主要功能和细节
NFAT1的小鼠单克隆抗体[25A10.D6.D2] 适用于:Flow Cyt、WB、IHC-P、ICC/IF 反应对象:人类 同位素:IgG1
概述
-
产品名称 -
描述 小鼠单克隆抗体 [25A10.D6.D2]至NFAT1 -
宿主 鼠标 -
特异性 Ab2722检测来自小鼠、大鼠和人类组织(内源性表达)的活化T细胞核因子(NFAT)。 该抗体不会与NFAT2(NFATc,NFATc1)发生交叉反应。 该抗体检测两种形式的NFAT1-a~140 kDa蛋白,代表静息免疫细胞中磷酸化NFAT1,以及刺激细胞中的~120 kDa蛋白质,代表完全脱磷酸NFAT1。 -
经测试应用 -
种属反应性 与反应: 人类 -
免疫原 -
阳性对照 WB:静止免疫细胞和离子霉素刺激免疫细胞(参见Shaw等人的参考文献:“T细胞和B细胞为1uM,巨噬细胞为10uM,肥大细胞为0.3uM。治疗时间为20分钟。”)
-
常规说明 多年来,生命科学行业一直面临着再现性危机。 Abcam正在通过我们的一系列重组单克隆抗体和用于金标准验证的敲除编辑细胞系引领解决这一问题。 购买前请检查此产品是否满足您的需求。 如果您有任何问题、特殊要求或疑虑,请在购买前向我们发送询问和/或联系我们的支持团队。 以下是本产品的推荐替代品,以及出版物、客户评论和问答
性能
-
形式 液体 -
存放说明 在4°C下装运。 短期储存在+4°C下(1-2周)。 交付时,等分。 储存于-20°C或-80°C。 避免冷冻/解冻循环。 -
存储溶液 防腐剂:0.05%叠氮化钠 成分:PBS -
正在加载浓度信息。。。 -
纯度 蛋白质G纯化 -
克隆 单克隆 -
克隆编号 25A10.D6.D2号 -
同种型 IgG1 -
研究领域
相关产品
-
ChIP相关产品 -
兼容的辅助设备 -
共轭试剂盒 -
同位素控制
应用
靶标
-
功能 在T细胞中细胞因子基因的诱导表达中发挥作用,尤其是在IL-2、IL-3、IL-4、TNF-α或GM-CSF的诱导中。 -
组织特异性 表达于胸腺、脾脏、心脏、睾丸、大脑、胎盘、肌肉和胰腺。 -
序列相似性 包含1个RHD(Rel-like)域。 -
结构域 Rel相似域(RSD)允许DNA结合并与AP1因子协同作用。 -
翻译后修饰 在静息细胞中,在99-363区域的至少18个位点上被NFATC激酶磷酸化。 细胞刺激后,除Ser-243外,所有这些位点都被钙调神经磷酸酶去磷酸化。去磷酸化引起构象变化,同时暴露NLS并掩盖NES,导致核定位。 同时,Ser-53或Ser-56被磷酸化; 这是完整转录活动所必需的。 -
细胞定位 细胞质。 核心。 磷酸化形式的细胞质和活化后的核,由钙调神经磷酸酶介导的去磷酸化控制。 NFATC的快速核退出被认为是细胞区分持续钙信号和瞬时钙信号的机制之一。 NFATC的亚细胞定位在基因转录调控中起着关键作用。 -
UniProt提供的信息 -
数据库链接 -
别名 AI607462抗体 细胞质2抗体 KIAA0611抗体
查看所有内容
图片
-
对脱蜡人脾组织的正常组织和癌组织进行免疫组织化学检查。 为了暴露目标蛋白,使用10mM柠檬酸钠(pH6.0)缓冲液微波加热8-15分钟进行热诱导抗原回收。 在室温下,用3%BSA-PBS封闭抗原回收组织30分钟。 然后用识别NFATc2 ab2722的小鼠单克隆抗体或不带一级抗体(阴性对照)在4°C的湿化室中隔夜以1:100的稀释度对组织进行检测。 用PBST广泛清洗组织,用过氧化物酶抑制剂抑制内源性过氧化物酶活性。 使用生物素结合二级抗体和SA-HRP进行检测,然后使用DAB进行比色检测。 用苏木精对组织进行复染,并准备贴装。 -
HeLa细胞中NFAT1(绿色)的免疫细胞化学/免疫荧光分析。 将福尔马林固定的细胞在室温下用0.1%Triton X-100在TBS中透化10分钟,并在室温下用1%BSA封闭15分钟。 细胞未经处理(左面板)或用1uM staurosporine(右面板)处理3小时,在室温下用ab2722(1:100)孵育至少1小时,用PBS清洗,并在室温下使用DyLight 488结合的山羊抗鼠IgG二级抗体(1:400)孵养30分钟。 F-肌动蛋白(红色)用DyLight 554磷脂酶染色,细胞核(蓝色)用Hoechst 33342染色。 图像是在20倍放大率下拍摄的。 -
1µg/ml的抗-NFAT1抗体[25A10.D6.D2](ab2722)+人脾组织裂解物-总蛋白( 约29699 )10µg 次要 山羊抗鼠IgG H&L(HRP)预吸附( 约97040 )稀释1/5000() 使用ECL技术开发。 在还原条件下进行。 预测的带宽大小: 115千帕 观察到的频带大小: 150千Da 为什么实际的频带大小与预测的不同? 其他波段位于: 62kDa。 我们不确定这些额外波段的身份。 暴露时间: 4分钟 NFAT1含有大量的潜在磷酸化位点(SwissProt),这可以解释其在比预测的更高分子量下的迁移。 -
使用自动化系统(DAKO Autostainer Plus)对人类扁桃体中的NFAT进行ab2722(4µg/ml)染色。 使用该方案时,细胞核染色强,细胞质染色弱。 在Dako-PT连接中,用Dako 3在pH 9.0的1 AR缓冲液EDTA中重新水化切片,并回收抗原。 将载玻片在3%过氧化氢中甲醇中过氧化物酶封闭10分钟。 然后用Dako蛋白块将其封闭10分钟(PBS中含有0.25%酪蛋白),然后与一级抗体孵育20分钟,并用Dako-ension flex扩增试剂盒检测30分钟。 用二氨基联苯胺进行5分钟的比色检测。 用血红素对载玻片进行复染,盖玻片置于DePeX下。 请注意,对于手动染色,建议优化一级抗体浓度和培养时间。 可能需要信号放大。 -
NFAT1(绿色)的免疫细胞化学/免疫荧光分析显示HeLa细胞染色。 F-肌动蛋白染色法显示为磷脂(红色)和细胞核DAPI(蓝色)。 细胞在培养箱载玻片上生长,染色前用甲醛固定。 在4°C的温度下,在无(对照)或ab2722(1:20)的情况下将细胞接种过夜,用PBS洗涤,并用DyLight-488结合二级抗体孵育。 图像是在放大60倍的条件下拍摄的。 -
NFAT1(绿色)的免疫细胞化学/免疫荧光分析显示MCF-7细胞染色。 F-肌动蛋白染色法显示为磷脂(红色)和细胞核DAPI(蓝色)。 细胞在培养箱载玻片上生长,染色前用甲醛固定。 在4°C的温度下,在无(对照)或ab2722(1:20)的情况下将细胞接种过夜,用PBS洗涤,并用DyLight-488结合二级抗体孵育。 图像是在放大60倍的条件下拍摄的。 -
NFAT1(绿色)的免疫细胞化学/免疫荧光分析显示U251细胞染色。 F-肌动蛋白染色法显示为磷脂(红色)和细胞核DAPI(蓝色)。 细胞在室载玻片上生长,并在染色前用甲醛固定。 在4°C的温度下,在无(对照)或ab2722(1:20)的情况下将细胞接种过夜,用PBS洗涤,并用DyLight-488结合二级抗体孵育。 图像是在放大60倍的条件下拍摄的。 -
对脱石蜡的人类结肠癌组织的正常和癌症活检进行免疫组织化学。 为了暴露目标蛋白,使用10mM柠檬酸钠(pH6.0)缓冲液微波加热8-15分钟进行热诱导抗原回收。 在室温下,用3%BSA-PBS封闭抗原回收组织30分钟。 然后用识别NFATc2 ab2722的小鼠单克隆抗体或不带一级抗体(阴性对照)在4°C的湿化室中隔夜以1:100的稀释度对组织进行检测。 用PBST广泛清洗组织,用过氧化物酶抑制剂抑制内源性过氧化物酶活性。 使用生物素结合二级抗体和SA-HRP进行检测,然后使用DAB进行比色检测。 用苏木精对组织进行复染,并准备贴装。 -
对脱蜡人扁桃体组织的正常组织和癌组织进行免疫组织化学检查。 为了暴露目标蛋白,使用10mM柠檬酸钠(pH6.0)缓冲液微波加热8-15分钟进行热诱导抗原回收。 在室温下,用3%BSA-PBS封闭抗原回收组织30分钟。 然后用识别NFATc2 ab2722的小鼠单克隆抗体或不带一级抗体(阴性对照)在4°C的湿化室中隔夜以1:100的稀释度对组织进行检测。 用PBST广泛清洗组织,用过氧化物酶抑制剂抑制内源性过氧化物酶活性。 使用生物素结合二级抗体和SA-HRP进行检测,然后使用DAB进行比色检测。 用苏木精对组织进行复染,并准备贴装。
数据表及文件
-
SDS下载 -
数据表下载
文献 (53)
老挝语M 等。 胰腺导管腺癌中钙调神经磷酸酶1基因亚型4的调节器调节肿瘤细胞的进展。 癌基因 40:3136-3151 (2021). 公共医学:33824473 崔C 等。 异丙酚通过miR-145-3p/NFATc2/NF-?维持Th17/Treg细胞平衡并减轻创伤性脑损伤大鼠的炎症反应? B轴。 国际分子医学杂志 48:不适用(2021年)。 公共医学:34036377 Gajewska KA公司 等。 核转运蛋白Importin-13在氧化应激转录反应中起关键作用。 国家公社 12:5904 (2021). 公共医学:34625540 张Y 等。 线粒体蛋白Sirtuin3和解偶联蛋白2编码基因的单核苷酸多态性与肺动脉高压患者的疾病严重程度、2型糖尿病和预后相关,这在一个缺乏这两个基因的新小鼠模型中得到了重新描述。 J Am心脏协会 10:e020451(2021)。 公共医学:34719264 吴X 等。 柴胡皂苷D抑制脂多糖诱导的炎症性骨丢失与调节RANKL/RANK通路有关。 药物开发治疗 15:4741-4757 (2021). 公共医学:34848946