抗Ki67 抗体 (ab15580)
主要功能和细节
兔多克隆至Ki67 适用范围:IHC-P、ICC 敲出验证 反应:老鼠,人 同型:IgG
选择批间可重复性更高的重组抗体
研究可靠 —— 各批次间结果一致且可重复 长期批量供应 —— 采用重组技术,可实现快速生产 首次实验即可成功 —— 经过大量验证确认了特异性 符合伦理标准 —— 产品不含动物成分
概述
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产品名称 -
描述 兔多克隆抗体 去Ki67 -
宿主 兔子 -
经测试应用 -
种属反应性 与反应: 老鼠,人类 预测可用于: 鼠,羊,兔,马,牛,狗,猪,猴,中国仓鼠,普通狨猴,叙利亚仓鼠 -
免疫原 合成肽。 这些信息是Abcam和/或其供应商的专有信息。 (肽可作为 ab15581 ) -
常规说明 Ab15580在ICC/IHC中进行了批量测试。 这种抗体可以使IHC-Fr的性能发生变化,但我们可以保证IHC-P的一致性。一些客户已经成功地在Western Blot中使用了ab15580。 更大分子量的蛋白质如Ki67可能更难在白细胞中检测到。 我们建议几个潜在的优化步骤:加载更多的蛋白质(20µg及以上),使用较低百分比的凝胶和/或三醋酸三酯凝胶,增加抗氧化剂以保持蛋白质的减少,减少转移缓冲液中的甲醇和增加SDS,以及增加转移时间和电压。 较大的蛋白质比较小的蛋白质更容易被降解,因此可能存在较低分子量的条带。 如需更多信息或支持,请联系我们的科学支持团队。 生命科学产业多年来一直处于可复制性危机中。 Abcam在解决这一问题上处于领先地位,我们的一系列重组单克隆抗体和敲除编辑的细胞株用于金标准验证。 请在购买前检查该产品是否满足您的需求。 如果您有任何问题、特殊要求或顾虑,请在购买前向我们发送询价和/或联系我们的支持团队。 本产品的推荐替代品可在下面找到,以及出版物、客户评论和问答
性能
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形式 液体 -
存放说明 在4°C下装运。在+4°C下短期储存(1-2周)。 交货时等分。 储存在-20°C或-80°C。避免冻融循环。 -
存储溶液 pH值:7.40 防腐剂:0.02%叠氮化钠 成分:PBS 浓度<1mg/ml的该产品批次可添加BSA作为稳定剂。 如果您需要有关特定批次配方的信息,请联系我们的科学支持团队,他们会很乐意为您提供帮助。 -
浓度信息加载。。。 -
纯度 免疫原亲和力纯化 -
克隆 多克隆 -
同种型 免疫球蛋白 -
研究领域
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接合试剂盒 -
免疫肽(阻断) -
同型控制 -
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应用
靶标
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功能 需要在核膜解体后保持单个有丝分裂染色体分散在细胞质中(PubMed:27362226)。 与有丝分裂染色体的表面,染色体周层有关,并覆盖了染色体表面的大部分(PubMed:27362226)。 通过形成空间和静电电荷屏障,防止染色体塌陷成单个染色质团:蛋白质具有高净电荷,充当表面活性剂,分散染色体并实现独立的染色体运动(PubMed:27362226)。 结合DNA,偏爱超螺旋DNA和AT丰富的DNA(PubMed:10878551)。 不影响有丝分裂染色体的内部结构(通过相似性)。 可能在染色质组织中起作用(PubMed:24867636)。 然而,目前尚不清楚它是在染色质组织中起直接作用,还是它在维持有丝分裂染色体分散方面的间接作用。 -
序列相似性 包含1个FHA域。 包含16个K167R重复。 包含1个PP1绑定域。 -
发展阶段 表达优先出现在细胞周期的G1、S、G2和M期,而G0期的细胞则无法检测到抗原(在蛋白质水平上)(PubMed:6206131)。 在G2期和有丝分裂期间(蛋白质水平)出现最高水平。 在间期,在核仁周围的纤维蛋白缺乏区形成纤维样结构(PubMed:2674163,PubMed:8799815)。 -
翻译后修饰 磷酸化。 有丝分裂中磷酸化过度(PubMed:10502411,PubMed:10653604)。 高磷酸化形式不结合DNA。 -
细胞定位 染色体。 核心。 核,核仁。 与有丝分裂染色体的表面,染色体周层有关,并覆盖有丝分裂染色体表面的大部分(PubMed:27362226)。 与G1期卫星DNA相关(PubMed:9510506)。 在间期与染色质紧密结合,当染色质与浓缩染色体表面结合时,染色质结合减少(PubMed:15896774,PubMed:22002106)。 主要定位于核周区的G1期,在后期,也可在整个核内部发现,主要局限于核基质(PubMed:22002106)。 -
UniProt提供的信息 -
数据库链接 Entrez基因: 4288 人类 Entrez基因: 17345 老鼠 Entrez基因: 246042 老鼠 奥米姆: 176741 人类 瑞士保护: P46013页 人类 瑞士保护: E9PVX6型 老鼠 瑞士保护: 问题61769 老鼠 单基因: 689823 人类
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别名 单克隆抗体ki67抗体鉴定抗原 单克隆抗体Ki-67抗体鉴定抗原 抗原KI-67抗体
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图片
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Mef1细胞ab15580染色Ki67。 细胞用100%甲醇固定(5min),用0.1%PBS-tritonx-100渗透5min,然后用1%BSA/10%正常山羊血清/0.3M甘氨酸在0.1%PBS-Tween中阻断1h。 然后在4°C下用0.5µg/ml的ab15580将细胞培养过夜 ab7291 ,小鼠单克隆[DM1A]与α-微管蛋白负荷对照。 然后用 ab150081号 山羊抗兔IgG-H&L多克隆次级抗体(Alexa Fluor ® 488),在1/1000稀释度下预吸附(以绿色显示)和 ab150120型 山羊抗小鼠IgG-H&L多克隆次级抗体(Alexa Fluor ® 594),在1/1000稀释度下预吸附(以伪红色显示)。 细胞核DNA用DAPI标记(蓝色)。 也适用于4%多聚甲醛固定的细胞(10分钟)。 图像是用高含量分析仪(Operetta CLS,Perkin Elmer)获得的,并显示了单个共焦截面。 -
HeLa细胞ab15580染色Ki67。 细胞用100%甲醇固定(5min),用0.1%PBS-tritonx-100渗透5min,然后用1%BSA/10%正常山羊血清/0.3M甘氨酸在0.1%PBS-Tween中阻断1h。 然后在4°C下用0.5µg/ml的ab15580将细胞培养过夜 ab7291 ,小鼠单克隆[DM1A]与α-微管蛋白负荷对照。 然后用 ab150081号 山羊抗兔IgG-H&L多克隆次级抗体(Alexa Fluor ® 488),在1/1000稀释度下预吸附(以绿色显示)和 ab150120型 山羊抗小鼠IgG-H&L多克隆次级抗体(Alexa Fluor ® 594),在1/1000稀释度下预吸附(以伪红色显示)。 细胞核DNA用DAPI标记(蓝色)。 也适用于4%多聚甲醛固定的细胞(10分钟)。 用高含量分析仪(Operetta CLS,Perkin Elmer)获得图像,并显示共焦截面的最大强度投影。 -
小鼠脾脏ab15580染色的IHC图像福尔马林固定石蜡包埋组织切片,在莱卡胶上进行 TM公司 系统采用标准方案B。用柠檬酸钠缓冲液(pH6)进行热介导抗原回收预处理20分钟。 然后在室温下用5µg/ml的ab15580培养15分钟。 用山羊抗兔生物素化二级抗体检测原发性,并用HRP结合ABC系统进行可视化。 用DAB作显色剂。 然后用苏木精复染切片并用DPX固定。 -
多聚甲醛固定兔细胞(视网膜)标记Ki67(绿色),使用1/200稀释度的ab15580,然后在ICC分析中使用驴抗兔Alexa Fluor®568二级抗体。 以正常驴血清为阻断剂,在4℃下作用15小时 组织浸泡在4%多聚甲醛中,在4摄氏度下过夜。 然后将组织包埋在10%琼脂糖中,在100微米处切片。 在开始免疫细胞化学之前,切片置于2N盐酸中1小时。 Ki-67(分裂细胞为红色)。 -
人脾Ki67染色的IHC图像福尔马林固定石蜡包埋组织切片,在Leica键上进行 TM公司 系统采用标准方案F。用柠檬酸钠缓冲液(pH6)进行热介导抗原回收预处理20分钟。 然后在室温下用1µg/ml的ab15580培养15分钟,并使用HRP共轭紧密聚合物系统进行检测。 用DAB作显色剂。 然后用苏木精复染切片并用DPX固定。 对于其他IHC染色系统(自动和非自动),客户应优化可变参数,如抗原回收条件、初级抗体浓度和抗体培养时间。 -
ab15580在野生型HAP1细胞(上图)和Ki67基因敲除的HAP1细胞(下图)中染色Ki67。 细胞用100%甲醇固定(5min),用0.1%Triton X-100渗透5min,然后用1%BSA/10%正常山羊血清/0.3M甘氨酸在0.1%PBS吐温中封闭1h。 然后用浓度为1μg/ml的ab15580对细胞进行培养 ab195889号 在1/250稀释度下(以伪红色显示)在+4°C下过夜,然后在室温下用 山羊抗兔IgG Alexa Fluor ® 488 ( ab150081号 )浓度为2μg/ml(以绿色显示)。 用DAPI标记细胞核DNA。 -
免疫组织化学(福尔马林/PFA固定石蜡切片)-抗Ki67抗体(ab15580) 图片由Xiang H.等人提供。Cell Discov。 2017年; 3: 17019年。 doi:10.1038/细胞盘。 2017.19根据Creative Commons许可证复制 http://creativecommons.org/licenses/by/4.0/。 在稳态、24和48天采集小鼠气管上皮共聚焦图像 h之后 2 受伤。 组织切片用UHRF1和增殖标记物Ki67共染色。 用ab15580在1:1的稀释度下染色Ki67 000 -
NADA(N-花生四烯酸多巴胺)处理的SK-N-SH细胞ab15580染色Ki67( ab120099号 ),由国际商会。 如文献所述,Ki67表达减少与NADA(N-花生四烯酸多巴胺)浓度增加相关。 细胞在37°C下在含有不同浓度的培养基中培养10分钟 ab120099号 在乙醇中,室温下用4%甲醛固定10分钟,室温下用含10%山羊血清、0.3 M甘氨酸、1%BSA和0.1%吐温的PBS封闭2小时。 在含有1%BSA和0.1%吐温的PBS中,在4℃下用ab15580(1µg/ml)对处理过的细胞进行染色。 A 山羊抗兔DyLight 488二级 抗体( ab96899号 )以1/250稀释度作为次级抗体。 细胞核用DAPI复染,呈蓝色。 -
荧光共聚焦显微镜(20x)观察小鼠嗅球,肾小球外层,显示Ki67免疫反应性(ab15580;1/1000;RT过夜,0.25%TX-100无阻滞步骤),使用次级山羊抗兔荧光抗体(Alexa fluro 488;RT时1/300 2h)。 -
ab15580用IHC-P(甲醛固定石蜡包埋切片)染色Ki67增殖标记物。 组织标本用甲醛固定,在25℃下用10%山羊血清封闭30分钟,在靶提取液中通过热调解进行抗原回收。 样本在25°C下用一级抗体1/5000(TBST)孵育1小时 -
ab15580用免疫组织化学法(IHC-P-多聚甲醛固定石蜡包埋切片)染色Ki67-增殖标记物。 组织用多聚甲醛固定,4%血清25℃封闭30分钟; 抗原回收是在柠檬酸缓冲液(pH6.0)中通过热介导的。 将样品与一级抗体(5µg/ml封闭缓冲液中)在4°C下培养16小时。使用德州红山羊抗兔IgG多克隆(1/100)作为次级抗体。 -
SK-N-SH细胞生长到融合状态,然后血清饥饿48小时,主要进入G0。 然后,将多聚甲醛固定,并以1/1000的稀释度用抗Ki67(ab15580)进行免疫荧光标记。 大多数细胞几乎没有或几乎没有Ki67染色,表明它们处于G0停滞期(红细胞)。 两个细胞显示强烈的核仁Ki67染色,表明它们仍在循环(绿色细胞)。 DNA用DAPI染色并显示为红色。 Ki67染色显示为绿色。 x 63倍放大。 在HeLa细胞的异步群体中也可以看到类似的结果。 Ki67染色定位于核仁周围和增殖细胞的整个核浆。 (此数据未显示,但可根据要求提供)。 -
ab15580at1/50染色人脐动脉内皮细胞。 用多聚甲醛固定并封闭组织,然后用皂甙渗透,用抗体孵育16h。 以FITC结合的山羊抗兔IgG作为次级抗体。 合并后的图像显示了指数细胞总数中表达Ki67的细胞。 -
ab15580染色人皮肤癌FFPE切片的IHC图像。 切片用压力锅热介导的抗原回收与柠檬酸钠缓冲液(pH6)在125°C下预处理30秒。切片与ab15580在1:200稀释度下在室温下培养1h,并使用HRP共轭聚合物系统进行检测。 用DAB作显色剂。 然后用苏木精复染切片并用DPX固定。 -
甲醛固定石蜡包埋小鼠肿瘤组织切片1/2000标记ab15580的免疫组化分析。 次级抗体为1/250稀释的生物素结合山羊多克隆载体。
数据表及文件
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SDS下载 -
数据表下载
文献 (2858个)
杨Y 等等。 维生素C通过抑制Notch3在长期培养过程中抑制牙周膜干细胞的衰老。 J细胞生理学 236:1237-1251(2021年)。 公共医疗:32662081 范思思 等等。 哺乳动物INDY在小鼠中的神经系统缺失模拟饮食限制诱导的记忆增强。 生物科学与医学科学杂志 76:50-56(2021年)。 公共医疗:32808644 A和A 等等。 消除NF-? 波形蛋白+基质细胞中的B信号减弱Barrett食管模型的肿瘤发生。 癌变 42:405-413(2021年)。 公共医疗:33068426 于S 等等。 circRNA-circ-MYBL2是一种新的肿瘤抑制因子和多发性骨髓瘤潜在的生物标志物。 休姆电池 34:219-228(2021年)。 公共医疗:33058028 张Q 等等。 MicroRNA-221通过直接靶向FBXW11和调控Wnt信号,促进骨肉瘤细胞增殖和抑制凋亡。 医学研究院 52:191-199(2021年)。 公共医疗:33131925