主要功能和细节
重组生产(无动物),实现高批次一致性和长期供应安全 兔单克隆抗体[EPR18709]到LC3B-自噬体标记 适用人群:IHC-P、WB、ICC/IF 敲除已验证 反应对象:小鼠、大鼠、人类
相关共轭物和制剂
概述
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产品名称 -
描述 兔单克隆抗体 [EPR18709]至LC3B-自噬体标记 -
宿主 兔子 -
经测试应用 -
种属反应性 与反应: 老鼠、老鼠、人 -
免疫原 合成肽。 此信息为Abcam和/或其供应商专有。 -
阳性对照 WB:BMDM、U-87 MG、C6和RAW 264.7全细胞裂解物; 人脑、小鼠心脏、大鼠心脏、小鼠大脑和大鼠大脑裂解物。 ICC/IF:HeLa细胞(+/-氯喹)、HAP1细胞(+/-氯奎)(HAP1-MAP1LC3B敲除细胞用作阴性细胞系)。 IHC-P:人大脑皮层组织切片
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规则说明 该产品是一种重组单克隆抗体,具有以下优点: -高批次一致性和再现性 -提高敏感性和特异性 -长期供应安全 -无动物制作
有关更多信息 请看这里 . 我们的RabMAb ® 该技术是一种基于杂交瘤的专利技术,用于制备兔单克隆抗体。 有关我们专利的详细信息,请参阅 RabMAb公司 ® 专利 .
性能
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形式 液体 -
存放说明 在4°C下装运。 短期储存在+4°C下(1-2周)。 交付时,等分。 长期储存于-20°C。 避免冷冻/解冻循环。 -
存储溶液 pH值:7.20 防腐剂:0.01%叠氮化钠 成分:59%PBS、40%甘油(甘油、甘油)、0.05%BSA -
浓度信息加载。。。 -
纯度 蛋白质A纯化 -
克隆 单克隆 -
协调 EPR18709 -
同种型 免疫球蛋白G -
新冠肺炎疫苗
相关产品
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替代版本 -
兼容的辅助设备 -
同位素控制 -
重组蛋白 -
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应用
靶标
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功能 可能与自噬体空泡(自噬小体)的形成有关。 -
组织特异性 最丰富的是心脏、大脑、骨骼肌和睾丸。 在肝脏中观察到少量表达。 -
序列相似性 属于MAP1 LC3家族。 -
翻译后修饰 前体分子被APG4B/ATG4B裂解形成LC3-I。这被APG7L/ATG7激活,转移到ATG3并结合到磷脂形成LC3-II。 -
细胞定位 细胞质>细胞骨架。 内膜系统。 细胞质小泡>自噬体膜。 LC3-II与自噬膜结合。 -
UniProt提供的信息 -
数据库链接 Entrez基因: 81631 人类 Entrez基因: 67443 鼠标 Entrez基因: 64862 老鼠 Omim公司: 609604 人类 瑞士保护银行: 问题9GZQ8 人类 瑞士保护银行: Q9CQV6系列 鼠标 瑞士保护银行: Q62625问题 老鼠 尤尼金: 356061 人类
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别名 ATG8F抗体 自噬相关蛋白LC3 B抗体 自噬相关泛素样修饰物LC3 B抗体
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图片
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所有车道: 抗-LC3B抗体[EPR18709]-自身吞噬体标记物(ab192890),稀释度为1/2000 车道1: 野生型HepG2未经处理的对照细胞裂解物 车道2: 野生型HepG2处理的氯喹(50 uM,16 h)细胞裂解物 3号车道: MAP1LC3B敲除HepG2未经处理的对照细胞裂解物 车道4: MAP1LC3B敲除HepG2处理的氯喹(50 uM,16 h)细胞裂解物 车道5: U-87 MG细胞裂解物 车道6: PC-12细胞裂解物 每车道20µg的裂解液/蛋白质。 在还原条件下进行。 预测的带宽大小: 15千Da 观察到的频带大小: 14.16千Da 为什么实际的频带大小与预测的不同? Western blot假彩色图像:抗-LC3B抗体[EPR18709]-吞噬体标记物染色(1/2000稀释),以绿色显示; 小鼠抗α-微管蛋白[DM1A]( 约7291 )1/2000稀释的负载对照染色,显示为红色。在蛋白质印迹中,ab192890显示与LC3B特异性结合。 在处理过的野生型HepG2细胞裂解液中,在16/14 kDa处观察到一条带(黄色箭头),在MAP1LC3B敲除细胞系中未观察到该大小的信号 ab277828号 (敲除细胞裂解物 约283796 ). 为了生成此图像,分析了野生型和MAP1LC3B敲除HepG2细胞裂解物。 首先,样品在SDS-PAGE凝胶上运行,然后转移到硝化纤维素膜上。 TBS-0.1%吐温中3%牛奶中的膜被堵塞 ® 20(TBS-T),然后在4°C下与一级抗体孵育过夜。 在TBS-T中清洗四次斑点,在室温下与二级抗体孵育1小时,再次清洗四次,然后成像。 二级抗体为羊抗兔IgG H&L 800CW和羊抗鼠IgG H&L 680RD,稀释度为1/20000。 -
车道1: 野生型HAP1细胞裂解物(20µg) 车道2: LC3B敲除HAP1细胞裂解物(20µg) 3号车道: 人脑组织裂解物(20µg) 车道4: U-87 MG细胞裂解液(20µg) 1-4车道: 合并信号(红色和绿色)。 绿色-在14和16 kDa时观察到的目标。 红色-装载控制, 约8245 ,在37kDa下观察到。 这个western blot图像是ab192890和竞争对手最常引用的兔多克隆抗体之间的比较。 -
ab192890在HeLa(宫颈腺癌人上皮细胞系)细胞+/-氯喹(50μM,24小时)中对LC3B进行染色。 细胞用100%甲醇固定(5分钟),用0.1%Triton X-100渗透5分钟,然后用1%BSA/10%正常山羊血清/0.3M甘氨酸在0.1%PBS-Tween中封闭1小时。 然后在+4°C下用1μg/ml的ab192890和 约195889年 ,小鼠单克隆抗α-管蛋白(Alexa Fluor ® 594),以1/250稀释(以假彩色红色显示),然后在室温下与山羊抗兔IgG的第二抗体(Alexa Fluor ® 488) ( 约150081 )浓度为2μg/ml(以绿色显示)。 用DAPI标记细胞核DNA(以蓝色显示)。 使用共焦显微镜(Leica-Microsystems,TCS SP8)拍摄图像。 Alexa Fluor公司 ® 488 ( 约225383 )和Alexa Fluor ® 647 ( ab225382号 )这个克隆有共轭版本。 -
ab192890免疫组化法对石蜡包埋人星形细胞瘤组织中LC3B进行染色。 用柠檬酸缓冲液(pH 6.0,表位检索溶液1)进行热介导抗原检索20分钟。 样品与一级抗体在室温下以1/1000稀释培养30分钟。 使用即用型LeicaDS9800(Bond™Polymer Refine Detection)作为第二抗体。 苏木精用作副染色。 免疫染色在徕卡生物系统BOND®RX仪器上进行。 -
用ab192890对福尔马林固定石蜡包埋的人类皮层进行免疫组织化学分析,并以0.1µg/ml的稀释度标记LC3B。在Ventana DISCOVERY ULTRA(Roche Tissue Diagnostics)仪器上使用OptiView DAB IHC检测试剂盒进行免疫染色。 使用ULTRA细胞调节液(CC1 pH8.5)进行热介导抗原回收32分钟。 ab192890抗LC3B抗体在37°C下孵育16分钟。 切片用苏木精II复染。 图像插图显示仅二级抗体对照组无染色 -
免疫组化分析中使用ab192890对组织芯片进行抗-LC3B抗体[EPR18709]-自噬体标记染色。 本表详细概述了每种测试样品类型的阳性(勾号)和阴性(交叉标记)染色。 用柠檬酸缓冲液(pH 6.0,表位检索溶液1)进行热介导抗原检索20分钟。 该切片在室温下与ab192890孵育30分钟。 免疫染色在徕卡生物系统BOND®RX仪器上进行。 -
在Leica BOND上进行的福尔马林固定石蜡包埋的正常人大脑皮层切片中LC3B染色的IHC图像* TM(TM) 使用标准协议的系统 F类 用柠檬酸钠缓冲液(pH6,表位检索溶液1)进行热介导抗原检索预处理20分钟。 然后将切片与 公元221794年 0.1ug/ml,在室温下持续15分钟,并使用HRP共轭紧凑聚合物系统进行检测。 DAB被用作显色剂。 然后用苏木精对切片进行复染,并用DPX固定。 插入的二级对照图像取自无一级抗体的相同分析。 对于其他IHC染色系统(自动化和非自动化),客户应优化可变参数,如抗原回收条件、初级抗体浓度和抗体孵育时间。 该数据是在仅含有PBS的不同缓冲液配方中使用相同的抗体克隆得到的( 公元221794年 ). -
ab192890染色HAP1细胞中的LC3B(野生型和MAP1LC3B敲除)+/-氯喹(50μM,24小时)。 细胞用100%甲醇固定(5分钟),用0.1%Triton X-100渗透5分钟,然后用1%BSA/10%正常山羊血清/0.3M甘氨酸在0.1%PBS-Tween中封闭1小时。 然后在+4°C下用1μg/ml的ab192890和 约195889年 ,小鼠单克隆抗α-管蛋白(Alexa Fluor ® 594),稀释1/250(以伪红色显示),然后在室温下用山羊抗兔IgG二级抗体(Alexa Fluor)进一步孵育1小时 ® 488) ( 约150081 )浓度为2μg/ml(以绿色显示)。 用DAPI标记细胞核DNA(以蓝色显示)。 使用共焦显微镜(Leica-Microsystems,TCS SP8)拍摄图像。 -
车道1: 野生型HAP1细胞裂解物(20µg) 车道2: LC3B敲除HAP1细胞裂解物(20µg) 3号车道: 人脑组织裂解物(20µg) 车道4: U-87 MG细胞裂解液(20µg) 1-4车道: 合并信号(红色和绿色)。 绿色-在14和16 kDa时观察到ab192890。 红色-装载控制, 约8245 ,在37kDa下观察到。 ab192890在野生型HAP1细胞中与LC3B特异性反应。 检测LC3B敲除样品时未观察到条带。 对野生型和LC3B敲除样品进行SDS-PAGE分析。 ab192890和 约8245 (GAPDH的负荷控制)分别稀释1/2000和1/10000,并在4°C下培养过夜。 用山羊抗兔IgG H&L(IRDye ® 800CW)预吸附床( ab216773号 )和山羊抗鼠IgG H&L(IRDye ® 680RD)预吸附床( 约216776 )二级抗体在成像前在室温下以1/10000稀释1小时。 -
所有车道: 抗-LC3B抗体[EPR18709]-自身吞噬体标记物(ab192890),稀释度为1/2000 车道1: 人脑裂解物 车道2: U-87 MG(人胶质母细胞瘤-星形细胞瘤上皮细胞系)全细胞裂解物 3号车道: C6(大鼠胶质瘤细胞系)全细胞裂解物 车道4: RAW 264.7(Abelson小鼠白血病病毒转化的小鼠巨噬细胞系)全细胞裂解物 车道5: 小鼠心脏裂解物 车道6: 大鼠心脏裂解物 7号车道: 小鼠脑裂解物 第8车道: 大鼠脑裂解物 每车道20µg的裂解液/蛋白质。 次要 所有车道: 山羊抗狂犬病IgG过氧化物酶结合物,在1/10000稀释度下特异于非还原型IgG 预测的带宽大小: 15千Da 观察到的频带大小: 14.16千Da 为什么实际的频带大小与预测的不同? 阻塞/稀释缓冲液: 5%NFDM/TBST。 暴露时间: 1-6车道:3分钟; 车道7和8:30秒。 -
在0.9µg/ml的U-87 MG(人类胶质母细胞瘤-星形细胞瘤上皮细胞系)裂解液上测试不同批次的ab192890。在每个通道中加载15µg裂解液。 在14,16 kDa时观察到的谱带。
数据表及文件
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SDS下载 -
数据表下载
合格证书
文献 (305)
高P 等。 circEXOC5通过PTBP1/Skp2/Runx2轴促进急性肺损伤,激活自噬。 生命科学联盟 6:N/A(2023年)。 公共医学:36302650 王伟 等。 锌填充蛋白CXXC5通过调节TSC1/mTOR信号通路促进乳腺癌的发生。 生物化学杂志 299:102812 (2023). 公共医学:36539038 蒋B 等。 二磷酸氯喹和红景天苷联合通过调节线粒体功能障碍和自噬诱导人肝细胞凋亡。 分子医学代表 27:不适用(2023年)。 公共医学:36579660 崔毅 等。 电针可能通过促进AMPK/mTOR介导的脊髓小胶质细胞自噬的进展来减轻备用神经损伤引起的神经病理性疼痛。 Ann Transl医学 10:1278 (2022). 公共医学:36618785 李鹏 等。 4-羟基异亮氨酸通过触发内质网应激和自噬抑制肿瘤生长。 Curr Res药物研发 3:100127 (2022). 公共医学:36568272