概述
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产品名称 阿维丁/ 生物素 舞台调度 试剂盒 -
产品概述 当与基于生物素的IHC检测一起使用时(例如与ABC IHC探测试剂盒一起使用),亲和素-生物素阻断试剂盒ab64212阻断组织中内源性亲和素、生物素和生物素结合蛋白的信号。
使用试剂盒时,首先向样品中添加过量的抗生物素,以结合内源性生物素,然后用过量的生物素封闭该抗生物素。 过量的生物素和抗生物素被冲走。
该试剂盒通常用于含有高水平生物素的细胞和组织。 这可以通过用过氧化氢封闭切片,然后用链霉亲和素-HRP和DAB培养切片来指示; 棕色DAB染色显示内源性生物素。 肾脏、肝脏、脾脏尤其含有高水平的生物素。
该试剂盒以前称为内源性抗生物素/生物素封闭试剂盒。
适用于Avidin Biotin Blocking Kit ab64212的IHC协议: 对于冻结的部分,跳过步骤1和2
1.将福尔马林固定石蜡包埋组织切片脱蜡并重新水化。
2.使用适当的 抗原回收缓冲液或酶 (主要抗体依赖)治疗切片。 在缓冲液中清洗3次。
3.添加足够的 过氧化氢封闭溶液 覆盖这些部分。 培养10分钟。 在缓冲液中清洗2次。 如有必要,用亲和素块培养15分钟,清洗两次,用生物素块培养十五分钟,然后清洗两次来阻断内源性生物素。
4.应用 蛋白质块 (或 正常血清 与二级抗体来自同一物种),并在室温下培养5分钟以阻止非特异性背景染色。 在缓冲液中清洗一次。
5.在 抗体稀释剂 并孵化。
6.在缓冲液中清洗4次。 培养载玻片 生物素化二级抗体 (或 HRP聚合物二级抗体 并跳过步骤7)。 在缓冲液中清洗4次。
7.申请 链霉亲和素HRP 并在室温下孵育10分钟。
8.在缓冲液中冲洗4次。 放入幻灯片 DAB基板 或 AEC基板 并孵育直到获得所需的颜色(1-10分钟)。 在缓冲液中冲洗4次。
9.添加足够的 苏木精 覆盖该部分。 培养1分钟。
10.在自来水中冲洗7-8次。 添加 安装介质 覆盖该部分。
查找完整的IHC试剂盒,以及用于抗原检索、阻断、信号放大、可视化、反染色和安装的试剂 IHC试剂盒和试剂指南 . -
经测试应用
性能
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存放说明 储存于+4°C。 请参阅协议。 -
组件 15毫升 Avidin区块 1 x 15毫升 生物素块 1 x 15毫升 -
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相关性 一些细胞和组织,如肾脏、肝脏和脾脏,含有内源性生物素。 使用亲和素-生物素染色方法可能导致高非特异性背景染色。 通过在生物素化抗体孵育之前使用亲和素/生物素阻断试剂对细胞/组织进行预处理,可以显著降低这种非特异性背景。
应用
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图片
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显示T细胞浸润的显微图淋巴结样本中T细胞浸润的多光谱、多色免疫荧光:dMMR肿瘤。 (放大200倍)。 3-?上的多重顺序IF染色? m个FFPE组织切片; 在使用生物素结合Foxp3抗体之前,用亲和素/生物素封闭试剂盒(ab64212)处理组织切片。 其他抗体与荧光色素结合。 CD4:红色,CD8:绿色,CD4/Foxp3:瓷砖,CD8蓝色,EPCAM:黄色 -
小鼠骨组织切片HTRA1免疫组化染色。 对组织切片进行脱蜡、复水,并使用内源性亲和素/生物素封闭试剂盒(ab64212)进行处理,3%H 2 O(运行) 2 和正常猪血清。 然后将组织切片与多克隆抗HTRA1抗体在37°C下孵育1小时。 PBS清洗后,将组织切片与生物素化猪抗兔IgG在37°C下孵育45分钟,清洗后再孵育30分钟。 含Vectastin。 使用DAB制作切片,并使用Harris改良苏木精进行复染。
数据表及文件
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SDS下载 -
数据表下载
文献 (32)
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