主要功能和细节
灵敏度:2.6 pg/ml 范围:3.5 pg/ml-3600 pg/ml 样品类型:细胞培养上清液、Cit血浆、EDTA血浆、Hep血浆、血清 检测方法:荧光法 分析类型:三明治(定量) 反应对象:人类
概述
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产品名称 -
检测方法 荧光 -
精确度 刺突蛋白 样品 n个 平均值 标准偏差 变异系数% 媒体 8 4.8% 批次间 产品 n个 平均值 标准偏差 变异系数% 媒体 三 5.6% -
样品类型 细胞培养上清液、血清、Hep血浆、EDTA血浆、Cit血浆 -
检测类型 三明治(定量) -
灵敏度
2.6微微克/毫升 -
范围 3.5微微克/毫升- 3600微微克/毫升 -
回收率 特定样本回收率 样品类型 平均百分比 范围 细胞培养上清液 98 96% - 100% 血清 103 101% - 105% Hep血浆 100 99% - 101% EDTA血浆 93 90% - 96% Cit血浆 86 84% - 88% -
检测时间 2小时 00米 -
实验步骤 一步分析法 -
种属反应性 与反应: 人类 不与反应: 奶牛 -
生产商 白细胞介素1β 在体外 CatchPoint(捕获点) ® ELISA试剂盒用于定量测定人血清、血浆和细胞培养上清液中的IL-1β蛋白。
此CatchPoint ELISA试剂盒 针对分子器件微板阅读器进行了优化 。单击 在这里 以获取推荐的Microplate Reader列表。 如果使用SoftMax®Pro软件支持的Molecular Devices平板读取器,这些CatchPoint ELISA试剂盒的预配置协议可用于以下位置的所有协议和分析设置 网址:www.softmaxpro.org .
捕捉点 ® ELISA采用亲和标记捕获抗体和报告结合检测器抗体,免疫捕获溶液中的样品分析物。 整个复合物(捕获抗体/分析物/检测器抗体)依次通过包被微孔的抗抗原抗体的免疫亲和力固定。 为了进行分析,将样品或标准品添加到微孔中,然后添加抗体混合物。 孵育后,清洗微孔以去除未结合的物质。 添加了含有Stoplight红色基底的CatchPoint HRP开发溶液。 在培养过程中,底物被HRP催化生成荧光产物。 信号与结合分析物的量成比例生成,并在530/570/590 nm激发/截止/发射下在荧光板阅读器中测量强度。 -
说明 白细胞介素1β(IL-1β)由活化的巨噬细胞产生,通过诱导IL-2释放、B细胞成熟和增殖以及成纤维细胞生长因子活性刺激胸腺细胞增殖。 IL-1蛋白参与炎症反应,被确定为内源性热原,据报道可刺激滑膜细胞释放前列腺素和胶原酶。 -
平台 预涂层微孔板(12 x 8孔板条)
性能
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存放说明 储存温度为+4°C。 请参阅协议。 -
年 1 x 96测试 100X停车灯红色基板 1 x 120微升 10X人IL-1β捕获抗体 1 x 600µl 10X人IL-1β检测抗体 1 x 600微升 10X清洗缓冲液PT(ab206977) 1 x 20毫升 500X过氧化氢(H2O2,3%) 1 x 50微升 抗体稀释液4BI 1 x 6毫升 人IL-1β冻干重组蛋白(ab9617) 2瓶 平板密封件 1台 样品稀释剂NS(ab193972) 1 x 50毫升 单步预涂黑色96孔微孔板 1台 刹车灯红色基板缓冲器 1 x 12毫升 -
研究领域 -
功能 有效的促炎细胞因子。 最初发现作为主要内源性热原,可诱导前列腺素合成、中性粒细胞内流和活化、T细胞活化和细胞因子生成、B细胞活化和抗体生成、成纤维细胞增殖和胶原生成。 促进T细胞的Th17分化。 -
组织特异性 在激活的单核细胞/巨噬细胞中表达(蛋白质水平)。 -
序列相似性 属于IL-1家族。 -
翻译后修饰 IL1B前体的激活涉及CASP1催化的蛋白水解裂解。 加工和分泌暂时相关。 -
细胞定位 细胞质,胞浆。 溶酶体。 秘密的外泌体。 细胞质小泡,自噬体。 保密。 前体是胞质的。 响应炎症小体激活信号,如NLRP3炎症小体的ATP或NLRC4炎症小体的细菌鞭毛蛋白,裂解并分泌。 IL1B缺乏任何已知的信号序列,其分泌途径尚不完全清楚(PubMed:24201029)。 根据实验结果,提出了几种非常规分泌机制。 1.通过分泌性溶酶体分泌:CASP1和IL1B前体的一部分可能通过一种尚未明确的机制并入分泌性溶菌体,该溶酶体经历钙(2+)依赖性胞吐,释放成熟IL1B(PubMed:15192144)。 2.分泌性自噬:含有IL1B的自噬体可能与内切体或多泡体(MVB)融合,然后与释放可溶性IL1B或含IL1B外切体的质膜融合(PubMed:24201029)。 然而,自噬在多个水平上影响IL1B的产生,其在分泌中的作用仍有争议。 3.通过外泌体分泌:P2RX7的ATP激活导致包含外泌物的MVB与IL1B、CASP1和其他炎性体成分包裹在一起。 这些MVB随着外泌体的释放而发生胞吐。 可溶性IL1B的释放发生在外体膜的裂解之后(根据相似性)。 4.微泡脱落分泌:ATP受体P2RX7的激活可诱导含有IL1B和可能的炎性体成分的膜源性微泡立即脱落。 微泡溶解后,细胞因子在细胞外室释放(PubMed:11728343)。 5.通过透性质膜转位释放。 这可能发生在因炎症小体持续激活而发生细胞凋亡的细胞中(通过相似性)。 这些机制可能并不相互排斥。 -
UniProt提供的信息 -
别名 分解蛋白 H1型 干扰素β诱导因子
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数据库链接
图片
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如第10节所述,制备IL-1β标准曲线。 绘制背景减去数据值(平均值+/-SD)。 -
重复测量IL-1β的浓度,根据IL-1β标准曲线进行插值,并针对样品稀释进行校正。 未稀释样品如下:PBMC上清液50%和100%THP-1上清液。 绘制插值稀释因子校正值(平均值+/-SD,n=2)。 PBMC上清中IL-1β的平均浓度为1301 pg/mL,THP-1上清中为734 pg/mL。 -
绘制插值值(平均值+/-SD,n=2)。 在2份供体血清样本(30 pg/mL和140 pg/mL)中测量IL-1β,其余8份样本的测量值低于IL-1β标准曲线的最低点。 -
48小时后收集条件培养基。 在50%未刺激和PHA刺激的PBMC上清液中测量IL-1β。 IL-1β浓度测量一式两份,根据IL-1β标准曲线进行插值,并针对样品稀释进行校正。 绘制插值稀释因子校正值(平均值+/-SD,n=2)。 PHA刺激的PBMC上清液中IL-1β的平均浓度为1273 pg/mL。 在未刺激的上清液中没有检测到信号。 -
48小时后收集条件培养基。 在100%未刺激和LPS刺激的THP-1上清液中测量IL-1β。 重复测量IL-1β的浓度,并根据IL-1β标准曲线进行插值。 绘制插值(平均值+/-SD,n=2)。 LPS刺激的THP-1上清液中IL-1β的平均浓度为718 pg/mL。 在未刺激的上清液中没有检测到信号。 -
根据标准曲线插值人IL-1β浓度。 细胞培养样本的上清液被连续稀释,并使用人IL-1βELISA试剂盒(ab229384)进行评估。 野生型和IL-1β敲除THP-1细胞( 约273762 )两次评估(n=2)。 用LPS(100 ng/ml,3 h)和ATP(5 mM,45 min)处理细胞以诱导IL-1β的表达或不处理。 数据表示为平均值,误差条表示标准偏差。
实验方案
数据表及文件
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SDS下载 -
数据表下载
文献 (6)
Yang N和Shang Y 铁抑素-1和3-甲基腺嘌呤改善卵巢癌诱导的哮喘模型和IL-13激发的BEAS-2B细胞中的铁下垂。 氧化介质细胞Longev 2022:9657933 (2022). 公共医学:35154576 张S 等人。 Vitronectin是一种新的尿蛋白组生物标记物,可促进幼年系统性红斑狼疮的细胞下垂。 调解人炎症 2022:8447675 (2022). 公共医学:35462789 Karan KR公司 等人。 线粒体DNA缺陷成人患者的白细胞细胞因子反应。 《分子医学杂志》(柏林) 100:963-971 (2022). 公共医学:35635577 Phie J公司 等人。 秋水仙碱不能减少小鼠模型腹主动脉瘤的生长。 心血管治疗 2022:5299370 (2022). 公共医学:36262119 Shi Y&Yin总部 衣康酸二甲酯通过激活肺表面活性物质蛋白A和D抑制LPS诱导的肺泡II型上皮和支气管上皮细胞的炎症释放和凋亡。 过敏原免疫病理学(Madr) 50:176-186 (2022). 公共医学:36335462 你L 等人。 抑制HMGB1/RAGE轴可抑制脂多糖(LPS)诱导的宫颈上皮细胞恶性转化。 生物工程 12:4995-5003 (2021). 公共医学:34369271