主要功能和细节
小鼠单克隆[RL90]到P4HB 适用于:ELISA、抑制试验、IHC-Fr、IHC-P、WB、IP、流式细胞仪、ICC/IF、电子显微镜 反应对象:老鼠、老鼠、仓鼠、狗、人、猪、猴子、非洲绿猴 同位素:IgG2a
选择批间可重复性更高的重组抗体
研究可靠 —— 各批次间结果一致且可重复 长期批量供应 —— 采用重组技术,可实现快速生产 首次实验即可成功 —— 经过大量验证确认了特异性 符合伦理标准 —— 产品不含动物成分
概述
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产品名称 -
描述 小鼠单克隆抗体 [RL90]至P4HB -
宿主 鼠标 -
试验 -
种属反应性 与反应: 老鼠,大鼠,仓鼠,狗,人,猪,猴子,非洲绿猴 预测可用于: 黑腹果蝇 -
免疫原 与大鼠P4HB相对应的全长天然蛋白(纯化)。 纯化大鼠PDIA1/P4HB蛋白。 数据库链接: P04785号 -
阳性对照 WB:HeLa、A-431、NIH/3T3、A-375、Hep G2、HL-60和PC-12。 ICC/IF:HeLa、A-431、MCF7、A549和U2OS细胞
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常规说明 多年来,生命科学行业一直面临着再现性危机。 Abcam正在通过我们的一系列重组单克隆抗体和用于金标准验证的敲除编辑细胞系引领解决这一问题。 购买前请检查此产品是否满足您的需求。 如果您有任何问题、特殊要求或疑虑,请在购买之前向我们发送查询和/或联系我们的支持团队。 以下是本产品的推荐替代品,以及出版物、客户评论和问答
性能
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中国 液体 -
存放说明 在4°C下装运。 短期储存在+4°C下(1-2周)。 交付时,等分。 储存于-20°C或-80°C。 避免冷冻/解冻循环。 -
存储溶液 防腐剂:0.05%叠氮化钠 成分:0.1%BSA,PBS -
正在加载浓度信息。。。 -
纯度 纯化蛋白A -
克隆 单克隆 -
协调 RL90型 -
同种型 IgG2a -
研究领域
相关产品
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检测试剂盒 -
兼容的辅助设备 -
共轭试剂盒 -
同位素控制 -
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应用
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靶标
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功能 这种多功能蛋白质催化二硫键的形成、断裂和重排。 在细胞表面,似乎起着还原酶的作用,分解附着在细胞上的蛋白质的二硫键。 因此可能会导致面部外蛋白的结构改变。 在细胞内,似乎形成/重排新生蛋白质的二硫键。 在高浓度下,作为伴侣发挥作用,抑制错误折叠蛋白质的聚集。 在低浓度下,促进聚集(抗伴侣活性)。 可能与其他伴侣参与激素生物发生中TG前体的结构修饰。 还充当各种酶的结构亚单位,如脯氨酰4-羟化酶和微粒体三酰甘油转移蛋白MTTP。 -
序列相似性 属于蛋白质二硫键异构酶家族。 包含2个硫氧还蛋白结构域。 -
细胞定位 内质网腔。 褪黑激素组。 细胞膜。 非常丰富。 在某些细胞类型中,似乎也分泌或与质膜相关,在质膜中,它不断从细胞内来源脱落和替换(可能)。 位于淋巴细胞表面CD4富集区附近。 通过质谱鉴定第一阶段至第四阶段的黑素体组分。 -
UniProt提供的信息 -
数据库链接 Entrez基因: 483369 狗 Entrez基因: 39651 黑腹果蝇 Entrez基因: 5034 人类 Entrez基因: 18453 鼠标 Entrez基因: 110255932 清管器 Entrez基因: 25506 老鼠 Omim公司: 176790 人类 瑞士保护银行: 第54399页 黑腹果蝇
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别名 细胞甲状腺激素结合蛋白抗体 细胞甲状腺激素结合蛋白抗体 胶原蛋白脯氨酰4羟化酶β抗体
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图片
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ab2792染色野生型A431细胞中的P4HB(顶部面板)和P4HB敲除A431细胞(底部面板)。 细胞用100%甲醇固定(5分钟),用0.1%PBS-Triton X-100渗透5分钟,然后用1%BSA/10%正常山羊血清/0.3M甘氨酸在0.1%PBS吐温中封闭1小时。 然后在4°C下用1µg/ml的ab2792培养细胞过夜 约6046 ,兔多克隆到β-管蛋白-负载控制。 然后将细胞与 第150117页 小鼠IgG H&L(Alexa Fluor)山羊多克隆二级抗体 ® 488)以1/1000稀释度预吸附(以绿色显示)和 约150084 、山羊抗狂犬病IgG H&L(Alexa Fluor ® 594)以1/1000稀释度预吸附(以伪红色显示)。 用DAPI标记细胞核DNA(以蓝色显示)。 也适用于用4%多聚甲醛固定的细胞(10分钟)。 使用高含量分析仪(Operetta CLS、Perkin Elmer)采集图像,并显示共焦截面的最大强度投影。 -
所有车道: 1/2000稀释度的抗-P4HB抗体[RL90](ab2792) 车道1: HeLa(人宫颈腺癌上皮细胞系)全细胞裂解物 车道2: A431(人表皮样癌细胞系)全细胞裂解物 3号车道: NIH/3T3(小鼠胚胎成纤维细胞系)全细胞裂解物 车道4: A-375(人恶性黑色素瘤细胞系)全细胞裂解物 车道5: HepG2(人肝癌细胞系)全细胞裂解物 车道6: HL-60(人早幼粒细胞白血病细胞系)全细胞裂解物 7号车道: PC-12(大鼠肾上腺嗜铬细胞瘤细胞系)全细胞裂解物 每车道30µg的裂解液/蛋白质。 次要 所有车道: 羊抗鼠IgG H+L(HRP)1/4000稀释 预测的带宽大小: 58千Da 观察到的频带大小: 57千帕 为什么实际的频带大小与预测的不同? -
ab2792染色MCF7细胞中的P4HB。 细胞用100%甲醇固定(5分钟),用0.1%PBS-Triton X-100渗透5分钟,然后用1%BSA/10%正常山羊血清/0.3M甘氨酸在0.1%PBS吐温中封闭1小时。 然后在4°C下用1µg/ml的ab2792培养细胞过夜 约6046 ,兔多克隆到β-管蛋白-负载控制。 然后将细胞与 第150117页 小鼠IgG H&L(Alexa Fluor)山羊多克隆二级抗体 ® 488)以1/1000稀释度预吸附(以绿色显示)和 约150084 、山羊抗狂犬病IgG H&L(Alexa Fluor ® 594)以1/1000稀释度预吸附(以伪红色显示)。 用DAPI标记细胞核DNA(以蓝色显示)。 也适用于用4%多聚甲醛固定的细胞(10分钟)。 使用高含量分析仪(Operetta CLS、Perkin Elmer)采集图像,并显示共焦截面的最大强度投影。 -
ab2792染色HeLa细胞中的P4HB。 用4%多聚甲醛固定细胞(10分钟),用0.1%PBS-Triton X-100渗透5分钟,然后用1%牛血清/10%正常山羊血清/0.3M甘氨酸在0.1%PBS吐温中封闭1小时。 然后在4°C下用0.2µg/ml的ab2792培养细胞过夜 约6046 ,兔多克隆到β-管蛋白-负载控制。 然后将细胞与 第150117页 小鼠IgG H&L(Alexa Fluor)山羊多克隆二级抗体 ® 488)以1/1000稀释度预吸附(以绿色显示)和 ab150084年 、山羊抗狂犬病IgG H&L(Alexa Fluor ® 594)以1/1000稀释度预吸附(以伪红色显示)。 用DAPI标记细胞核DNA(以蓝色显示)。 也适用于用100%甲醇固定的电池(5分钟)。 使用高含量分析仪(Operetta CLS、Perkin Elmer)采集图像,并显示共焦截面的最大强度投影。 -
ab2792染色A549细胞中的P4HB。 用4%多聚甲醛固定细胞(10分钟),用0.1%PBS-Triton X-100渗透5分钟,然后用1%牛血清/10%正常山羊血清/0.3M甘氨酸在0.1%PBS吐温中封闭1小时。 然后在4°C下用0.2µg/ml的ab2792培养细胞过夜 约6046 ,兔多克隆到β-管蛋白-负载控制。 然后将细胞与 第150117页 小鼠IgG H&L(Alexa Fluor)山羊多克隆二级抗体 ® 488)以1/1000稀释度预吸附(以绿色显示)和 约150084 、山羊抗狂犬病IgG H&L(Alexa Fluor ® 594)以1/1000稀释度预吸附(以伪红色显示)。 用DAPI标记细胞核DNA(以蓝色显示)。 也适用于用100%甲醇固定的电池(5分钟)。 使用高含量分析仪(Operetta CLS、Perkin Elmer)采集图像,并显示共焦截面的最大强度投影。 -
ab2792染色U2OS细胞中的P4HB。 细胞用100%甲醇固定(5分钟),用0.1%PBS-Triton X-100渗透5分钟,然后用1%BSA/10%正常山羊血清/0.3M甘氨酸在0.1%PBS吐温中封闭1小时。 然后在4°C下用0.2µg/ml的ab2792培养细胞过夜 约6046 ,兔多克隆到β-管蛋白-负载控制。 然后将细胞与 第150117页 小鼠IgG H&L(Alexa Fluor)山羊多克隆二级抗体 ® 488)以1/1000稀释度预吸附(以绿色显示)和 ab150084年 、山羊抗狂犬病IgG H&L(Alexa Fluor ® 594)以1/1000稀释度预吸附(以伪红色显示)。 用DAPI标记细胞核DNA(以蓝色显示)。 也适用于用4%多聚甲醛固定的细胞(10分钟)。 使用高含量分析仪(Operetta CLS、Perkin Elmer)采集图像,并显示共焦截面的最大强度投影。 -
对脱蜡人结肠组织的正常和癌症活检进行免疫组织化学。 为了暴露目标蛋白,使用10mM柠檬酸钠(pH6.0)缓冲液微波加热8-15分钟进行热诱导抗原回收。 在室温下,用3%BSA-PBS封闭抗原回收组织30分钟。 然后用识别P4HB(PDIA1)ab2792的小鼠单克隆抗体或不带初级抗体(阴性对照)的小鼠单抗在4°C的加湿室中隔夜以1:200的稀释度对组织进行检测。 用PBST广泛清洗组织,用过氧化物酶抑制剂抑制内源性过氧化物酶活性。 使用生物素结合二级抗体和SA-HRP进行检测,然后使用DAB进行比色检测。 用苏木精对组织进行复染,并准备贴装。 -
通过将25 ug HepG2(1巷)Hela(2巷)和NIH-3T3(3巷)细胞裂解物加载到SDS聚丙烯酰胺凝胶上,对P4HB(PDIA1)进行蛋白质印迹分析。 将蛋白质转移到PVDF膜上,并在4°C下隔夜封闭。 用ab2792在4°C、1:1000的温度下隔夜探测膜,并在TBST中清洗。然后用HRP结合二级抗体在室温下黑暗中探测膜1小时。使用ECL Plus Western Blotting底物进行化学发光检测。 结果显示约57kDa的带。 -
1/2000稀释度的抗-P4HB抗体[RL90](ab2792) 次要 1/10000稀释度的驴抗鼠IgG2a 使用ECL技术开发。 在还原条件下进行。 预测的带宽大小: 58千Da 观察到的频带大小: 57千帕 为什么实际的频带大小与预测的不同? 暴露时间: 20秒
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1/1000稀释的抗-P4HB抗体[RL90](ab2792)+20000细胞的HT1080全细胞裂解液 次要 HRP-结合羊抗鼠IgG 1/5000稀释 使用ECL技术开发。 在还原条件下进行。 预测的带宽大小: 58千Da 观察到的频带大小: 57千帕 为什么实际的频带大小与预测的不同? 暴露时间: 20秒 10%SDS-PAGE。 在22°C下用5%的牛奶封闭1小时。 在4°C的PBS+2.5%牛奶+0.05%吐温20中与原液培养16小时。 -
NIH 3T3细胞中P4HB(PDIA1)(绿色)的免疫细胞化学/免疫荧光分析。 将福尔马林固定的细胞在室温下用0.1%Triton X-100在PBS中透化10分钟,并在室温下用2%BSA在PBS+0.1%Triton X-100中封闭30分钟。 在室温下用ab2792(1:75)探测细胞至少1小时,并在室温下与Dylight 488山羊抗鼠IgG二级抗体(1:250)孵育30分钟。 肌动蛋白用1:120稀释度的Dylight 350 Phalloidin染色(2.5单位/ml最终浓度),细胞核(红色)用1ug/ml浓度的DRAQ5染色30分钟。 图像是在20倍放大率下拍摄的。 -
对脱蜡人扁桃体组织的正常组织和癌组织进行免疫组织化学检查。 为了暴露目标蛋白,使用10mM柠檬酸钠(pH6.0)缓冲液微波加热8-15分钟进行热诱导抗原回收。 在室温下,用3%BSA-PBS封闭抗原回收组织30分钟。 然后用识别P4HB(PDIA1)ab2792的小鼠单克隆抗体或不带初级抗体(阴性对照)的小鼠单抗在4°C的加湿室中隔夜以1:200的稀释度对组织进行检测。 用PBST广泛清洗组织,用过氧化物酶抑制剂抑制内源性过氧化物酶活性。 使用生物素结合二级抗体和SA-HRP进行检测,然后使用DAB进行比色检测。 用苏木精对组织进行复染,并准备贴装。 -
对脱蜡人肺腺癌组织的正常和癌症活检进行免疫组化。 为了暴露目标蛋白,使用10mM柠檬酸钠(pH6.0)缓冲液微波加热8-15分钟进行热诱导抗原回收。 在室温下,用3%BSA-PBS封闭抗原回收组织30分钟。 然后用识别P4HB(PDIA1)ab2792的小鼠单克隆抗体或不带初级抗体(阴性对照)的小鼠单抗在4°C的加湿室中隔夜以1:200的稀释度对组织进行检测。 用PBST广泛清洗组织,用过氧化物酶抑制剂抑制内源性过氧化物酶活性。 使用生物素结合二级抗体和SA-HRP进行检测,然后使用DAB进行比色检测。 用苏木精对组织进行复染,并准备贴装。 -
对P4HB(PDIA1)的流式细胞术分析显示,与同型对照组相比,K562细胞的膜和细胞质呈阳性染色(蓝色)。 收集细胞并调节至1-5x10^6个细胞/ml的浓度。然后用2%多聚甲醛固定细胞并用PBS洗涤。用2%BSA-PBS溶液在室温下封闭细胞30分钟,并在室温下用ab2792在1 ug/试验下培养60分钟。 然后使用Dylight 488缀合的山羊抗小鼠IgG(H+L)二级抗体在室温下在黑暗中孵育细胞40分钟,并将其重新悬浮在PBS中用于FACS分析。 -
对P4HB(PDIA1)的流式细胞术分析显示,与同型对照组相比,NIH/3T3细胞的膜和细胞质呈阳性染色(蓝色)。 收集细胞并调节至1-5x10^6个细胞/ml的浓度。然后用2%多聚甲醛固定细胞并用PBS洗涤。用2%BSA-PBS溶液在室温下封闭细胞30分钟,并在室温下用ab2792在0.5 ug/test下培养60分钟。 然后使用Dylight 488-共轭山羊抗鼠IgG(H+L)二级抗体在室温下黑暗中培养细胞40分钟,并在PBS中重新悬浮以进行FACS分析。 -
P4HB(PDIA1)的流式细胞术分析显示,与同型对照组相比,Hela细胞的膜和细胞质呈阳性染色(蓝色)。 收集细胞并调节至1-5x10^6个细胞/ml的浓度。然后用2%多聚甲醛固定细胞并用PBS洗涤。用2%BSA-PBS溶液在室温下封闭细胞30分钟,并在室温下用ab2792在1 ug/试验下培养60分钟。 然后使用Dylight 488-共轭山羊抗鼠IgG(H+L)二级抗体在室温下黑暗中培养细胞40分钟,并在PBS中重新悬浮以进行FACS分析。
数据表及文件
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文献 (211)
关L 等。 ERGIC2和ERGIC3调节后生动物缝隙连接蛋白的ER-Glgi转运。 交通 23:140-157 (2022). 公共医学:34994051 Trychta KA&Harvey BK公司 咖啡因和MDMA(摇头丸)加剧热疗引发的内质网应激。 国际分子科学杂志 23:不适用(2022年)。 公共医学:35216090 欧阳M 等。 辣椒素改善慢性脑灌注不足大鼠线粒体相关内质网膜的松弛并改善认知功能。 前细胞神经科学 16:822702 (2022). 公共医学:35370565 伊诺斯特罗扎·尼维斯Y 等。 丁香提取物对内皮细胞活化生物标志物的抑制作用。 BMC补体治疗 22:101 (2022). 公共医学:35392889 Kopanchuk S公司 等。 用超分辨率成像显微镜观察Sigma-1受体的细胞内动力学。 公共科学图书馆一号 17:e0268563(2022)。 公共医学:35584184