抗-Histone H3(三甲基K4) 抗体- ChIP等级(ab8580)
主要功能和细节
兔多克隆到组蛋白H3(三甲基K4)-ChIP级 适用人群:PepArr、ChIP、WB、IHC-P、ICC/IF 反应对象:奶牛、人类 同位素:IgG
选择批间可重复性更高的重组抗体
研究可靠 —— 各批次间结果一致且可重复 长期批量供应 —— 采用重组技术,可实现快速生产 首页 符合伦理标准 —— 产品不含动物成分
概述
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产品名称 -
日本 兔多克隆抗体 组蛋白H3(三甲基K4)-ChIP级 -
宿主 兔子 -
经测试应用 -
种属反应性 与反应: 奶牛,人类 预测可用于: 小鼠、大鼠、兔子、猪、酿酒酵母、四膜虫、非洲爪蟾、拟南芥、秀丽隐杆线虫、黑腹果蝇、印度麂、Oikopleura、植物、斑马鱼、哺乳动物、克氏锥虫、普通狨猴、水稻、热带爪蟾 -
免疫原 人组蛋白H3 aa 1-100(三甲基K4)内与锁孔帽贝血蓝蛋白偶联的合成肽。 确切的顺序是专有的。 (肽可用作 约92374 ) -
阳性对照 ICC/IF:HeLa细胞
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常规说明 在免疫荧光中,三甲基赖氨酸4的一个独特特性是其明显的“环状”区域,这些区域看起来像是核质“洞”。 这些代表剪接因子隔室的位置,通常仅使用印度麂成纤维细胞中的DNA染色就很容易识别。 已知这些剪接因子室优先与活性基因和高度乙酰化组蛋白H3相关。 正如预期的那样,这种抗体不能染色异染色质(由迈克尔·亨泽尔实验室的柯克·麦克马纳斯工作)。 免疫荧光结果表明该抗体是 一种特殊的常染色质探针 . 了解ChIP检测试剂盒、其他ChIP抗体、协议等 ChIP分析指南 . Abcam推荐的二级犬-山羊抗狂犬病HRP( 约205718 )和山羊抗兔Alexa Fluor ® 488 ( 约150077 ). 请参阅其他 抗兔次级抗体 可以与这种抗体一起使用。 多年来,生命科学行业一直面临着再现性危机。 Abcam正在通过我们的一系列重组单克隆抗体和用于金标准验证的敲除编辑细胞系引领解决这一问题。 购买前请检查此产品是否满足您的需求。 如果您有任何问题、特殊要求或疑虑,请在购买之前向我们发送查询和/或联系我们的支持团队。 以下是本产品的推荐替代品,以及出版物、客户评论和问答
性能
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形式 液体 -
存放说明 在4°C下装运。 短期储存在+4°C下(1-2周)。 交付时,等分。 储存于-20°C或-80°C。 避免冷冻/解冻循环。 -
存储溶液 pH值:7.40 防腐剂:0.02%叠氮化钠 成分:PBS 浓度<1mg/ml的该产品批次可以添加BSA作为稳定剂。 如果您想了解有关特定批次配方的信息,请联系我们的科学支持团队,他们将乐于提供帮助。 -
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发动机 免疫原亲和力纯化 -
克隆 多克隆 -
同种型 免疫球蛋白G -
研究领域
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兼容的辅助设备 -
控制肽 -
同位素控制 -
阳性对照 -
重组蛋白 -
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应用
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靶标
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功能 核小体的核心成分。 核小体将DNA包裹并压缩成染色质,限制了需要DNA作为模板的细胞机制对DNA的访问。 因此,组蛋白在转录调控、DNA修复、DNA复制和染色体稳定性中发挥着核心作用。 DNA可及性是通过组蛋白的一系列复杂的翻译后修饰(也称为组蛋白密码)和核小体重塑来调节的。 -
序列相似性 属于组蛋白H3家族。 -
发展阶段 在S期表达,然后随着分化过程中细胞分裂减慢,表达强烈下降。 -
翻译后修饰 乙酰化通常与基因激活有关。 Lys-10(H3K9ac)上的乙酰化破坏Arg-9(H3R8me2s)的甲基化。 Lys-19(H3K18ac)和Lys-24(H3K24ac)上的乙酰化有利于Arg-18(H3R17me)上的甲基化。 PADI4在Arg-9(H3R8ci)和/或Arg-18(H3R17ci)处的瓜氨酸化会损害甲基化并抑制转录。 CARM1在Arg-18(H3R17me2a)处的不对称二甲基化与基因激活有关。 PRMT5在Arg-9(H3R8me2s)处的对称二甲基化与基因抑制有关。 PRMT6在Arg-3(H3R2me2a)处的不对称二甲基化与基因抑制有关,并且与H3 Lys-5甲基化(H3K4me2和H3K4me3)相互排斥。 H3R2me2a存在于基因的3'处,无论其转录状态如何,它在非活性启动子上富集,而在活性启动子中不存在。 Lys-5(H3K4me)、Lys-37(H3K36me)和Lys-80(H3K 79me)的甲基化与基因激活有关。 Lys-5(H3K4me)的甲基化促进H3和H4的后续乙酰化。 Lys-80甲基化(H3K79me)与DNA双链断裂(DSB)反应相关,是TP53BP1的特异靶点。 Lys-10(H3K9me)和Lys-28(H3K27me)的甲基化与基因抑制有关。 Lys-10(H3K9me)的甲基化是HP1蛋白(CBX1、CBX3和CBX5)的一个特定靶点,可防止随后Ser-11(H3S10ph)的磷酸化以及H3和H4的乙酰化。 Lys-5(H3K4me)和Lys-80(H3K 79me)的甲基化需要H2B在“Lys-120”的初步单泛素化。 Lys-10(H3K9me)和Lys-28(H3K27me)的甲基化富集在非活性X染色体染色质中。 前期GSG2/haspin在Thr-4(H3T3ph)下磷酸化,后期去磷酸化。 AURKB在Ser-11(H3S10ph)的磷酸化对有丝分裂和减数分裂期间的染色体凝聚和细胞周期进展至关重要。 此外,RPS6KA4和RPS6KA5在Ser-11(H3S10ph)处的磷酸化在间期很重要,因为它能够在外界刺激后转录基因,如丝裂原、应激、生长因子或紫外线照射,并导致基因的激活,如c-fos和c-jun, 与基因激活相关,防止Lys-10(H3K9me)甲基化,但促进H3和H4的乙酰化。 AURKB在Ser-11(H3S10ph)的磷酸化介导HP1蛋白(CBX1、CBX3和CBX5)与异染色质的分离。 Ser-11的磷酸化(H3S10ph)也是肿瘤细胞转化的重要调节机制。 在有丝分裂期间或紫外线B照射下,MLTK亚型1、RPS6KA5或AURKB在Ser-29(H3S28ph)下磷酸化。 PRKCBB在Thr-7(H3T6ph)处的磷酸化是表观遗传转录激活的特异标记,可防止LSD1/KDM1A对Lys-5(H3K4me)的去甲基化。 在着丝粒处,由DAPK3和PKN1从前期到后期早期在Thr-12(H3T11ph)处特异性磷酸化。 PKN1在Thr-12(H3T11ph)处的磷酸化是促进KDM4C/JMJD2C对Lys-10(H3K9me)去甲基化的表观遗传转录激活的特异标记。 JAK2在Tyr-42(H3Y41ph)处的磷酸化促进CBX5(HP1α)从染色质中排除。 在淋巴细胞中被RAG1单泛素化,V(D)J重组需要单泛素化(通过相似性)。 CUL4-DDB-RBX1复合物对紫外线照射的反应中泛素化。 这可能会削弱组蛋白和DNA之间的相互作用,并促进DNA可接近性以修复蛋白质。 -
细胞定位 核心。 染色体。 -
UniProt提供的信息 -
数据库链接 Entrez基因: 8350 人类 Entrez基因: 8351 人类 Entrez基因: 8352 人类 Entrez基因: 8353 人类 Entrez基因: 8354 人类 Entrez基因: 8355 人类 Entrez基因: 8356 人类 Entrez基因: 8357 人类
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别名 H3组蛋白家族成员E假基因抗体 H3组蛋白家族成员A抗体 H3/A抗体
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图片
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ab8580染色HeLa细胞组蛋白H3(三甲基K4)。 细胞用100%甲醇固定(5分钟),用0.1%PBS-Triton X-100渗透5分钟,然后用1%BSA/10%正常山羊血清/0.3M甘氨酸在0.1%PBS吐温中封闭1小时。 然后在4°C下用ab8580以0.1µg/ml和 约7291 ,小鼠单克隆[DM1A]到α-管蛋白-负载控制。 然后将细胞与 约150081 、山羊抗兔IgG-H&L(Alexa Fluor)多克隆二级抗体 ® 488),以1/1000稀释度预吸附(以绿色显示)和 ab150120型 ,山羊抗小鼠IgG-H&L的多克隆第二抗体(Alexa Fluor ® 594),以1/1000稀释度预吸附(以假彩色品红色显示)。 用DAPI标记细胞核DNA(以蓝色显示)。 也适用于用4%多聚甲醛固定的细胞(10分钟)。 使用高含量分析仪(Operetta CLS、Perkin Elmer)采集图像,并显示共焦截面的最大强度投影。 -
根据Abcam X-ChIP协议,从U-2 OS(人类骨肉瘤上皮细胞系)细胞制备染色质。 用甲醛固定细胞10分钟。 使用25µg染色质、2µg ab8580(蓝色)和20µl蛋白A/g sepharose珠进行ChIP。 未向珠子对照组(黄色)添加抗体。 用实时PCR(Taqman方法)定量免疫沉淀DNA。 引物和探针位于转录区的第一kb。 -
1µg/ml的抗-Histone H3(三甲基K4)抗体-ChIP级(ab8580)+0.5µg的小牛胸腺组蛋白制剂(核裂解物) 次要 山羊抗狂犬病IgG(H+L)HRP结合抗体1/50000稀释 在还原条件下进行。 预测的带宽大小: 15千Da 观察到的频带大小: 17千Da 为什么实际的频带大小与预测的不同? 暴露时间: 8分钟 -
组蛋白H3赖氨酸4(H3-K4)三甲基化特异性ab8580(1:100)(黄绿色)免疫染色的人女性淋巴母细胞; 用碘化丙啶(PI)将DNA染成红色。 注意,非活性X染色体(箭头)和着丝粒周围异染色质基本上没有这种修饰。 -
在Leica Bond上进行的人类结肠福尔马林固定石蜡包埋组织切片*中ab8580染色组蛋白H3(三甲基K4)的IHC图像。 用柠檬酸钠缓冲液(pH 6,表位检索溶液1)进行热介导抗原检索预处理20分钟。 然后将切片与ab8580,1/500稀释液在室温下孵育15分钟,并使用HRP缀合的紧密聚合物系统进行检测。 DAB被用作显色剂。 然后用苏木精对切片进行复染,并用DPX固定。 阴性对照组(插图)未使用一级抗体。 对于其他IHC染色系统(自动化和非自动化),客户应优化可变参数,如抗原回收条件、初级抗体浓度和抗体孵育时间。 *组织取自人类研究组织库,由NIHR剑桥生物医学研究中心支持 -
在肽阵列中对所有批次的ab8580进行测试,以对抗不同组蛋白H3修饰的肽。 将每种肽的六份稀释液打印到肽阵列上,一式三份,并将结果平均后绘制到图表上。 结果显示与组蛋白H3-三甲基K4肽有很强的结合( ab1342号 ),表明该抗体特异性识别组蛋白H3-三甲基K4修饰。 组蛋白H3-二甲基K4修饰后观察到轻微的交叉反应。 建议进行优化以避免阵列信号饱和。 -
根据Abcam X-ChIP协议,从人类细胞裂解物-核B细胞制备染色质。 用甲醛固定细胞10分钟。 在4°C下16小时内,在ChIP缓冲液中使用0.5µg ab8580/µg染色质进行ChIP。 用实时PCR(Taqman方法)定量免疫沉淀DNA。 引物和探针位于转录区的第一kb。 阴性对照:IgG和Gene Desert。 阳性对照:GAPDH启动子。
实验方案
数据表及文件
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SDS下载 -
数据表下载
文 (1982)
胡X 等。 从具有染色质凝集的小鼠雌性生殖系干细胞中获得的单倍体精子样细胞的后代。 细胞生物学 12:5 (2022). 公共医学:34983631 郭P 等。 组蛋白变体H3.3通过增强染色质适应性来维持成人造血干细胞的稳态。 Nat细胞生物学 24:99-111 (2022). 公共医学:34961794 田GG 等。 对3D基因组结构的综合分析表明,CTCF保持了小鼠雌性生殖系干细胞的特性。 细胞分子生命科学 79:22 (2022). 公共医学:34981210 Reverdatto S公司 等。 脊椎动物中枢神经系统再生区与非再生区DNA甲基化的发育和损伤诱导变化。 BMC基因组学 23:2 (2022). 公共医学:34979916 李伟 等。 4,5-二甲氧基斑蝥素-6-酮是一种新型LSD1抑制剂,可抑制胶质母细胞瘤细胞的增殖,诱导细胞凋亡和凋亡。 癌细胞Int 22:32 (2022). 公共医学:35042538