主要功能和细节
重组生产(无动物),具有高批次一致性和长期供应安全性 兔单克隆[EPR3993]到p21 适用人群:WB 敲除已验证 反应对象:小鼠、大鼠、人类
相关共轭物和制剂
概述
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产品名称 -
描述 兔单克隆抗体 [EPR3993]至第21页 -
宿主 兔子 -
特异性 不同组织/细胞系之间的目标蛋白表达水平不同,在某些情况下,可能需要诱导才能观察到信号。 不建议将此抗体用于组织和原代细胞样本的WB中。 我们建议 澳大利亚银行109520 和 约188224 用于IHC。 -
经测试应用 -
种属反应性 以下内容: 小鼠、大鼠、人类 -
免疫原 合成肽。 此信息为Abcam和/或其供应商专有。 -
阳性对照 原始264.7、HCT116、MCF-7、PC-12用50ng/ml NFG处理48小时的全细胞裂解液、野生型HeLa处理的氟伐他汀(50 uM,24小时)细胞裂解液,野生型DLD-1 20µM 2,3-DCPE处理16小时的细胞裂解液
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常规说明
性能
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形式 液体 -
存放说明 在4°C下装运。 短期储存在+4°C下(1-2周)。 交付时,等分。 储存于-20°C。 在-20°C下稳定12个月。 -
存储溶液 pH值:7.20 防腐剂:0.01%叠氮化钠 成分:40%甘油、59%PBS、0.05%BSA -
浓度信息加载。。。 -
纯度 蛋白质A纯化 -
克隆 单克隆 -
协调 EPR3993系列 -
同种型 免疫球蛋白G -
新冠肺炎疫苗
相关产品
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替代版本 -
兼容的辅助设备 -
同种型对照 -
KO细胞系 -
KO细胞裂解物 -
阳性对照 -
重组蛋白 -
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应用
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靶标
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功能 可能是p53/TP53介导其作为细胞增殖抑制剂对DNA损伤作出反应的重要中间产物。 结合并抑制细胞周期蛋白依赖性激酶活性,防止关键的细胞周期蛋白依赖性激酶底物磷酸化并阻断细胞周期进程。 在细胞周期蛋白D-CDK4复合物的核定位和组装中发挥作用,并促进其激酶活性朝向RB1。 在较高的化学计量比下,抑制细胞周期蛋白D-CDK4复合物的激酶活性。 -
组织特异性 在所有成人人体组织中表达,在大脑中观察到低5倍的水平。 -
序列相似性 属于CDI家族。 -
结构域 PIP-box K+4基序介导与PCNA的相互作用和DCX(DTL)复合体的恢复:当PIP-box与PCNA相互作用时,K+4亚基序的存在会招募DCX(DTL)复合物,导致其泛素化。 细胞周期蛋白D-CDK4复合物的核定位需要C末端。 -
翻译后修饰 Akt对Thr-145的磷酸化或PKC对Ser-146的磷酸化会损害与PCNA的结合。 GSK3-β在Ser-114的磷酸化增强了DCX(DTL)复合物的泛素化。 MKRN1泛素化; 导致多泛素化和26S蛋白酶体依赖性降解。 DCX(DTL)复合物泛素化,也称为CRL4(CDT2)复合物,导致其在S相或紫外线照射后降解。 DCX(DTL)复合物的泛素化对控制复制许可至关重要,并且是PCNA依赖性的:通过其PIP盒与PCNA相互作用,而PIP盒中含有“K+4”基序的存在会募集DCX(DTL)复合物,导致其降解。 -
细胞定位 细胞质。 核心。 -
UniProt提供的信息 -
数据库链接 -
别名 CAP20抗体 CDK-相互作用蛋白1抗体 CDKI抗体
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图片
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所有车道: 稀释1/1000的抗p21抗体[EPR3993](ab109199) 车道1: Raw 264.7(小鼠Abelson小鼠白血病病毒诱导的肿瘤巨噬细胞)全细胞裂解物 车道2: NIH/3T3(小鼠胚胎成纤维细胞)全细胞裂解物 3号车道: C6(大鼠胶质瘤胶质细胞)全细胞裂解物 车道4: PC-12(大鼠肾上腺嗜铬细胞瘤)全细胞裂解物 每车道20µg的裂解液/蛋白质。 次要 所有车道: 山羊抗狂犬病IgG H&L(HRP)( ab97051型 )稀释1/20000 预测的带宽大小: 18千Da 观察到的频带大小: 18千Da 暴露时间: 180秒 封闭和稀释缓冲液和浓度:5%NFDM/TBST。 约181602 用作GAPDH加载控件。 -
所有车道: 稀释1/1000的抗p21抗体[EPR3993](ab109199) 车道1: PC-12(大鼠肾上腺嗜铬细胞瘤)全细胞裂解物 车道2: 50ng/ml NFG处理PC-12(大鼠肾上腺嗜铬细胞瘤)48小时全细胞裂解物 每车道20µg的裂解液/蛋白质。 次要 所有车道: 山羊抗狂犬病IgG H&L(HRP)( ab97051型 )稀释1/20000 使用ECL技术开发。 预测的带宽大小: 18千Da 观察到的频带大小: 18千Da 暴露时间: 180秒 封闭和稀释缓冲液和浓度:5%NFDM/TBST。 约181602 用作GAPDH加载控件。 我们建议使用更高或超高灵敏度的ECL基板进行检测。 增加裂解液量也有助于获得更强的信号。 -
所有车道: 稀释1/1000的抗p21抗体[EPR3993](ab109199) 车道1: 野生型HeLa载体控制氟伐他汀(0 uM,24 h)细胞裂解物 车道2: 野生型HeLa处理的氟伐他汀(50 uM,24 h)细胞裂解物 3号车道: CDKN1A敲除HeLa车辆控制氟伐他汀(0 uM,24 h)细胞裂解物 车道4: CDKN1A敲除HeLa处理的氟伐他汀(50 uM,24 h)细胞裂解物 每车道20µg的裂解液/蛋白质。 在还原条件下进行。 预测的带宽大小: 18千Da 观察到的频带大小: 21千帕 为什么实际的频带大小与预测的不同? 蛋白质印迹的假彩色图像:1/1000稀释的抗-p21抗体[EPR3993]染色,显示为绿色; 小鼠抗α-微管蛋白[DM1A]( 约7291 )以1/20000稀释度进行负载控制染色,以红色显示。在Western blot中,ab109199显示与p21特异性结合。 在野生型HeLa细胞裂解液中21 kDa处观察到一条带,在CDKN2A敲除细胞系中未观察到该大小的信号 约255349 (敲除细胞裂解物 约263812 ). 为了生成此图像,分析了野生型和CDKN2A敲除细胞裂解物。 首先,样品在SDS-PAGE凝胶上运行,然后转移到硝化纤维素膜上。 TBS-0.1%吐温中3%牛奶中的膜被堵塞 ® 20(TBS-T),然后在4°C下与一级抗体孵育过夜。 在TBS-T中清洗四次斑点,在室温下与二级抗体孵育1小时,再次清洗四次,然后成像。 使用的二级抗体是山羊抗兔IgG H&L(IRDye ® 800CW)预吸收床( ab216773号 )和山羊抗鼠IgG H&L(IRDye ® 680RD)预吸收床( 约216776 )稀释1/20000。 -
车道1 :野生型DLD-1细胞裂解物(20µg) 2号车道 :野生型DLD-1 20μM 2,3-DCPE,用于16小时处理的细胞裂解液(20µg) 3号车道 :p21敲除DLD-1细胞裂解物(20µg) 4号车道 :p21敲除20μM 2,3-DCPE,用于16小时DLD-1细胞裂解液(20µg) 车道5: HT1080细胞裂解液(20μg) 1-5车道 :合并信号(红色和绿色)。 绿色-在20 kDa时观察到ab109199。 红色负载控制, 约8245 ,在37kDa下观察到。 经2,3-DCPE处理后,ab109199在WT DLD-1细胞中识别p21,并伴有额外的交叉反应带。 当使用p21敲除DLD-1细胞+/-2,3-DCPE处理时,未观察到条带。 野生型和p21基因敲除样品进行SDS-PAGE分析。 ab109199和 约8245 (GAPDH的负荷控制)分别稀释1/1000和1/10000,并在4°C下培养过夜。 用山羊抗兔IgG H&L(IRDye ® 800CW)预吸附床( ab216773号 )和山羊抗鼠IgG H&L(IRDye ® 680RD)预吸附床( 约216776 )二级抗体在成像前在室温下以1/10000稀释1h。 -
所有车道: 稀释1/1000的抗p21抗体[EPR3993](ab109199) 车道1: 野生型HCT116细胞裂解物 车道2: CDKN1A敲除HCT116细胞裂解物 每车道20µg的裂解液/蛋白质。 在还原条件下进行。 预测的带宽大小: 18千Da 观察到的频带大小: 20千帕 为什么实际的频带大小与预测的不同? 1-2车道: 合并信号(红色和绿色)。 绿色-在20kDa下观察到ab109199。 红色-抗-GAPDH抗体[6C5]-负荷控制( 约8245 )在37 kDa时观察到。 western blot显示ab109199与野生型HCT116细胞中的p21发生反应。 敲除细胞系时观察到信号丢失 约266860 (敲除细胞裂解物 约256870 )已使用。 对野生型HCT116和CDKN1A敲除HCT116细胞裂解物进行SDS-PAGE分析。 在室温下,将膜在0.1%的TBST和3%的脱脂奶粉中封闭1小时。 ab109199和抗-GAPDH抗体[6C5]-负荷控制( 约8245 )在4°C下过夜,稀释率分别为1/1000和1/20000。 用山羊抗兔IgG H&L(IRDye ® 800CW)预吸附床( ab216773号 )和山羊抗鼠IgG H&L(IRDye ® 680RD)预吸附床( 约216776 )二级抗体在成像前在室温下以1:20000稀释1小时。 -
在0.2µg/ml的MCF7(人乳腺癌上皮细胞)裂解液上测试不同批次的ab109199。在每条车道上装载15µg裂解液。 在21 kDa下观察到的谱带。 -
车道1: 抗p21抗体[EPR3993](ab109199)(0.7ug/ul) 车道2: 抗p21抗体[EPR362]( 澳大利亚银行109520 )(0.8微克/升) 所有车道: MCF-7(人乳腺癌上皮细胞)全细胞裂解物 每车道15µg的裂解液/蛋白质。 次要 所有车道: 山羊抗狂犬病IgG H&L(HRP)( ab97051型 )稀释1/20000 预测的带宽大小: 18千Da 暴露时间: 3分钟 封闭和稀释缓冲液:5%NDFM/TBST。 -
车道1 :野生型DLD-1细胞裂解物(20µg) 2号车道 :野生型DLD-1 20μM 2,3-DCPE,用于16小时处理的细胞裂解液(20µg) 3号车道 :p21敲除DLD-1细胞裂解物(20µg) 4号车道 :p21敲除20μM 2,3-DCPE,用于16小时DLD-1细胞裂解液(20µg) 车道5: HT1080细胞裂解液(20μg) 1-5车道 :合并信号(红色和绿色)。 绿色-在20 kDa时观察到ab109199。 红色负载控制, 约8245 ,在37kDa下观察到。 这张蛋白质印迹图像是 澳大利亚银行109119 和一名参赛者的最高引用兔子多克隆抗体。 -
抗p21抗体[EPR3993](ab109199)(1/1000稀释(纯化))+PC-12细胞裂解液(10µg) 次要 1/1000稀释度的过氧化物酶结合山羊抗兔IgG(H+L) 预测的带宽大小: 18千Da 观察到的频带大小: 21千帕 为什么实际的频带大小与预测的不同? 封闭缓冲液和浓度:5%NFDM/TBST。 稀释缓冲液和浓度:5%NFDM/TBST。
实验方案
数据表及文件
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文献 (276)
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