主要功能和细节
重组生产(无动物),实现高批次一致性和长期供应安全 兔单克隆[EPR8985(B)]到拉明B1的核膜标记 适用人群:IP、ICC/IF、WB、IHC-P 敲除已验证 反应:小鼠、大鼠、人类
相关共轭物和制剂
概述
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产品名称 -
描述 兔单克隆抗体 [EPR8985(B)]至拉明B1- 核 信封标记 -
宿主 兔子 -
经测试应用 -
种属反应性 与反应: 小鼠、大鼠、人类 -
免疫原 合成肽。 在人类拉明B1 aa 500内到达C末端。 确切的顺序是专有的。 数据库链接: 第20700页 -
阳性对照 WB:Hap1、HeLa、Jurkat、Molt4、Y79、Caco 2、C6、Raw264.7、PC-12和NIH/3T3细胞裂解物。 小鼠脑、心、肾、脾; 和大鼠大脑、心脏和脾脏的溶解物。 IHC-P:膀胱组织的结肠癌、肝癌和移行细胞癌。 ICC/IF:Ramos细胞,HAP1-LMNB1细胞。
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常规说明
性能
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形式 液体 -
存放说明 在4°C下装运。 短期储存在+4°C下(1-2周)。 交付时,等分。 长期储存于-20°C。 避免冷冻/解冻循环。 -
解离常数 (K) 天 ) -
存储溶液 pH值:7.20 防腐剂:0.01%叠氮化钠 成分:59%PBS,40%甘油,0.05%BSA -
正在加载浓度信息。。。 -
纯度 蛋白质A纯化 -
克隆 单克隆 -
克隆编号 EPR8985(B) -
同种型 免疫球蛋白G -
研究领域
相关产品
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替代版本 -
兼容的辅助设备 -
同位素控制 -
KO细胞系 -
KO细胞裂解物 -
阳性对照 -
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应用
靶标
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功能 层粘连蛋白是核纤层的组成部分,核纤层是内核膜核质侧的纤维层,被认为为核膜提供了一个框架,也可能与染色质相互作用。 -
疾病相关 LMNB1的缺陷是白质营养不良脱髓鞘常染色体显性成年发病(ADLD)的原因[MIM:169500]。 ADLD是一种缓慢进行性和致命性脱髓鞘性脑白质营养不良,出现于生命的第四或第五个十年。 临床特征为早期自主神经异常、锥体和小脑功能障碍以及中枢神经系统对称性脱髓鞘。 它与多发性硬化和其他脱髓鞘疾病的不同之处在于,神经病理学显示,在存在次全脱髓鞘和星形胶质细胞缺乏的情况下,少突胶质细胞得以保存。 -
序列相似性 属于中间丝族。 -
翻译后修饰 B型胺经历一系列修饰,如法尼基化和磷酸化。 层粘连蛋白磷酸化增加发生在包膜解体之前,可能在调节层粘连中起作用。 -
细胞定位 细胞核内膜。 -
UniProt提供的信息 -
数据库链接 Entrez基因: 4001 人类 Entrez基因: 16906 鼠标 Entrez基因: 116685 老鼠 Omim公司: 150340 人类 瑞士保护银行: 第20700页 人类 瑞士保护银行: 第14733页 鼠标 瑞士保护银行: 第70615页 老鼠 尤尼金: 89497 人类
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别名 ADLD抗体 层粘连蛋白B1抗体 层粘连蛋白B1抗体
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图片
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所有车道: 抗-Lamin B1抗体[EPR8985(B)]-核膜标记物(ab133741),稀释1/1000 车道1: 野生型HeLa细胞裂解物 车道2: LMNB1敲除HeLa细胞裂解物 每车道20µg的裂解液/蛋白质。 在还原条件下进行。 预测的带宽大小: 66千Da 观察到的频带大小: 66-70千帕 为什么实际的频带大小与预测的不同? 1-2车道: 合并信号(红色和绿色)。 绿色-在66-70 kDa下观察到ab133741。 红色-抗-GAPDH抗体[6C5]-负荷控制( 约8245 )在37 kDa时观察到。 western blot显示ab133741与野生型HeLa细胞中的LMNB1反应。 敲除细胞系时观察到信号丢失 ab255404型 (敲除细胞裂解物 ab263825型 )已使用。 对野生型HeLa和LMNB1敲除HeLa细胞裂解物进行SDS-PAGE。 在室温下,将膜在0.1%的TBST和3%的脱脂奶粉中封闭1小时。 ab133741和抗-GAPDH抗体[6C5]-负荷控制( 约8245 )在4°C下过夜,稀释率分别为1/1000和1/20000。 用山羊抗兔IgG H&L(IRDye ® 800CW)预吸附床( ab216773号 )和山羊抗鼠IgG H&L(IRDye ® 680RD)预吸附床( 约216776 )二级抗体在成像前在室温下以1:20000稀释1小时。 -
4%对甲醛固定、0.1%Triton X-100透性Ramos(人类Burkitt淋巴瘤细胞系)细胞的免疫荧光分析,在1/100稀释度下用ab133741标记Lamin B1,然后是山羊抗兔IgG(Alexa Fluor®488)( 约150077 )1/200稀释度的二级抗体(绿色)。 在Ramos细胞系上观察到核膜染色。 核反染为DAPI(蓝色)。 用检测到Tubulin 约7291 (抗Tubulin小鼠单克隆抗体),稀释1/500 ab150120型 (AlexaFluor®594山羊抗鼠次要),稀释度为1/500(红色)。 阴性对照如下: -ve对照1:ab133741,稀释度为1/100,然后 ab150120型 (AlexaFluor®594山羊抗鼠次要),稀释度为1/500。 -ve控制2: 约7291 (抗Tubulin小鼠单克隆抗体),稀释1/500,然后 约150077 (Alexa Fluor®488 Goat Anti-Rabbit IgG H&L),稀释度为1/200。 -
人膀胱移行细胞癌组织的免疫组织化学(福尔马林/PFA-固定石蜡包埋切片)分析,用纯化的ab133741标记1/300的Lamin B1。 使用Tris/EDTA缓冲液pH 9进行热介导抗原检索。 使用预先稀释的HRP聚合物结合的抗兔IgG作为二级抗体。 阴性对照使用PBS代替一抗。 苏木精复染。 -
ab133741染色野生型HAP1细胞中的Lamin B1(顶面板)和Lamin B1敲除HAP1的细胞(底面板)。 细胞用100%甲醇固定(5分钟),用0.1%Triton X-100渗透5分钟,然后用1%BSA/10%正常山羊血清/0.3M甘氨酸在0.1%PBS-Tween中封闭1小时。 然后用1μg/ml稀释的ab133741培养细胞,并 约195889年 在+4°C的条件下,以1/250稀释度(以假彩色红色显示)隔夜。 然后将细胞与 约150081 (羊抗兔IgG-H&L多克隆二级抗体(Alexa Fluor®488)),以1/1000稀释1小时。 核DNA用DAPI标记为蓝色。 使用共焦显微镜(Leica-Microsystems,TCS SP8)拍摄图像。 -
1号和3号车道: 抗-Lamin B1抗体[EPR8985(B)]-核膜标记物(ab133741),稀释1/1000 车道1: 野生型HAP1全细胞裂解液(20µg) 2号和4号车道: 清空 3号车道: 20µg LMNB1敲除HAP1全细胞裂解液 预测的带宽大小: 66千Da 车道1-4: 合并信号(红色和绿色)。 绿色-在70 kDa下观察到ab133741。 红色-装载控制, 约8245 ,在37 kDa下观察到。 在野生型HAP1细胞中,ab133741与拉明B1发生特异性反应。 使用剔除样品时未观察到条带。 野生型和拉明B1基因敲除样品进行SDS-PAGE分析。 Ab133741和 约8245 (小鼠抗GAPDH负荷对照)分别以1/1000和1/10000稀释度在4°C下培养过夜。 用山羊抗兔IgG H&L(IRDye ® 800CW)预吸收床 ab216773号 和山羊抗鼠IgG H&L(IRDye ® 680RD)预吸收 约216776 二级抗体在成像前在室温下以1/10000稀释1小时。 -
1号和3号车道: 抗-Lamin B1抗体[EPR8985(B)]-核膜标记(ab133741) 车道1: 野生型HAP1全细胞裂解液(20µg) 车道2: 清空 3号车道: 20µg的拉明B1敲除HAP1细胞裂解液 预测的带宽大小: 66千Da 1-3车道: 合并信号(红色和绿色)。 绿色-在70 kDa时观察到目标。 红色-装载控制, 约8245 ,在37 kDa下观察到。 这个western blot图像是ab133741和竞争对手停用的山羊多克隆抗体之间的比较。 -
抗-Lamin B1抗体[EPR8985(B)]-核膜标记物(ab133741)(1/1000稀释)+GST标记的重组人Lamin B1蛋白(aa 1至586)(0.015µg,含5%NFDM/TBST) 次要 山羊抗狂犬病IgG H&L(HRP)( ab97051型 )稀释1/20000 预测的带宽大小: 66千Da 观察到的频带大小: 100千Da 为什么实际的频带大小与预测的不同? 暴露时间: 1秒 重组人层粘连蛋白B1( 约114163 ) -
所有车道: 抗-Lamin B1抗体[EPR8985(B)]-核膜标记物(ab133741),稀释度为1/50000(纯化) 车道1: Jurkat(外周血T细胞白血病细胞) 细胞裂解产物 车道2: Molt-4(人淋巴细胞白血病细胞系)细胞裂解物 3号车道: Y79(人视网膜母细胞瘤细胞系)细胞裂解物 车道4: Caco-2(人大肠腺癌细胞)细胞裂解物 每车道20µg的裂解液/蛋白质。 次要 所有车道: HRP山羊抗兔(H+L),稀释度为1/1000 预测的带宽大小: 66千Da 观察到的频带大小: 70千帕 为什么实际的频带大小与预测的不同? 阻塞缓冲区:5%NFDM/TBST 稀释缓冲液:5%NFDM/TBST -
用纯化的ab133741以1/300的工作稀释度对石蜡包埋的小鼠大脑皮层进行免疫组织化学染色。 使用的二级抗体是兔IgG的HRP聚合物。 观察大脑皮层组织神经元细胞的核膜染色。 用苏木精对样品进行反染色。 使用pH 9.0的Tris-EDTA缓冲液进行抗原检索。 使用PBS代替一级抗体作为阴性对照,如插图所示。 -
所有车道: 抗-Lamin B1抗体[EPR8985(B)]-核膜标记物(ab133741),稀释度为1/50000(纯化) 车道1: C6(大鼠胶质瘤细胞)细胞裂解物 车道2: PC12(大鼠肾上腺嗜铬细胞瘤)细胞裂解物 3号车道: NIH/3T3(鼠胚成纤维细胞)细胞裂解物 车道4: RAW264.7(用Abelson小鼠白血病病毒转化的小鼠巨噬细胞)细胞裂解物 每车道20µg的裂解液/蛋白质。 次要 所有车道: HRP山羊抗兔(H+L),稀释度为1/1000 预测的带宽大小: 66千Da 观察到的频带大小: 70千帕 为什么实际的频带大小与预测的不同? 阻塞缓冲区:5%NFDM/TBST 稀释缓冲液:5%NFDM/TBST -
抗-Lamin B1抗体[EPR8985(B)]-核膜标记物(ab133741)(1/10000稀释度)+Jurkat(外周血T细胞白血病细胞)细胞裂解液(10µg) 次要 过氧化物酶结合羊抗兔IgG(H+L)1/1000稀释 预测的带宽大小: 66千Da 观察到的频带大小: 70千帕 为什么实际的频带大小与预测的不同? 封闭缓冲液和浓度:5%NFDM/TBST。 稀释缓冲液和浓度:5%NFDM/TBST。 -
用未纯化的ab133741对1/250的人肝组织标记Lamin B1进行免疫组织化学(福尔马林/PFA-固定石蜡包埋切片)分析。 在开始IHC染色方案之前,使用Tris/EDTA缓冲液pH 9.0进行热介导抗原回收。 -
所有车道: 抗-Lamin B1抗体[EPR8985(B)]-核膜标记物(ab133741),1/10000稀释 车道1: 小鼠脑裂解物 车道2: 小鼠心脏裂解物 3号车道: 小鼠肾脏裂解物 车道4: 小鼠脾裂解物 车道5: 大鼠脑裂解物 车道6: 大鼠心脏裂解物 7号车道: 大鼠脾裂解物 车道8: C6(大鼠胶质瘤细胞)全细胞裂解物 9号车道: PC-12(大鼠肾上腺嗜铬细胞瘤)全细胞裂解物 10号车道: NIH/3T3(小鼠胚胎成纤维细胞) 每条泳道10µg的裂解物/蛋白质。 次要 所有车道: 羊抗狂犬病IgG,(H+L),过氧化物酶结合1/1000稀释 预测的带宽大小: 66千Da 观察到的频带大小: 70千帕 为什么实际的频带大小与预测的不同? 封闭和稀释缓冲液和浓度:5%NFDM/TBST -
用未纯化的ab133741对1/250的人结肠组织标记Lamin B1进行免疫组织化学(福尔马林/PFA-固定石蜡包埋切片)分析。 在开始IHC染色方案之前,使用Tris/EDTA缓冲液pH 9.0进行热介导抗原回收。 -
ab133741(纯化)在1/20免疫沉淀的Jurkat细胞中的Lamin B1(Lane 1)。 对于western blotting,使用1/1000稀释度的ab133741,并使用HRP结合的山羊抗兔IgG作为二级抗体(1/1500)。 封闭缓冲液和浓度:5%NFDM/TBST。 稀释缓冲液和浓度:5%NFDM/TBST。
数据表及文件
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文献 (161)
马勒 等。 细胞外凋亡小泡是滋养皮肤和头发的代谢调节因子。 生物活性物质 19:626-641 (2023). 公共医学:35600968 郭Y 等。 HOTAIR通过JAK1/STAT3级联激活FUT8/核心岩藻糖基化Hsp90/MUC1/STAT3反馈回路,调节肝细胞癌的进展。 挖肝病 55:113-122 (2023). 公共医学:35504805 莫斯利SR&贝克K 从培养细胞中分离内源性胞质DNA。 STAR协议 3:101165 (2022). 公共医学:35535161 陈B 等。 黑藻对紫外线B诱导的小鼠L929成纤维细胞和斑马鱼的光保护作用。 BMC补体治疗 22:144 (2022). 公共医学:35597942 王菲 等。 B细胞淋巴瘤-3在骨骼老化过程中控制间充质干细胞的承诺和衰老。 临床翻译医学 12:e955(2022)。 公共医学:35804493