主要功能和细节
重组生产(无动物),具有高批次一致性和长期供应安全性 兔单克隆抗体[EPR16588]到Iba1 适用于:流式细胞周期(内部)、IHC-P、WB、ICC/IF 反应对象:小鼠、大鼠、人类
相关共轭物和制剂
概述
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产品名称 -
描述 兔单克隆抗体 [EPR16588]至Iba1 -
宿主 兔子 -
特异性 对于ab178846,Abcam建议摄入3%的牛奶,以达到WB中最清洁的效果。 使用BSA进行阻止会产生略高的背景。 Iba1是大脑中相对较少的蛋白质,在脾脏中含量更丰富(PMID:8912632,PMID:29232670)。 我们建议装载更多的脑裂解物或使用更低稀释度的抗体检测脑相关裂解物中的信号 -
经测试应用 -
种属反应性 以下内容: 小鼠、大鼠、人类 -
免疫原 合成肽。 此信息为Abcam和/或其供应商专有。 -
阳性对照 WB:HL-60、THP-1、U937、RAW 264.7和NR8383全细胞裂解物; 人、小鼠和大鼠脾脏裂解物; 小鼠睾丸和肝脏裂解物; 大鼠和小鼠海马和脑组织溶解。 IHC-P:人类大脑皮层,人类海马; 大鼠和小鼠正常脑组织。 流式细胞仪(内部):U937细胞,Raw264.7。 ICC/IF:大鼠海马混合胶质细胞。
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常规说明
性能
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形式 液体 -
存放说明 在4°C下装运。 短期储存在+4°C下(1-2周)。 交付时,等分。 长期储存于-20°C。 避免冷冻/解冻循环。 -
存储溶液 防腐剂:0.01%叠氮化钠 成分:59%PBS、40%甘油、0.05%BSA -
浓度信息加载。。。 -
纯度 蛋白质A纯化 -
克隆 单克隆 -
协调 EPR16588型 -
同种型 免疫球蛋白G -
新冠肺炎疫苗
相关产品
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替代版本 -
兼容的辅助设备 -
同种型对照 -
重组蛋白 -
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应用
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靶标
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功能 增强膜皱褶和RAC活化的肌动蛋白结合蛋白。 增强LCP1的肌动蛋白结合活性。 结合钙。 在RAC信号传导和吞噬作用中发挥作用。 可能在巨噬细胞激活和功能中发挥作用。 促进血管平滑肌细胞和T淋巴细胞的增殖。 促进淋巴细胞迁移。 在血管炎症中发挥作用。 -
组织特异性 在T淋巴细胞和外周血单个核细胞中检测到。 -
序列相似性 包含2个EF-hand域。 -
翻译后修饰 丝氨酸残基磷酸化。 -
细胞定位 细胞质>细胞骨架。 细胞投射>皱褶膜。 与膜皱褶和吞噬部位的肌动蛋白细胞骨架相关。 -
UniProt提供的信息 -
数据库链接 Entrez基因: 199 人类 Entrez基因: 11629 鼠标 Entrez基因: 29427 老鼠 Omim公司: 601833 人类 瑞士保护银行: 第55008页 人类 瑞士保护银行: O70200型 鼠标 瑞士保护银行: 第5009页 老鼠 尤尼金: 76364 人类
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别名 AIF 1抗体 AIF-1抗体 Aif1抗体
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图片
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抗Iba1 ab178846与组织清除试剂盒CUBIC一起使用( 约316246 )和3D组织染色试剂盒–CUBIC( ab316248型 )穿透、染色和清除整个小鼠大脑。 了解有关的更多信息 组织清除试剂盒、试剂和协议 旨在更容易对整个大脑进行染色,并从每个有价值的组织样本中获取更多数据。 对于整个小鼠大脑,我们建议从3.5 ug的ab178846开始,使用2.34µg的Fab片段二级抗体,在3D染色之前创建抗体复合物(有关详细信息,请参阅协议)。 染色过程中使用了添加剂A。 样品是用光学显微镜成像的 . -
福尔马林固定石蜡包埋人小脑的免疫组织化学分析,以1/4000的稀释度用ab178846标记Iba1。 在Ventana DISCOVERY ULTRA(Roche Tissue Diagnostics)仪器上使用ChromoMap DAB(RUO)IHC检测试剂盒和抗兔HQ和抗HQ HRP进行免疫染色。 用100°C,pH 8.5的DISCOVERY细胞调节液(CC1)进行热介导抗原回收24分钟。 ab178846在37°C下孵育16分钟。切片用苏木精II进行复染。 图像插页显示仅二级抗体对照组无染色。 -
FFPE正常人小脑组织的染色体多重免疫组化染色。 公元177487年 ,抗NeuN DAB染色原。 Ab68428,抗GFAP紫色染色原和ab178846,抗Iba1蓝绿色染色原加苏木精复染。 在Roche Ventana Discovery Ultra仪器上进行显色免疫染色。 将切片脱蜡,并用CC1溶液孵育24分钟100°C。 然后按顺序进行3轮染色 公元177487年 (1/600),ab178846(1/4000) 约68428 (1/1000). 在染色轮之间,使用Ultra CC2溶液在100°C下进行8分钟的抗体变性,以避免交叉反应。 先用抗兔HQ开发信号,然后用抗-HQ HRP结合Chromomap DAB试剂盒、Discovery紫色或Discovery-青色系和苏木精II复染。 -
流式细胞术重叠直方图显示左侧Raw264.7阳性细胞和右侧NIH3T3阴性细胞用ab178846染色(红线)。 用4%甲醛固定细胞(10分钟),然后用0.1%PBS-Triton X-100渗透15分钟。然后将细胞培养在含有10μg/ml抗CD16/CD32和10%正常山羊血清的1x PBS中,以阻断FC受体和非特异性蛋白-蛋白质相互作用,然后是抗体(ab178846)(1x 10 6 在22°C下,以0.2μg/ml(1/9850)的浓度在100μl中放置30分钟。 将二级抗体山羊抗狂犬病IgG H&L(Alexa Fluor®488)预吸附液在1/4000的温度下于22°C孵育30分钟 同位素对照抗体(黑线)为重组兔IgG,单克隆[EPR25A]-同位素对照,使用的浓度和条件与主要抗体相同。 未标记样本(蓝线)也用作对照。 使用50 mW蓝光激光器(488nm)和525/40带通滤波器采集了超过5000个事件。 -
所有车道: 1/1000稀释的抗-Iba1抗体[EPR16588](ab178846) 车道1: 小鼠脾组织裂解物 车道2: 小鼠脑组织裂解物 3号车道: 小鼠海马组织裂解物 车道4: 大鼠脾组织裂解物 车道5: 大鼠脑组织裂解物 车道6: 大鼠海马组织裂解物 每车道20µg的裂解液/蛋白质。 次要 所有车道: 山羊抗狂犬病IgG H&L(HRP)( ab97051型 )稀释1/20000 预测的带宽大小: 17千Da 观察到的频带大小: 17千Da 暴露时间: 40秒 阻塞缓冲液和浓度: 5%NFDM/TBST。 稀释缓冲液和浓度: 5%NFDM/TBST。 IBA1是大脑中相对较少的蛋白质,在脾脏中含量更丰富(PMID:8912632,PMID:29232670)。 我们建议装载更多的脑裂解物或使用更低稀释度的抗体检测脑相关裂解物中的信号。 约181602 是 用作加载控制。 -
使用标准方案F在Leica-Bond™系统上进行的大鼠正常脑福尔马林固定石蜡包埋组织切片中Iba1染色的IHC图像。使用柠檬酸钠缓冲液(pH6,表位提取溶液1)使用热介导抗原提取预处理切片20分钟。 然后在室温下用ab178846,1/2000稀释液培养该切片15分钟,并使用HRP共轭紧凑聚合物系统进行检测。 DAB被用作显色剂。 然后用苏木精对切片进行复染,并用DPX固定。 对于其他IHC染色系统(自动化和非自动化),客户应优化可变参数,如抗原回收条件、初级抗体浓度和抗体孵育时间。 -
人类正常海马福尔马林固定石蜡包埋组织切片中Iba1染色的IHC图像,使用标准方案F在Leica Bond™系统上进行。该切片使用柠檬酸钠缓冲液(pH6,表位检索溶液1)进行热介导抗原检索预处理20分钟。 然后在室温下用ab178846,1/2000稀释液培养该切片15分钟,并使用HRP共轭紧凑聚合物系统进行检测。 DAB被用作显色剂。 然后用苏木精对切片进行复染,并用DPX固定。 对于其他IHC染色系统(自动化和非自动化),客户应优化可变参数,如抗原回收条件、初级抗体浓度和抗体孵育时间。 -
所有车道: 抗Iba1抗体[EPR16588](ab178846) 车道1: 小鼠睾丸 车道2: 小鼠肝脏 3号车道: 大鼠睾丸 车道4: 大鼠肝脏 预测的带宽大小: 17千Da -
细胞内流式细胞术分析2%多聚甲醛固定的U937(人类组织细胞淋巴瘤细胞系)细胞,在1/160稀释度下用ab178846标记Iba1(红线)。 使用的二级抗体是羊抗兔IgG(FITC),稀释度为1/150。 同型对照为兔单克隆IgG(黑线)。 未标记的对照是未与一级和二级抗体孵育的细胞(蓝线)。 -
在0.02µg/ml的THP-1(人单核细胞白血病单核细胞)裂解液上测试不同批次的ab178846。每条车道上装载15µg裂解液。 在15 kDa下观察到的谱带。 -
小鼠正常大脑福尔马林固定石蜡包埋组织切片中Iba1染色的IHC图像,使用标准方案B在Leica Bond™系统上进行。该切片使用柠檬酸钠缓冲液(pH6,表位检索溶液1)进行热介导抗原检索预处理20分钟。 然后在室温下用ab178846,1/2000稀释液培养15分钟。 用山羊抗兔生物素化二级抗体检测初级抗体,并用HRP偶联ABC系统进行可视化。 DAB被用作显色剂。 然后用苏木精对切片进行复染,并用DPX固定。 对于其他IHC染色系统(自动化和非自动化),客户应优化可变参数,如抗原回收条件、初级抗体浓度和抗体孵育时间。 -
所有车道: 1/500稀释的抗Iba1抗体[EPR16588](ab178846) 车道1: 0.1µg人Iba1重组蛋白 车道2: HEK-293(来自胚胎肾的人上皮细胞系)全细胞裂解液(20µg) 3号车道: A431(人表皮样癌细胞系)20µg全细胞裂解液 车道4: NIH/3T3(小鼠embyro成纤维细胞系)全细胞裂解液(30µg) 车道5: 20µg人脾组织裂解物 车道6: 30µg小鼠脾组织裂解物 7号车道: 30µg大鼠脾脏组织裂解物 第8车道: U937(人类组织细胞淋巴瘤细胞系)全细胞裂解物,30µg 9号车道: 20µg的MOLT-4(人淋巴细胞白血病细胞系)全细胞裂解液 10号车道: 30µg的THP-1(人单核细胞白血病细胞系)全细胞裂解液 11号车道: THP-1全细胞裂解物,PMA处理30µg 车道12: RAW 264.7(用Abelson小鼠白血病病毒转化的小鼠巨噬细胞系)30µg全细胞裂解液 13号车道: C6(大鼠胶质瘤细胞系)全细胞裂解液(30µg) 14号车道: NR8383全细胞裂解物,30µg 使用ECL技术开发。 在还原条件下进行。 预测的带宽大小: 17千Da 暴露时间: 1分钟 与BSA相比,Abcam建议在牛奶中封闭,以清洁背景较低的斑点 该印迹是在MOPS缓冲系统下使用4-12%Bis-Tris凝胶生成的。 凝胶在200V下运行60分钟,然后在30V下转移到硝化纤维素膜上70分钟。 然后将膜封闭一小时,然后在4°C下与ab178846(抗Iba1抗体;1/500稀释)孵育18小时。 使用检测抗体结合 约97040 (HRP标记的山羊抗鼠IgG)在室温下1:50000稀释1小时,并使用ECL显影液进行可视化 约133406 . -
使用ab178846对原代大鼠海马混合胶质细胞(从P2大鼠海马脑区制备,由BrainBits,LLC从Transnetyx Tissue获得,目录号SDPHP4m)中的Iba-1进行免疫荧光染色,DIV4。 用4%甲醛固定细胞(10分钟),用0.1%Triton-X-100(PBS中)渗透5分钟,然后用1%BSA/10%正常山羊血清/0.3M甘氨酸在0.1%PBS-Tween中封闭1小时。 然后将细胞在+4°C下以0.1μg/ml的ab178846和 约4674 ,抗GFAP抗体,1/1000稀释。 然后将细胞与 约150081 、山羊抗狂犬病IgG H&L(Alexa Fluor ® 488)以1/1000稀释度预吸附(以绿色显示)和 约150176 、山羊抗鸡IgY H&L(Alexa Fluor ® 594)以1/1000稀释度预吸附(以红色显示)。 用DAPI标记细胞核DNA(以蓝色显示)。 使用Perkin Elmer Operetta HCA采集图像,并显示共焦截面的最大强度投影。 抗体ab178846使用甲醇固定(100%,5分钟)得出了类似的结果。 -
在ICC/IF分析中,0.1%Triton-X 100渗透性副甲醛固定小鼠细胞小胶质细胞,使用ab178846在1/500稀释度下标记Iba1(绿色)。 -
所有车道: 抗Iba1抗体[EPR16588](ab178846),稀释度为1/10000 车道1: THP-1(人单核细胞白血病细胞系)全细胞裂解物 车道2: U937(人组织细胞淋巴瘤细胞系)全细胞裂解物 3号车道: 人脾全细胞裂解物 每车道10µg的裂解液/蛋白质。 次要 所有车道: 羊抗狂犬病IgG,(H+L),过氧化物酶结合1/1000稀释 使用ECL技术开发。 预测的带宽大小: 17千Da 观察到的频带大小: 15千Da 为什么实际的频带大小与预测的不同? 封闭缓冲液和浓度:5%NFDM/TBST 稀释缓冲液和浓度:5%NFDM/TBST -
石蜡包埋的人大脑皮层组织的免疫组织化学分析,以1/2000稀释度的ab178846标记Iba1,显示胶质细胞的细胞质和细胞核染色。 苏木精反染。 兔/鼠IgG的预稀释HRP聚合物用作次级抗体。 图中还显示了阴性对照。 在开始IHC染色方案之前,使用Tris/EDTA缓冲液pH 9.0进行热介导抗原回收。 -
1/2000稀释的抗-Iba1抗体[EPR16588](ab178846)+10µg的HL-60(人早幼粒细胞白血病细胞系)全细胞裂解物 次要 羊抗狂犬病IgG,(H+L),过氧化物酶结合1/1000稀释 预测的带宽大小: 17千Da 观察到的频带大小: 10、15千Da 为什么实际的频带大小与预测的不同? 封闭缓冲液和浓度:5%NFDM/TBST。 稀释缓冲液和浓度: 5%NFDM/TBST。 根据序列分析,ab178846识别出2种亚型,预测分子量分别为17KDa和11KDa。
数据表及文件
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合格证书
文献 (285)
萨波那拉E 等。 肝富含亮氨酸重复序列的G蛋白偶联受体4和5的缺失促进非酒精性脂肪性肝病。 美国病理学杂志 193:161-181 (2023). 公共医学:36410420 喇叭口M 等。 延迟NLRP3炎症小体抑制可改善小鼠亚急性卒中进展。 J神经炎症 20:4 (2023). 公共医学:36600259 梁Z 等。 长期摄入高脂肪饮食导致认知能力下降,伴随Tau过度磷酸化和小胶质细胞活化。 营养物 15:不适用(2023年)。 公共医学:36615907 史密斯DC 等。 阿尔茨海默病风险基因Abi3位点的缺失会导致小鼠肥胖和全身代谢紊乱。 前老化神经科学 14:1035572 (2022). 公共医学:36620768 杨F 等。 胰高血糖素样肽1受体激活通过促进线粒体吞噬减轻糖尿病小鼠的抑郁样行为抑制小胶质细胞焦下垂。 营养物 15:不适用(2022年)。 公共医学:36615696