膜内表面上的 PS(聚苯乙烯)发生非特异性结合。
3.3使用 FITC公司和罗丹明双色滤光片在荧光显微镜下观察细胞:
下载或打印完整方案