概述
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产品名称 人 ANXA6(Annexin-6)敲除HeLa细胞株 -
亲代细胞系 赫拉 -
有机体 人类 -
突变描述 利用CRISPR/Cas9实现基因敲除,外显子7中插入1 bp,第7外显子中缺失5 bp -
通道编号 <20 -
淘汰验证 Sanger测序,Western Blot(WB) -
经测试应用 -
生物安全水平 2 -
规则说明 建议控制: 人野生型HeLa细胞系( 约255928 )。 请注意,剔除细胞株订单中不会自动包含野生型细胞株,如果需要,请使用代码WILDTYPE-TMTK1免费添加推荐的野生型细胞系。 低温保存细胞培养基: 细胞冷冻介质-DMSO无血清培养基,在补充甲基纤维素的MEM中含有8.7%的DMSO。 培养基: DMEM(高糖)+10%FBS 初始处理指南: 到达后,小瓶应储存在液氮气相中,而不是-80°C。 在-80°C下储存可能会导致生存能力丧失。 1.将小瓶在37°C水浴中解冻约1-2分钟。 2.将细胞悬液(0.8 mL)转移到含有8.4 mL预热培养基的15 mL/50 mL锥形无菌聚丙烯离心管中,用额外的0.8 mL培养基(总体积10 mL)清洗小瓶以收集剩余细胞,并在室温下以201 x g(rcf)离心5分钟。 10 mL代表建议的最小稀释度。 20 mL代表建议的最大稀释度。 3.将细胞颗粒重新悬浮在5 mL预热培养基中,并使用血细胞仪或其他细胞计数方法进行计数。 根据细胞计数,将种子细胞置于密度为2x10的适当细胞培养瓶中 4 细胞/厘米 2 。播种密度仅供参考,应根据各个实验室的时间表进行调整。 4.在37°C培养箱中用5%CO培养 2 。应每天监测培养物。 亚文化指南: 所有播种密度应基于通过既定方法获得的细胞数。 引导播种密度为2x10 4 细胞/厘米 2 建议使用。 如果需要,在继代培养前24小时部分更换培养基可能有助于促进生长。 当细胞达到80-90%的汇合时,应进行传代。
本产品受The Broad Institute、ERS Genomics limited和Sigma-Aldrich Co.LLC的有限使用许可,并采用专利技术开发。 有关许可证和专利的详细信息,请参阅我们的 有限使用许可证 和 专利页 . 我们将提供复苏时增殖的活细胞。
性能
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单元格数量 1 x 10 6 细胞/小瓶,1 mL -
粘附/悬浮 粘附剂 -
组织 子宫颈 -
单元格类型 上皮的 -
疾病 腺癌 -
性别 女性 -
STR分析 釉原蛋白X D5S818:11、12 D13S317:12、13.3 D7S820:8、12 D16S539:9、10 vWA:16、18 TH01:7型 TPOX:8、12 CSF1PO:9、10 -
抗生素耐药性 嘌呤霉素1.00µg/ml -
无支原体 是的 -
存放说明 采用干冰运输。 储存在液氮中。 -
存储溶液 成分:8.7%二甲基亚砜、2%纤维素、甲醚 -
研究领域
靶标
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功能 可能与CD21相关。 可能调节细胞内储存的Ca(2+)的释放。 -
序列相似性 属于annexin家族。 含有8个膜联蛋白重复序列。 -
结构域 一对膜联蛋白重复序列可能形成钙和磷脂的一个结合位点。 -
翻译后修饰 响应生长因子刺激而磷酸化。 -
细胞定位 细胞质。 褪黑激素组。 通过质谱鉴定第一阶段至第四阶段的黑素体组分。 -
UniProt提供的信息
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KO细胞裂解物 -
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应用
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图片
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所有车道: 抗Annexin-6/ANXA6抗体[EPR17308]-N末端( 公元199422年 )稀释度为1/1000 车道1: 野生型HeLa细胞裂解物 车道2: ANXA6敲除HeLa细胞裂解物 3号车道: Jurkat细胞裂解物 车道4: Raji细胞裂解物 每车道20µg的裂解液/蛋白质。 在还原条件下进行。 预测的带宽大小: 76千帕 观察到的频带大小: 75千帕 为什么实际的频带大小与预测的不同? 1-4车道: 合并信号(红色和绿色)。 绿色- 公元199422年 在75 kDa时观察到。 红色-加载控制 约8245 (小鼠抗GAPDH抗体[6C5])。 公元199422年 western blot显示与野生型HeLa细胞中的Annexin-6/ANXA6反应,在ANXA6敲除细胞系ab265677(ANXA6基因敲除细胞裂解物 ab257351型 )。 对野生型和ANXA6敲除HeLa细胞裂解物进行SDS-PAGE分析。 TBS-T(0.1%吐温)中3%牛奶中的膜被堵塞 ® )在与孵育之前 公元199422年 和 约8245 (小鼠抗GAPDH抗体[6C5])在4°C下过夜,稀释率分别为1/1000和1/20000。 印迹与山羊抗兔IgG H&L(IRDye)孵育 ® 800CW)预吸收床( ab216773号 )和山羊抗鼠IgG H&L(IRDye ® 680RD)预吸收床( 约216776 )二级抗体在成像前在室温下以1:20000稀释1小时。 -
所有车道: 抗Annexin-6/ANXA6抗体[EPR19517]( ab201023年 )稀释度为1/1000 车道1: 野生型HeLa细胞裂解物 车道2: ANXA6敲除HeLa细胞裂解物 3号车道: Jurkat细胞裂解物 车道4: Raji细胞裂解物 每车道20µg的裂解液/蛋白质。 次要 所有车道: 山羊抗兔IgG H&L(IRDye®800CW)预吸附( ab216773号 )稀释度为1/10000 预测的带宽大小: 76千帕 观察到的频带大小: 75千帕 为什么实际的频带大小与预测的不同? 1-4车道: 合并信号(红色和绿色)。 绿色- ab201023年 在75 kDa时观察到。 红色-加载控制 约8245 在36 kDa时观察到。 ab201023年 在野生型HeLa细胞中,抗Annexin-6/ANXA6抗体[EPR19536]与6/ANXA6]特异性反应。 敲除细胞系ab265677(敲除细胞裂解物 ab257351型 )已使用。 对野生型和6/ANXA6基因敲除样品进行SDS-PAGE分析。 ab201023年 和抗-GAPDH抗体[6C5]-负荷控制( 约8245 )在室温下孵育2。 5小时,分别为1000倍和20000倍稀释液中的1倍。 用山羊抗兔IgG H&L(IRDye ® 800CW)预吸附床( ab216773号 )和山羊抗鼠IgG H&L(IRDye ® 680RD)预吸附床( 约216776 )二级抗体在成像前在室温下以1:20000稀释1小时。 -
所有车道: 抗Annexin-6/ANXA6抗体[EPR19536]( ab201024年 )稀释度为1/1000 车道1: 野生型HeLa细胞裂解物 车道2: ANXA6敲除HeLa细胞裂解物 3号车道: Jurkat细胞裂解物 车道4: Raji细胞裂解物 每车道20µg的裂解液/蛋白质。 次要 所有车道: 山羊抗兔IgG H&L(IRDye®800CW)预吸附( ab216773号 )稀释度为1/10000 预测的带宽大小: 76千帕 观察到的频带大小: 75千帕 为什么实际的频带大小与预测的不同? 1-4车道: 合并信号(红色和绿色)。 绿色- ab201024年 在75 kDa时观察到。 红色-加载控制 约8245 在36 kDa时观察到。 ab201024年 在野生型HeLa细胞中,抗Annexin-6/ANXA6抗体[EPR19536]显示与Annexin 6/ANXA6]特异性反应。 敲除细胞系ab265677(敲除细胞裂解物 ab257351型 )已使用。 对野生型和Annexin-6/ANXA6敲除样品进行SDS-PAGE分析。 ab201024年 和抗-GAPDH抗体[6C5]-负荷控制( 约8245 )在室温下孵育2。 5小时,分别为1000倍和20000倍稀释液中的1倍。 用山羊抗兔IgG H&L(IRDye ® 800CW)预吸附床( ab216773号 )和山羊抗鼠IgG H&L(IRDye ® 680RD)预吸附床( 约216776 )二级抗体在成像前在室温下以1:20000稀释1小时。 -
等位基因1:第7外显子5 bp缺失。 -
等位基因-2:1个碱基插入外显子7。
数据表及文件
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SDS下载 -
数据表下载