主要功能和细节
重组生产(无动物),实现高批次一致性和长期供应安全 亨廷丁兔单克隆抗体[EPR5526] 适用人群:IHC-FoFr、ICC/IF、WB、IHC-P 敲除已验证 反应对象:小鼠、大鼠、人类
相关共轭物和制剂
概述
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产品名称 -
描述 兔单克隆抗体 [EPR5526]至亨廷顿 -
宿主 兔子 -
经测试应用 -
种属反应性 与反应: 老鼠、老鼠、人 -
完 合成肽。 此信息为Abcam和/或其供应商专有。 -
阳性对照 WB:SH-SY5Y、HeLa、HAP1、PC-12和Neuro-2a全细胞裂解物; 小鼠和大鼠大脑溶解。 IHC-P:人大脑皮层和星形细胞瘤组织; 小鼠和大鼠睾丸组织。 ICC/IF:Neuro-2a、SH-SY5Y和HeLa细胞系。 IHC-Fr:小鼠和大鼠大脑。
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常规说明
性能
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形式 液体 -
存放说明 在4°C下装运。 短期储存在+4°C下(1-2周)。 交付时,等分。 长期储存于-20°C。 避免冷冻/解冻循环。 -
中国 pH值:7.20 防腐剂:0.01%叠氮化钠 成分:40%甘油(甘油,甘油),59%PBS,0.05%BSA -
浓度信息加载。。。 -
纯度 蛋白质A纯化 -
克隆 (伊拉克) -
克隆编号 EPR5526 -
同种型 免疫球蛋白G -
研究领域
相关产品
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替代版本 -
兼容的辅助设备 -
同种型对照 -
KO细胞系 -
KO细胞裂解物 -
重组蛋白
应用
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靶标
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功能 可能在微管介导的转运或囊泡功能中发挥作用。 -
美国 在大脑皮层表达(蛋白质水平)。 广泛表达,在大脑中表达水平最高(神经纤维、静脉曲张和神经末梢)。 在大脑中,主要存在于小脑皮层、新皮层、纹状体和海马结构。 -
疾病相关 HTT缺陷是亨廷顿病(HD)的病因[MIM:143100]。 HD是一种常染色体显性神经退行性疾病,其特征是不自主运动(舞蹈病)、一般运动障碍、精神障碍和痴呆。 该病通常发生在生命的第三或第四个十年,症状逐渐恶化,导致10至20年内死亡。 起病和临床病程取决于多聚糖蛋白重复扩张的程度,更长的扩张导致发病更早和更严重的临床表现。 每10000名欧洲血统的人中就有1人患有HD。 亨廷顿病的神经病理学表现出神经元丢失的独特模式,尤其是在尾状核和壳核(纹状体)。 -
序列相似性 属于亨廷顿家族。 包含10次HEAT重复。 -
结构域 N末端富含Gln-和Pro-rich结构域具有很大的构象灵活性,可能存在于字母螺旋构象、随机线圈构象和扩展构象的波动平衡中。 -
翻译后修饰 被聚谷氨酰胺拉伸下游的质外蛋白裂解。 由此产生的N末端片段具有细胞毒性,并刺激细胞凋亡。 聚谷氨酰胺扩张的形式被SYVN1特异性泛素化,从而促进其蛋白酶体降解。 -
细胞定位 细胞质。 核心。 突变体亨廷顿蛋白与AKAP8L在亨廷顿病神经元的核基质中共定位。 -
UniProt提供的信息 -
数据库链接 Entrez基因: 3064 人类 Entrez基因: 15194 鼠标 Entrez基因: 29424 老鼠 奥密姆: 143100 人类 奥密姆: 613004 人类 瑞士保护银行: 第42858页 人类 瑞士保护银行: 第42859页 鼠标 瑞士保护银行: 第51111页 老鼠
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别名 AI256365抗体 C430023I11Rik抗体 HD抗体
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图片
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ab109115染色野生型HeLa细胞中的HTT(顶部面板)和HTT敲除HeLa电池(底部面板,可用作 约265976 ). 细胞用100%甲醇固定(5分钟),用0.1%Triton X-100渗透5分钟,然后用1%BSA/10%正常山羊血清/0.3M甘氨酸在0.1%PBS-Tween中封闭1小时。 然后用1.0µg/mL的ab109115培养细胞,并 约7291 以1.0µg/mL在+4°C下过夜,然后在室温下用山羊抗兔IgG二级抗体(Alexa Fluor ® 488) ( 约150081 )(以绿色显示)和山羊对小鼠IgG(Alexa Fluor)的二级抗体 ® 594) ( 约150120 )(以红色显示)均为1/1000。 用DAPI标记细胞核DNA(以蓝色显示)。 使用高含量分析仪(Operetta CLS、Perkin Elmer)采集图像,并显示共焦截面的最大强度投影。 -
所有车道: 抗-Huntingtin抗体[EPR5526](ab109115),稀释度为1/10000 车道1: 野生型HeLa细胞裂解物 车道2: HTT敲除HeLa细胞裂解物 每车道20µg的裂解液/蛋白质。 在还原条件下进行。 预测的带宽大小: 348千帕 观察到的频带大小: 348千Da 1-2车道: 合并信号(红色和绿色)。 绿色-在348 kDa时观察到ab109115。 红色-抗α-管蛋白抗体[DM1A]-负载控制( 约7291 )在50 kDa时观察到。 western blot显示ab109115与野生型HeLa细胞中的Huntingtin反应。 敲除细胞系时观察到信号丢失 约265976 (敲除细胞裂解物 约256946 )被使用。 对野生型HeLa和HTT敲除的HeLa细胞裂解物进行SDS-PAGE。 在室温下,将膜在0.1%的TBST和3%的脱脂奶粉中封闭1小时。 ab109115和抗α-管蛋白抗体[DM1A]-负荷控制( 约7291 )在4°C下过夜,分别以1比10000和1比20000稀释。 用山羊抗兔IgG H&L(IRDye ® 800CW)预吸附( 邮编:216773 )和山羊抗鼠IgG H&L(IRDye ® 680RD)预吸附床( 约216776 )二级抗体在成像前在室温下以1:20000稀释1小时。 -
ab109115染色野生型HeLa细胞中的HTT(顶部面板)和HTT敲除HeLa电池(底部面板,可用作 约265976 ). 用4%甲醛固定细胞(10分钟),用0.1%Triton X-100渗透5分钟,然后用1%牛血清/10%正常山羊血清/0.3M甘氨酸在0.1%PBS-Tween中封闭1小时。 然后将细胞与ab109115以1.0µg/mL孵育 约7291 以1.0µg/mL在+4°C下过夜,然后在室温下用山羊抗兔IgG二级抗体(Alexa Fluor ® 488) ( 约150081 )(以绿色显示)和山羊对小鼠IgG(Alexa Fluor)的二级抗体 ® 594) ( 约150120 )(以红色显示)均为1/1000。 用DAPI标记细胞核DNA(以蓝色显示)。 使用高含量分析仪(Operetta CLS、Perkin Elmer)采集图像,并显示共焦截面的最大强度投影。 -
小鼠小脑组织切片的免疫组织化学(冷冻)分析,用纯化的抗体109115在1/100(13.4µg/ml)时标记亨廷顿蛋白。 山羊抗兔IgG(Alexa Fluor ® 488, 约150077 )以at1/1000(2µg/ml)作为二级抗体。 切片用4%多聚甲醛固定,并用0.2%Triton X-100渗透。 阴性对照:PBS代替一抗。 DAPI(蓝色)用作核染色。 使用柠檬酸钠缓冲液(10mM柠檬酸盐pH 6.0+0.05%吐温-20)进行热介导抗原回收。 -
4%对甲醛固定、0.1%Triton X-100渗透的免疫荧光分析 Neuro-2a(小鼠神经母细胞瘤细胞)细胞用纯化的ab109115标记亨廷顿蛋白,稀释1/1000,然后用山羊抗兔IgG(Alexa Fluor ® 488) ( 约150077 )稀释度为1/1000的二级抗体(绿色)。 共聚焦图像显示Neuro-2a细胞系上的细胞核和细胞质染色。 核反染为DAPI(蓝色)。 用检测到微管蛋白 约7291 (抗Tubulin小鼠单克隆抗体),稀释度为1/1000 约150120 (AlexaFluor®594山羊抗鼠次要),稀释度为1/1000(红色)。 阴性对照如下: 1 约191472 稀释1/1000,然后 约150120 (Alexa Fluor公司 ® 594羊抗鼠次级),稀释度为1/1000。 2 约7291 (抗Tubulin小鼠单克隆抗体),稀释1/1000,然后 约150077 (Alexa Fluor公司 ® 488山羊抗狂犬病IgG H&L),稀释度为1/1000。 -
所有车道: 抗-Huntingtin抗体[EPR5526](ab109115),稀释度为1/10000 车道1: 野生型HAP1全细胞裂解物 车道2: HTT敲除HAP1全细胞裂解物 3号车道: SH-SY5Y全细胞裂解液 车道4: HeLa全细胞裂解物 每车道20µg的裂解液/蛋白质。 预测的带宽大小: 348千Da 车道1-4: 合并信号(红色和绿色)。 绿色-在348 kDa时观察到ab109115。 红色-装载控制, 约18058 ,在130 kDa下观察到。 ab109115被证明在野生型HAP1细胞中特异性识别HTT以及其他交叉反应带。 提取HTT敲除样品时未观察到条带。 对野生型和HTT敲除样品进行SDS-PAGE分析。 未净化ab109115和 约18058 (小鼠抗Vinculin负荷控制)分别在4°C、1/10000稀释度和1/10000稀释率下培养过夜。 用山羊抗兔IgG H&L(IRDye ® 800CW)预吸收床 邮编:216773 和山羊抗鼠IgG H&L(IRDye ® 680RD)预吸收床 约216776 二级抗体在成像前在室温下以1/10000稀释1小时。 -
石蜡包埋人星形细胞瘤标记亨廷顿蛋白的免疫组织化学分析,纯化的ab109115稀释1/100,然后用山羊抗狂犬病IgG H&L(HRP)( ab97051型 )1/500。 苏木精反染。 星形细胞瘤癌细胞的核染色。 在开始IHC染色方案之前,使用Tris/EDTA缓冲液pH 9.0进行热介导抗原回收。 -
小鼠大脑组织切片的免疫组织化学(冷冻)分析,用纯化的ab109115标记1/100(13.4µg/ml)的亨廷顿蛋白。 山羊抗兔IgG(Alexa Fluor ® 488, 约150077 )使用1/1000(2µg/ml)作为第二抗体。 切片用4%多聚甲醛固定,并用0.2%Triton X-100渗透。 阴性对照:PBS代替一抗。 DAPI(蓝色)用作核染色。 使用柠檬酸钠缓冲液(10mM柠檬酸盐pH 6.0+0.05%吐温-20)进行热介导抗原回收。 -
所有车道: 抗-Huntingtin抗体[EPR5526](ab109115),1/5000稀释(纯化) 车道1: SH-SY5Y(人骨髓细胞神经母细胞瘤)全细胞裂解物 车道2: HeLa(人宫颈腺癌上皮细胞)全细胞裂解物 3号车道: PC-12(大鼠肾上腺嗜铬细胞瘤)全细胞裂解物 车道4: Neuro-2a(小鼠神经母细胞瘤细胞)全细胞裂解物 每车道10µg的裂解液/蛋白质。 次要 所有车道: 山羊抗狂犬病IgG H&L(HRP)( ab97051型 )稀释度为1/1000 预测的带宽大小: 348千帕 观察到的频带大小: 348千帕 暴露时间: 1秒 封闭和稀释缓冲液和浓度:5%NFDM/TBST -
石蜡包埋人大脑皮层组织标记亨廷顿蛋白的免疫组织化学分析,用纯化的ab109115在1/100稀释后加上山羊抗狂犬病IgG H&L(HRP)( ab97051型 )1/500。苏木精反染。 观察了人大脑皮层神经元的核染色。 在开始IHC染色方案之前,使用Tris/EDTA缓冲液pH 9.0进行热介导抗原回收。 -
所有车道: 1/50000稀释(纯化)的抗人绒毛膜促性腺激素抗体[EPR5526](ab109115) 车道1: 小鼠脑裂解物 车道2: 大鼠脑裂解物 每车道20µg的裂解液/蛋白质。 次要 所有车道: 山羊抗狂犬病IgG H&L(HRP)( ab97051型 )稀释度为1/1000 预测的带宽大小: 348千帕 观察到的频带大小: 348千帕 暴露时间: 30秒 封闭和稀释缓冲液和浓度:5%NFDM/TBST -
4%对甲醛固定、0.1%Triton X-100渗透的免疫荧光分析 SH-SY5Y(人骨髓细胞神经母细胞瘤)细胞用纯化的ab109115标记亨廷顿蛋白,稀释1/1000,然后用山羊抗兔IgG(Alexa Fluor ® 488) ( 约150077 )稀释度为1/1000的二级抗体(绿色)。 共聚焦图像显示SH-SY5Y细胞系的细胞核和细胞质染色。 核反染为DAPI(蓝色)。 用检测到微管蛋白 约7291 (抗Tubulin小鼠单克隆抗体),稀释度为1/1000 约150120 (Alexa Fluor公司 ® 594羊抗鼠次级),稀释度为1/1000(红色)。 阴性对照如下: 1 约191472 稀释1/1000后 约150120 (Alexa Fluor公司 ® 594羊抗鼠次级),稀释度为1/1000。 2 约7291 (抗Tubulin小鼠单克隆抗体),稀释1/1000,然后 约150077 (Alexa Fluor公司 ® 488山羊抗狂犬病IgG H&L),稀释度为1/1000。 -
石蜡包埋小鼠睾丸标记亨廷顿蛋白的免疫组织化学分析(纯化ab109115,1/100稀释,然后用山羊抗狂犬病IgG H&L(HRP))( ab97051型 )1/500。 苏木精反染。 小鼠睾丸生精细胞的细胞质染色。 在开始IHC染色方案之前,使用Tris/EDTA缓冲液pH 9.0进行热介导抗原回收。 -
石蜡包埋大鼠睾丸标记亨廷顿蛋白的免疫组织化学分析(纯化ab109115,1/100稀释,然后用山羊抗狂犬病IgG H&L(HRP))( ab97051型 )1/500。 苏木精反染。 大鼠睾丸生精细胞的弱细胞质染色。 在开始IHC染色方案之前,使用Tris/EDTA缓冲液pH 9.0进行热介导抗原回收。
数据表及文件
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SDS下载 -
数据表下载
文献 (31)
阿南贝赫H 等。 亨廷顿蛋白与来自TgHD和KI-HD亨廷顿病猪模型血浆和人血浆的小细胞外囊泡共分离。 国际分子科学杂志 23:无(2022)。 公共医学:35628406 于D 等。 CK2α-质体和α-同核蛋白致病性功能相互作用在亨廷顿病中介导突触失调。 神经病理学学报 10:83 (2022). 公共医学:35659303 匈牙利 等。 一种基于植物的突变体亨廷顿蛋白模型驱动的GTPCH和DHFR表达受损的发现。 细胞分子生命科学 79:553 (2022). 公共医学:36251090 Geijtenbeek千瓦 等。 HD小鼠大脑中PA28αβ活化减少与细胞模型中mHTT聚集增加相关。 公共科学图书馆一号 17:e0278130(2022)。 公共医学:36574405 Cheong RY公司 等。 BACHD小鼠模型中突变型亨廷顿蛋白失活对亨廷顿病相关行为的影响。 神经病理应用神经生物学 47:564-578 (2021). 公共医学:33330988