主要功能和细节
重组生产(无动物),实现高批次一致性和长期供应安全 兔单克隆[EPR2418Y]到IRF3 适用于:流式细胞周期(内部)、ICC/IF、WB、IHC-P 敲除已验证 反应对象:老鼠、人类
相关共轭物和制剂
(美国)
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产品名称 -
日本 兔单克隆抗体 [EPR2418Y]至IRF3 -
宿主 兔子 -
经测试应用 -
种属反应性 与反应: 老鼠,人类 -
免疫原 -
阳性对照 WB:A549、HeLa、Jurkat、THP-1、Daudi、HepG2全细胞裂解物。 人类胎儿心脏和肾脏裂解物。 小鼠心脏和脾脏裂解物,NIH/3T3全细胞裂解物。 IHC-P:人扁桃体,人宫颈鳞状细胞癌,小鼠脾脏。 ICC/IF:HeLa细胞 流量:U937细胞,HAP1-wt细胞。
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常规说明
性能
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形式 液体 -
存放说明 在4°C下装运。 短期储存在+4°C下(1-2周)。 交付时,等分。 长期储存于-20°C。 避免冷冻/解冻循环。 -
存储溶液 pH值:7.2 防腐剂:0.01%叠氮化钠 成分:40%甘油、0.05%BSA、59%PBS -
浓度信息加载。。。 -
纯度 蛋白质A纯化 -
克隆 单克隆 -
克隆编号 EPR2418Y型 -
同种型 免疫球蛋白G -
研究领域
相关产品
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替代版本 -
化验试剂盒 -
兼容的辅助设备 -
共轭试剂盒 -
免疫肽(阻断) -
同位素控制 -
KO细胞系 -
KO细胞裂解物 -
重组蛋白
美国
靶标
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功能 介导干扰素刺激反应元件(ISRE)启动子激活。 作为抗病毒活性的分子开关。 病毒感染过程中产生的DsRNA导致C末端丝氨酸/苏氨酸簇上的IRF3磷酸化。 这诱导构象变化,导致其二聚化、核定位并与CREBBP结合蛋白(CREBBP)结合形成dsRNA-activated factor 1(DRAF1),这是一种在ISRE控制下激活基因转录的复合物。 该复合物分别与IFN-α和IFN-β启动子上的IE和PRDIII区域结合。 IRF-3没有任何转录激活域。 -
组织特异性 在多种组织中组成性表达。 -
序列相似性 属于IRF家族。 包含1个IRF色氨酸五重复DNA结合域。 -
翻译后修饰 在许多丝氨酸残基上构成磷酸化。 C末端丝氨酸/苏氨酸簇在IKBKE和TBK1诱导下被磷酸化。 Ser-385和Ser-386可能被特异性磷酸化以响应诱导。 另一种模型认为,396到405之间的五个丝氨酸/苏氨酸残基被磷酸化,以应对病毒感染。 牛痘病毒蛋白E3抑制IRF3的磷酸化和随后的活化。 泛素化; 泛素化涉及RBCK1导致蛋白酶体降解。 多泛素化; 泛素化涉及TRIM21,导致蛋白酶体降解。 由HERC5介导的ISG,导致持续的IRF3激活,并通过破坏PIN1结合来抑制IRF3泛素化。 IRF3的磷酸化状态不会改变ISGylation。 -
细胞定位 细胞质。 核心。 穿梭于细胞质和细胞核之间,出口是主要影响因素。 激活后,IRF3与CREBBP相互作用阻止其向细胞质输出。 -
UniProt提供的信息 -
数据库链接 -
别名 IIAE7抗体 干扰素调节因子3抗体 IRF 3抗体
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图片
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所有车道: 稀释1/1000的抗IRF3抗体[EPR2418Y](ab68481) 车道1: Jurkat细胞裂解物 车道2: MCF7细胞裂解物 3号车道: 野生型HeLa细胞裂解物 车道4: IRF3敲除HeLa细胞裂解物 每车道20µg的裂解液/蛋白质。 在还原条件下进行。 预测的带宽大小: 47千Da 1-4车道: 合并信号(红色和绿色)。 绿色-在50 kDa下观察到ab68481。 红色-装载控制, 约8245 在37 kDa时观察到。 ab68481在野生型HeLa细胞中与IRF3反应。 敲除细胞系时观察到信号丢失 约255345 (敲除细胞裂解物 约263784 )已使用。 对野生型和IRF3敲除样品进行SDS-PAGE分析。 ab68481和抗-GAPDH抗体[6C5]-负荷控制( 约8245 )分别在4°C下以1/1000稀释度和1/20000稀释度培养过夜。 用山羊抗兔IgG H&L(IRDye ® 800CW)预吸附床( ab216773号 )和山羊抗鼠IgG H&L(IRDye ® 680RD)预吸附床( 约216776 )二级抗体在成像前在室温下以1:20000稀释1小时。 -
4%对甲醛固定、0.1%Triton X-100渗透HeLa(宫颈腺癌人上皮细胞)细胞的免疫荧光分析,在1/100稀释度下用ab68481标记IRF3。 山羊抗兔IgG(Alexa Fluor®488)( 约150077 )以1/400稀释液作为次级抗体(绿色)。 共焦图像显示HeLa细胞上的细胞质。 核反染为DAPI(蓝色)。 用检测到Tubulin 约7291 (抗Tubulin小鼠单克隆抗体)在1/500和 ab150120型 (AlexaFluor®594山羊抗鼠次要),稀释度为1/500(红色)。 阴性对照如下:; 1.ab68481在1/100稀释后 ab150120型 (AlexaFluor®594山羊抗鼠次要),稀释度为1/500。 2 约7291 (抗Tubulin小鼠单克隆抗体),稀释1/500,然后 约150077 (Alexa Fluor®488 Goat Anti-Rabbit IgG H&L),稀释度为1/400。 -
重叠直方图显示用ab68481染色的HAP1野生型(绿线)和HAP1-IRF3敲除细胞(红线)。 将细胞用80%甲醇(5分钟)(左血管翳)或4%甲醛(10分钟)(右血管翳)固定,然后用0.1%PBS Triton X-100透化15分钟。然后将细胞在1xPBS/10%正常山羊血清中孵育,以阻断非特异性蛋白-蛋白相互作用,然后在22°C下用抗体(ab68481,0.1µg/ml)孵育30分钟。 使用的二级抗体是Alexa Fluor ® 488山羊抗兔IgG(H&L)预吸收( 约150081 )1/2000稀释,在22°C下保持30分钟。 一种兔IgG同型控制抗体( 约172730 )在与第一抗体相同的浓度和条件下使用(HAP1野生型-黑线,HAP1-IRF3敲除-灰线)。 未标记样本也用作对照(为了简单起见,未显示此行)。 使用50 mW蓝光激光器(488nm)和530/30带通滤波器采集了超过5000个事件。 注:我们建议使用MeOH而不是PFA固定细胞,以获得最佳结果。 -
所有车道: 稀释1/1000的抗IRF3抗体[EPR2418Y](ab68481) 车道1: 野生型A549细胞裂解物 车道2: IRF3敲除A549细胞裂解物 每车道20µg的裂解液/蛋白质。 在还原条件下进行。 预测的带宽大小: 47千Da 观察到的频带大小: 50千Da 为什么实际的频带大小与预测的不同? 1-2车道: 合并信号(红色和绿色)。 绿色-在50 kDa下观察到ab68481。 红色-加载控制 约8245 (小鼠抗GAPDH抗体[6C5])。 western blot显示ab68481与野生型A549细胞中的IRF3反应,在IRF3敲除细胞系中观察到信号丢失 约267098 (IRF3敲除细胞裂解物 约256954 ). 对野生型和IRF3敲除的A549细胞裂解物进行SDS-PAGE。 TBS-T(0.1%吐温)中3%牛奶中的膜被堵塞 ® )在与ab68481和 约8245 (小鼠抗GAPDH抗体[6C5])在4°C下过夜,稀释率分别为1/1000和1/20000。 印迹与山羊抗兔IgG H&L(IRDye)孵育 ® 800CW)预吸收床( ab216773号 )和山羊抗鼠IgG H&L(IRDye ® 680RD)预吸收床( 约216776 )二级抗体在成像前在室温下以1:20000稀释1小时。 -
所有车道: 稀释1/1000的抗IRF3抗体[EPR2418Y](ab68481) 车道1: 野生型A549细胞裂解物 车道2: IRF3敲除A549细胞裂解物 每车道20µg的裂解液/蛋白质。 在还原条件下进行。 预测的带宽大小: 47千Da 观察到的频带大小: 50千Da 为什么实际的频带大小与预测的不同? 1-2车道: 合并信号(红色和绿色)。 绿色-在50 kDa下观察到ab68481。 红色-加载控制 约8245 (小鼠抗GAPDH抗体[6C5])。 western blot显示ab68481与野生型A549细胞中的IRF3反应,在IRF3敲除细胞系中观察到信号丢失 约267097 (IRF3敲除细胞裂解物 约256953 ). 对野生型和IRF3敲除的A549细胞裂解物进行SDS-PAGE。 TBS-T(0.1%吐温)中3%牛奶中的膜被堵塞 ® )在与ab68481和 约8245 (小鼠抗GAPDH抗体[6C5])在4°C下过夜,稀释率分别为1/1000和1/20000。 印迹与山羊抗兔IgG H&L(IRDye)孵育 ® 800CW)预吸收床( ab216773号 )和山羊抗鼠IgG H&L(IRDye ® 680RD)预吸收床( 约216776 )二级抗体在成像前在室温下以1:20000稀释1小时。 -
所有车道: 稀释1/1000的抗IRF3抗体[EPR2418Y](ab68481) 车道1: 野生型HAP1细胞裂解物 车道2: IRF3敲除HAP1细胞裂解物 3号车道: HeLa细胞裂解物 车道4: Jurkat细胞裂解物 每车道20µg的裂解液/蛋白质。 预测的带宽大小: 47千Da 1-4车道: 合并信号(红色和绿色)。 绿色-在50 kDa下观察到ab68481。 红色-装载控制, 约8245 ,在37 kDa下观察到。 在野生型HAP1细胞中,ab68481与IRF3反应,并伴有额外的交叉反应带。 检测IRF3敲除样品时未观察到条带。 对野生型和IRF3敲除样品进行SDS-PAGE分析。 ab68481和 约8245 (GAPDH的负荷控制)分别稀释至1/1000和1/10000,并在4°C下培养过夜。 用山羊抗兔IgG H&L(IRDye ® 800CW)预吸附床( ab216773号 )和山羊抗鼠IgG H&L(IRDye ® 680RD)预吸附床( 约216776 )二级抗体在成像前在室温下以1/10000稀释1小时。 -
所有车道: 稀释1/1000的抗IRF3抗体[EPR2418Y](ab68481) 车道1: 人胎心裂解物 车道2: 人胎肾裂解物 每车道10µg的裂解液/蛋白质。 次要 所有车道: 抗狂犬病IgG(HRP),针对1/1000稀释度的非还原型IgG 预测的带宽大小: 47千Da 阻塞和稀释缓冲液:5%NFDM/TBST -
所有车道: 1/10000稀释的抗-IRF3抗体[EPR2418Y](ab68481) 车道1: THP-1(人单核细胞白血病细胞)全细胞裂解物 车道2: HepG2(人肝癌)全细胞裂解物 3号车道: Daudi(人Burkitt淋巴瘤细胞系)全细胞裂解物 每车道10µg的裂解液/蛋白质。 次要 所有车道: 羊抗狂犬病IgG,(H+L),过氧化物酶结合1/1000稀释 预测的带宽大小: 47千Da 观察到的频带大小: 51千Da 为什么实际的频带大小与预测的不同? 阻塞和稀释缓冲液:5%NFDM/TBST -
所有车道: 1/10000稀释的抗-IRF3抗体[EPR2418Y](ab68481) 车道1: HeLa(人宫颈腺癌上皮细胞)全细胞裂解物 车道2: Jurkat(外周血T细胞白血病细胞)全细胞裂解物 每车道20µg的裂解液/蛋白质。 次要 所有车道: 羊抗狂犬病IgG,(H+L),过氧化物酶结合1/1000稀释 预测的带宽大小: 47千Da 观察到的频带大小: 51千Da 为什么实际的频带大小与预测的不同? 阻塞和稀释缓冲液:5%NFDM/TBST -
所有车道: 稀释1/1000的抗IRF3抗体[EPR2418Y](ab68481) 车道1: 小鼠心脏裂解物 车道2: 小鼠脾脏裂解物 3号车道: NIH/3T3(鼠胚成纤维细胞)全细胞裂解物 每车道10µg的裂解液/蛋白质。 次要 所有车道: 抗狂犬病IgG(HRP),针对1/1000稀释度的非还原型IgG 预测的带宽大小: 47千Da 观察到的频带大小: 47千Da 阻塞和稀释缓冲液:5%NFDM/TBST 在小鼠身上观察到的分子量比在人类身上观察到的分子量略小,这一点得到了文献的支持。 -
2%多聚甲醛固定的U937(人类组织细胞淋巴瘤细胞)细胞的细胞内流式细胞术分析,以1/160稀释度(红线)用ab68481标记IRF3。 使用的二级抗体是羊抗兔IgG(FITC),稀释度为1/150。 同型对照为兔单克隆IgG(黑线)。 未标记的对照是未与一级和二级抗体孵育的细胞(蓝线)。 -
用ab68481以1/500稀释度标记IRF3的石蜡包埋人扁桃体,然后用预先稀释的HRP聚合物对兔/小鼠IgG进行免疫组织化学分析。 阴性对照组使用PBS代替一级抗体。 苏木精反染。 在开始IHC染色方案之前,使用Tris/EDTA缓冲液pH 9.0进行热介导抗原回收。 -
石蜡包埋人宫颈鳞状细胞癌免疫组织化学分析,用ab68481以1/500稀释标记IRF3,然后用预先稀释的HRP聚合物检测兔/鼠IgG。 阴性对照组使用PBS代替一级抗体。 苏木精反染。 在开始IHC染色方案之前,使用Tris/EDTA缓冲液pH 9.0进行热介导抗原回收。 -
用ab68481以1/500稀释度标记IRF3,然后用预先稀释的HRP聚合物对兔/小鼠IgG进行石蜡包埋小鼠脾脏的免疫组织化学分析。 阴性对照组使用PBS代替一级抗体。 苏木精反染。 在开始IHC染色方案之前,使用Tris/EDTA缓冲液pH 9.0进行热介导抗原回收。
数据表及文件
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数据表下载
文 (57)
赵M 等。 应激颗粒蛋白G3BP1促进cGAS的预缩合,以便对DNA作出快速反应。 EMBO代表 23:e53166(2022)。 公共医学:34779554 黄YH 等。 热休克蛋白60限制线粒体dsRNA的释放以抑制小鼠肝脏炎症和改善非酒精性脂肪性肝病。 国际分子科学杂志 23:不适用(2022年)。 公共医学:35009003 陈Q 等。 截短的PARP1介导RNA聚合酶III的ADP-核糖基化以促进细胞凋亡。 细胞发现 8:3 (2022). 公共医学:35039483 Ma C公司 等。 p21通过干扰病毒聚合酶复合物和上调I型干扰素信号来限制甲型流感病毒。 公共科学图书馆-病理学 18:e1010295(2022)。 公共医学:35180274 陈雷 等。 溶瘤寨卡病毒促进肿瘤内T细胞浸润,提高胶质母细胞瘤的免疫治疗效果。 Mol-Ther Oncolytics公司 24:522-534 (2022). 公共医学:35229030