抗-Histone H3(乙酰基K27) 抗体- ChIP等级(ab4729)
主要功能和细节
兔多克隆到组蛋白H3(乙酰基K27)-ChIP级 适用人群:ICC/IF、WB、IHC-P、ChIP、PepArr 与以下物质反应:小鼠、大鼠、奶牛、人类、重组片段 同位素:IgG
选择批间可重复性更高的重组抗体
研究可靠 —— 各批次间结果一致且可重复 长期批量供应 —— 采用重组技术,可实现快速生产 首次实验即可成功 —— 经过大量验证确认了特异性 符合伦理标准 —— 产品不含动物成分
概述
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产品名称 -
描述 兔多克隆抗体 组蛋白H3(乙酰基K27)-ChIP级 -
宿主 兔子 -
特异性 从2024年1月起,该多克隆补货批次的QC测试发生了变化。 我们的Abcam产品承诺仍涵盖所有测试和预期的应用和反应性物种组合。 然而,我们不再测试所有应用程序。 有关特定批次的更多信息,请联系我们的科学支持部门,他们将乐于提供帮助。 -
经测试应用 -
种属反应性 与反应: 小鼠、大鼠、奶牛、人、重组片段 预测可用于: 鸡肉、非洲爪蟾、拟南芥、黑腹果蝇、猴子、斑马鱼、恶性疟原虫、大米、氰芥 -
免疫原 与钥匙孔帽贝血蓝蛋白偶联的人类组蛋白H3 aa 1-100(乙酰基K27)对应的合成肽。 (肽可用作 ab24404型 ) -
阳性对照 WB:HeLa(人宫颈腺癌上皮细胞)细胞裂解物-丁酸钠处理的,HeLa的核裂解物(富含氚),NIH/3T3(小鼠胚胎成纤维细胞系)核裂解物的浓缩物(富含氘)和PC-12(大鼠肾上腺嗜铬细胞瘤细胞)核裂解液的浓缩物。 ICC/IF:HeLa细胞
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常规说明 了解ChIP检测试剂盒、其他ChIP抗体、协议等 ChIP分析指南 . 多年来,生命科学行业一直面临着再现性危机。 Abcam正在通过我们的一系列重组单克隆抗体和用于金标准验证的敲除编辑细胞系引领解决这一问题。 购买前请检查此产品是否满足您的需求。 如果您有任何问题、特殊要求或疑虑,请在购买前向我们发送询问和/或联系我们的支持团队。 以下是本产品的推荐替代品,以及出版物、客户评论和问答
性能
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形式 液体 -
存放说明 在4°C下装运。 短期储存在+4°C下(1-2周)。 交付时,等分。 储存于-20°C或-80°C。 避免冷冻/解冻循环。 -
存储溶液 pH值:7.40 防腐剂:0.02%叠氮化钠 成分:PBS 浓度<1mg/ml的该产品批次可以添加BSA作为稳定剂。 如果您想了解有关特定批次配方的信息,请联系我们的科学支持团队,他们将乐于提供帮助。 -
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纯度 免疫原亲和力纯化 -
克隆 使 -
同种型 免疫球蛋白G -
研究领域
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兼容的辅助设备 -
控制肽 -
免疫肽(阻断) -
同位素控制 -
阳性对照 -
重组蛋白 -
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应用
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靶标
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功能 核小体的核心成分。 核小体将DNA包裹并压缩成染色质,限制了需要DNA作为模板的细胞机制对DNA的访问。 因此,组蛋白在转录调控、DNA修复、DNA复制和染色体稳定性中发挥着核心作用。 DNA可及性是通过组蛋白的一系列复杂的翻译后修饰(也称为组蛋白密码)和核小体重塑来调节的。 -
序列相似性 属于组蛋白H3家族。 -
发展阶段 在S期表达,然后随着分化过程中细胞分裂减慢,表达强烈下降。 -
翻译后修饰 乙酰化通常与基因激活有关。 Lys-10(H3K9ac)上的乙酰化破坏Arg-9(H3R8me2s)的甲基化。 Lys-19(H3K18ac)和Lys-24(H3K24ac)上的乙酰化有利于Arg-18(H3R17me)上的甲基化。 PADI4在Arg-9(H3R8ci)和/或Arg-18(H3R17ci)处的瓜氨酸化会损害甲基化并抑制转录。 CARM1在Arg-18(H3R17me2a)处的不对称二甲基化与基因激活有关。 PRMT5在Arg-9(H3R8me2s)处的对称二甲基化与基因抑制有关。 PRMT6在Arg-3(H3R2me2a)处的不对称二甲基化与基因抑制有关,并且与H3 Lys-5甲基化(H3K4me2和H3K4me3)相互排斥。 H3R2me2a存在于基因的3'处,无论其转录状态如何,它在非活性启动子上富集,而在活性启动子中不存在。 Lys-5(H3K4me)、Lys-37(H3K36me)和Lys-80(H3K 79me)的甲基化与基因激活有关。 Lys-5(H3K4me)的甲基化促进H3和H4的后续乙酰化。 Lys-80甲基化(H3K79me)与DNA双链断裂(DSB)反应相关,是TP53BP1的特异靶点。 Lys-10(H3K9me)和Lys-28(H3K27me)的甲基化与基因抑制有关。 Lys-10(H3K9me)的甲基化是HP1蛋白(CBX1、CBX3和CBX5)的一个特定靶点,可防止随后Ser-11(H3S10ph)的磷酸化以及H3和H4的乙酰化。 Lys-5(H3K4me)和Lys-80(H3K 79me)的甲基化需要H2B在“Lys-120”的初步单泛素化。 Lys-10(H3K9me)和Lys-28(H3K27me)的甲基化富集在非活性X染色体染色质中。 前期GSG2/haspin在Thr-4(H3T3ph)下磷酸化,后期去磷酸化。 AURKB在Ser-11(H3S10ph)的磷酸化对有丝分裂和减数分裂期间的染色体凝聚和细胞周期进展至关重要。 此外,RPS6KA4和RPS6KA5在Ser-11(H3S10ph)处的磷酸化在间期很重要,因为它能够在外界刺激后转录基因,如丝裂原、应激、生长因子或紫外线照射,并导致基因的激活,如c-fos和c-jun, 与基因激活相关,防止Lys-10(H3K9me)甲基化,但促进H3和H4的乙酰化。 AURKB在Ser-11(H3S10ph)的磷酸化介导HP1蛋白(CBX1、CBX3和CBX5)与异染色质的分离。 Ser-11的磷酸化(H3S10ph)也是肿瘤细胞转化的重要调节机制。 在有丝分裂期间或紫外线B照射下,MLTK亚型1、RPS6KA5或AURKB在Ser-29(H3S28ph)下磷酸化。 PRKCBB在Thr-7(H3T6ph)处的磷酸化是表观遗传转录激活的特异标记,可防止LSD1/KDM1A对Lys-5(H3K4me)的去甲基化。 在着丝粒处,DAPK3和PKN1在Thr-12(H3T11ph)从前期到后期的早期特异性磷酸化。 PKN1在Thr-12(H3T11ph)处的磷酸化是表观遗传转录激活的特异性标签,其促进KDM4C/JMJD2C对Lys-10(H3K9me)的去甲基化。 JAK2在Tyr-42(H3Y41ph)处的磷酸化促进CBX5(HP1α)从染色质中排除。 RAG1在淋巴细胞中单泛素化,V(D)J重组需要单泛素(根据相似性)。 CUL4-DDB-RBX1复合物对紫外线照射的反应中泛素化。 这可能会削弱组蛋白和DNA之间的相互作用,并促进DNA对修复蛋白质的可及性。 -
细胞定位 核心。 染色体。 -
UniProt提供的信息 -
数据库链接 Entrez基因: 8350 人类 Entrez基因: 8351 人类 Entrez基因: 8352 人类 Entrez基因: 8353 人类 Entrez基因: 8354 人类 Entrez基因: 8355 人类 Entrez基因: 8356 人类 Entrez基因: 8357 人类
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别名 H3组蛋白家族成员E假基因抗体 H3组蛋白家族成员A抗体 H3/A抗体
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图片
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ab4729染色HeLa细胞组蛋白H3(乙酰基K27)。 细胞用100%甲醇固定(5分钟),用0.1%PBS-Triton X-100渗透5分钟,然后用1%BSA/10%正常山羊血清/0.3M甘氨酸在0.1%PBS吐温中封闭1小时。 然后在4°C下用1µg/ml的ab4729培养细胞过夜 约7291 ,小鼠单克隆[DM1A]到α-管蛋白-负载控制。 然后将细胞与 约150081 、山羊抗兔IgG-H&L(Alexa Fluor)多克隆二级抗体 ® 488),以1/1000稀释度预吸附(以绿色显示)和 ab150120型 小鼠IgG-H&L(Alexa Fluor)山羊多克隆二级抗体 ® 594),以1/1000稀释度预吸附(以伪品红色显示)。 用DAPI标记细胞核DNA(以蓝色显示)。 也适用于用4%多聚甲醛固定的细胞(10分钟)。 使用高含量分析仪(Operetta CLS、Perkin Elmer)采集图像,并显示共焦截面的最大强度投影。 -
根据Abcam X-ChIP协议,从HeLa(宫颈腺癌人上皮细胞系)细胞制备染色质。 用甲醛固定细胞10分钟。 使用25µg染色质、2µg ab4729(蓝色)和20µl蛋白A/g sepharose珠进行ChIP。 没有向珠子对照中添加抗体(黄色)。 用实时PCR(Taqman方法)定量免疫沉淀DNA。 引物和探针位于转录区的第一kb。 -
在Leica Bond上进行的人类结肠福尔马林固定石蜡包埋组织切片*中ab4729染色组蛋白H3(乙酰基K27)的IHC图像。 用pH值为6的柠檬酸钠缓冲液进行热介导抗原回收预处理20分钟。 然后在室温下用ab4729(5µg/ml)培养该切片15分钟,并使用HRP共轭紧凑聚合物系统检测。 DAB被用作显色剂。 然后用苏木精对切片进行复染,并用DPX固定。 阴性对照组未使用一级抗体(如插图所示)。 对于其他IHC染色系统(自动化和非自动化),客户应优化可变参数,如抗原回收条件、初级抗体浓度和抗体孵育时间。 *组织取自人类研究组织库,由NIHR剑桥生物医学研究中心支持 -
所有车道: 抗-Histone H3(乙酰基K27)抗体-ChIP等级(ab4729),1µg/ml 车道1: HeLa(人宫颈腺癌上皮细胞)细胞裂解物-丁酸钠处理 车道2: HeLa(人宫颈腺癌上皮细胞)核裂解物(富含氚) 3号车道: NIH/3T3(小鼠胚胎成纤维细胞系)核裂解物(富含氚) 车道4: PC-12(大鼠肾上腺嗜铬细胞瘤细胞)核裂解物(富含氚) 每条泳道10µg的裂解物/蛋白质。 次要 所有车道: 山羊多克隆至兔IgG-H&L-Pre-Adsorbed(HRP),稀释度为1/50000 预测的带宽大小: 15千Da 观察到的频带大小: 17千Da 为什么实际的频带大小与预测的不同? 暴露时间: 30秒 阻塞缓冲区: 2%BSA区块 凝胶类型: 人工编码站 -
所有车道: 抗-Histone H3(乙酰基K27)抗体-ChIP等级(ab4729),1/2500稀释 车道1: 未经处理的小鼠MEF细胞裂解物 车道2: 0.4µM曲古抑菌素A处理18小时小鼠MEF细胞裂解物 每车道9微克的裂解液/蛋白质。 次要 所有车道: 驴抗狂犬病IgG H&L(HRP)( 约6802 )稀释1/20000 预测的带宽大小: 15千Da
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1号和3号车道: 抗-Histone H3(乙酰基K27)抗体-ChIP等级(ab4729),0.2µg/ml 2号和4号车道: 抗-Histone H3(乙酰基K27)抗体-ChIP等级(ab4729),0.1µg/ml 1-2车道: 小牛胸腺组蛋白裂解物 3-4车道: 小牛胸腺组蛋白裂解物 人组蛋白H3(乙酰基K27)肽( ab24404型 )2µg 每车道1微克的裂解液/蛋白质。 次要 所有车道: 羊抗兔(HRP)1/2000稀释 预测的带宽大小: 15千Da 观察到的频带大小: 17千Da 为什么实际的频带大小与预测的不同? ab4729特异性识别catlf胸腺组蛋白裂解物中的乙酰基K27组蛋白H3,该组蛋白裂解液使用免疫肽特异性阻断 ab24404型 . -
抗-Histone H3(乙酰基K27)抗体-ChIP等级(ab4729)1µg/ml+HeLa(宫颈腺癌人上皮细胞系)组蛋白制剂,核裂解物-丁酸盐2.5µg处理 次要 山羊抗狂犬病IgG H&L(HRP)( ab97051型 )稀释度为1/10000 使用ECL技术开发。 在还原条件下进行。 预测的带宽大小: 15千Da 其他波段位于: 17千Da。 我们不确定这些额外波段的身份。 暴露时间: 10秒
数据表及文件
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文献 (1912)
Pihlajama P公司 等。 一种竞争性精密CRISPR方法,用于识别转录因子结合位点的适应度效应。 Nat生物技术 41:197-203 (2023). 公共医学:36163549 特伦佩诺ML 等。 组蛋白去甲基化酶KDM5C通过抑制二价标记的未成熟基因在AML中发挥肿瘤抑制作用。 白血病 37:593-605 (2023). 公共医学:36631623 阿马托里S 等。 小分子诱导的APL爆发的表观基因重编程导致抗病毒样反应和c-MYC下调。 癌症基因治疗 30:671-682(2023年)。 公共医学:36536122 裴勇俊 等。 表观遗传调节因子KDM4A激活Notch1-NICD-依赖性信号传导,以驱动乳腺癌的肿瘤发生和转移。 Transl Oncol公司 28:101615 (2023). 公共医学:36592610 史密斯C 等。 T细胞急性淋巴细胞白血病中TAL1激活:一种新的致癌3'新增强子。 血液学 108:1259-1271 (2023). 公共医学:36632736