主要功能和细节
检测类型:半定量 检测方法:比色法 平台:缩微板阅读器 分析时间:3小时30分钟 样品类型:核提取物 灵敏度:600纳克/井
概述
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产品名称 -
检测方法 比色法 -
样品类型 核提取物 -
检测类型 半定量 -
灵敏度 >600 ng/井 -
检测时间 3小时 3000万 -
种属反应性 与反应: 老鼠、老鼠、人 -
产品概述 Nrf2转录因子检测试剂盒(比色法)(ab207223)是一种高通量检测方法,用于定量核提取物中的Nrf2活化。 该分析结合了快速ELISA格式和敏感、特异的非放射性转录因子活化分析。
含有Nrf2共识结合位点(5'–GTCACAGTGACTCAGCAGAATCTG–3')的特定双链DNA序列被固定在96 well板上。 核提取物中的活性Nrf2与寡核苷酸特异结合。 Nrf2由一种初级抗体检测,该抗体识别Nrf2的一个表位,只有当该蛋白被激活并与目标DNA结合时才能访问该表位。 HRP结合二级抗体在OD 450 nm处提供灵敏的比色读数。 本产品仅检测人类、小鼠和大鼠Nrf2。
关键性能和优点:
检测时间:3.5小时(不包括细胞提取物制剂)。
检测限:<0.6µg核提取物/孔。
检测范围:0.6–10µg核提取物/孔。 -
说明 Nrf2(NF-E2相关因子,NFE2L2,来自核因子类红细胞衍生2)是一种基本的亮氨酸拉链(bZIP)转录因子。 Nrf2与抗氧化反应元件(ARE)结合,并对解毒酶基因(如NAD(P)H:醌氧化还原酶1,NQO1)的表达进行正向调节,以响应抗氧化剂和外源性物质。 肝、肺、结肠和乳腺肿瘤中NQO1基因表达水平较高。 Nrf2的细胞溶质抑制剂Keap1/INrf2在正常条件下将Nrf2保留在细胞质中,其中Nrf2与INrf2的相互作用以Nrf2为靶点,以实现泛素化和蛋白酶体降解。 然而,氧化应激后,Nrf2从INrf2中释放出来,转移到细胞核,导致ARE介导的基因表达激活。 还合成了Nrf2 从头开始 暴露于压力之后。 此外,Nrf2通过调节INrf2的表达和诱导来控制其自身的降解。 研究表明,用叔丁基对苯二酚(t-BHQ)处理大约两小时后,核输出和降解途径被激活。 Nrf2活化和降解是细胞对氧化和亲电应激反应的重要传感机制。 -
平台 缩微板阅读器
性能
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存放说明 请参阅协议。 -
组件 1 x 96测试 5 x 96测试 10X抗体结合缓冲液 1 x 2.2毫升 5 x 2.2毫升 10X洗涤缓冲液 1 x 22毫升 5 x 22毫升 96-well Nrf2分析板 1台 5台 抗抗体HRP-结合IgG 1 x 10微升 5 x 10微升 绑定缓冲区 1 x 10毫升 5 x 10毫升 开发解决方案 1 x 11毫升 5 x 11毫升 二硫苏糖醇(DTT)(1 M) 1 x 100µl 5 x 100微升 鲱鱼精子DNA 1 x 100µl 5 x 100微升 裂解液 1 x 10毫升 5 x 10毫升 突变寡核苷酸(10 pmol/µL) 1 x 100µl 5 x 100微升 Nrf2抗体 1 x 10微升 1 x 25µl 平板封口机 1台 5台 阳性对照提取物(2.5µg/µL) 1 x 20微升 1 x 50微升 蛋白酶抑制剂鸡尾酒 1 x 100µl 5 x 100微升 停止解决方案 1 x 11毫升 5 x 11毫升 野生型寡核苷酸(10 pmol/µL) 1 x 100µl 5 x 100微升 -
研究领域 -
功能 与靶基因启动子区的抗氧化反应(ARE)元件结合的转录激活剂。 对氧化应激反应中基因的协调上调很重要。 可能通过介导β-珠蛋白基因座控制区超敏位点2的增强子活性参与β-珠蛋白质簇基因的转录激活。 -
组织特异性 广泛表达。 在成人肌肉、肾脏、肺、肝脏和胎儿肌肉中表达最高。 -
序列相似性 属于bZIP家族。 CNC子系列。 包含1个bZIP域。 -
结构域 N端的酸性激活域和C端的DNA结合域。 -
翻译后修饰 氧化应激反应中PKC对Ser-40的磷酸化使NFE2L2与其细胞质抑制剂KEAP1分离,促进其转位到细胞核。 -
细胞定位 细胞质>胞质溶胶。 核心。 细胞质在无应力条件下,在亲电试剂的诱导下易位到细胞核。 -
UniProt提供的信息 -
别名 红系衍生2 HEBP1型 类似于2
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数据库链接 Entrez基因: 4780 人类 Entrez基因: 18024 鼠标 Entrez基因: 83619 老鼠 Omim公司: 600492 人类 瑞士保护银行: 问题16236 人类 瑞士保护银行: Q60795问题 鼠标 瑞士保护银行: O54968号 老鼠 尤尼金: 1025 鼠标
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实验方案
数据表及文件
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SDS下载 -
数据表下载
文献 (30)
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