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拉布MAb是 阿布卡姆针对高特异性、高灵敏度单克隆抗体开发的专利技术。
需求
兔免疫系统非常复杂,拥有基因转换和体细胞高频突变两种机制,可产生高灵敏度的抗体。另外,兔免疫系统具有出色的抗原识别能力,因此可以产生小鼠难以产生的抗体(1,2)。
人们早在 20年前就已对兔单克隆抗体有着极高的需求,因为多克隆抗体在信号质量上有着明显的缺点(即非特异性和高背景)。而单克隆抗体可提供独一无二的抗原表位识别能力和批次间一致性,且可持续性供应。
“随着科学界和医疗行业对更高灵敏度和更高特异性抗体的需求日益增长,兔单克隆抗体成为了解决问题的关键。”
-朱伟民,Abcam RabMAb®技术人员
尝试
将骨髓瘤细胞与小鼠脾脏细胞相融合的小鼠杂交瘤技术被开发出来后,人们为生成兔单克隆抗体进行了许多尝试 (三)。
人们的首次尝试是针对小鼠-兔杂交瘤,由于此类杂交瘤难以克隆、不稳定且生产源有限,因此效果不甚理想。 (4).
1995年,芝加哥洛约拉大学的 凯瑟琳·奈特及其同事成功培育出可过度表达致癌基因 v-abl型和 c-myc公司的双转基因兔,兔体内会形成与骨髓瘤类似的肿瘤,并且该过程顺利分离出浆细胞瘤细胞系(称为 240E-1)使之成为产生兔单克隆抗体的首个融合伴侣细胞。
240E-1型细胞与兔淋巴细胞的融合产生的杂交瘤会以一致的方式分泌兔单克隆抗体,但是融合伴侣细胞的稳定性还是问题 (5)。
突破
1996年,加州大学旧金山分校的 朱伟民和 罗伯特·佩特拉 从 骑士博士的实验室获得了 240E-1中并进一步发展了这项技术 (6)。
研究人员对 240E-1型细胞进行反复亚克隆和筛选,以改良融合细胞系的特征。选择标准包括融合效率、生长和形态特征。对选定的亚克隆作进一步分析,以确保它们能产生稳定的杂交瘤并高效分泌单克隆抗体。经过多轮筛选后,终于获得了一种融合效率和稳定性更加出色姓名240东-西
阿布卡姆对细胞系 240E-W(东至西)作了进一步优化,以解决内源性 免疫球蛋白G问题。自 2006最新消息(240E-W2,拉布专利技术的核心部分)已在研究和商业应用中被用来产生兔单克隆抗体。
现在
拉布MAb技术能够为研究、诊断和治疗应用开发出高质量的单克隆抗体。过去 16年的历程已经证明,拉布MAb技术是能够充分满足科学界各种需求的优质技术。
阿布卡姆除了提供14,000 多种一流的 拉布MAb产品之外,还基于定制模式,利用强大的 拉布MAb技术为客户制备高灵敏度和高特异性的抗体。
参考文献
1.Krause RM,同质抗体群体的实验方法:因素控制具有统一属性的抗体的出现。美联储程序。1970;29:59-65.
· 2Weller A,Meek J,Adamson ED.单克隆抗体和小鼠表皮生长因子受体的多克隆抗体:证据用于胚胎癌细胞中隐匿的EGF受体。发展。1987;100:351-363.
· 三。Raybould TJ,Takahashi M.稳定兔-鼠杂交瘤的产生分泌具有特定特异性的兔mAb。科学。1988;240:1788-1790.
· 4Verbanac KM、Gross UM、Rebellato LM等。稳定兔舍的生产异种杂交瘤:一种识别a的兔单克隆抗体的特性180kDa人淋巴细胞膜抗原。杂交瘤。1993;12:285-295.
· 5Spieker-Polet H、Sethupathi P、Yam PC等兔单克隆抗体抗体:产生融合伙伴以产生兔兔杂交瘤。程序美国国家科学院,1995年;92:9348-9352.
· 6Liguori MJ、Hoff-Velk JA、Ostrow DH。重组人白细胞介素-6增强兔兔杂交瘤的免疫球蛋白分泌。杂交瘤。2001年6月;20(3):189-98.