概述
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产品名称 -
产品概述 CRISPR/Cas9实现的敲除细胞裂解物。 -
亲代细胞系 希拉牌手表 -
有机体 人类 -
突变描述 通过使用CRISPR/Cas9实现敲除,在外显子2中插入1bp,在外显子2中缺失2bp,在外显子2中缺失4bp。 -
通道编号 <20 -
淘汰验证 Sanger测序,Western Blot(WB) -
重组说明 为了用作白细胞对照,将冻干液重新悬浮在50µL LDS*样品缓冲液中,使最终浓度达到2 mg/ml。对于还原条件,我们建议最终浓度为0.1 M DTT。 *不建议将SDS样品缓冲液用于这些冻干溶血物。 -
说明 裂解液制备: 我们的裂解产物是使用RIPA缓冲液制成的,我们在其中添加了蛋白酶抑制剂鸡尾酒和磷酸酶抑制剂鸡尾液(比例:300:100:10)。 这意味着感兴趣的蛋白质变性了。 如果您需要天然形式的蛋白质,请使用活细胞版本-找到 在这里 。请参阅我们的裂解协议,了解我们裂解产物的制备方法的更多详细信息。 用户存储说明: 冻干液可在4°C下储存。 复原后,在-20°C下短期保存或-80°C下长期保存。 获取数千种由常用癌症细胞系产生的敲除细胞裂解物。 有关敲除细胞裂解物的更多信息,请参阅此处。 Abcam没有也不打算申请客户使用含有欧洲授权清单(附件十四)物质的产品的REACH授权。 我们的客户有责任检查REACH授权和任何其他相关授权在其预期用途中应用的必要性。 本产品受The Broad Institute、ERS Genomics limited和Sigma-Aldrich Co.LLC的有限使用许可,并采用专利技术开发。 有关许可证和专利的详细信息,请参阅我们的 有限使用许可证 和 专利页 . -
经测试应用
性能
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存放说明 储存于-80°C。 请参阅协议。 -
年 1套 ab255504-人KRT8敲除HeLa细胞裂解物 1 x 100微克 ab255552-人野生型HeLa细胞裂解物 1 x 100微克 -
研究领域 -
单元格类型 上皮的 -
疾病 腺癌 -
性别 女性 -
STR分析 釉原蛋白X D5S818:11、12 D13S317:12、13.3 D7S820:8、12 第16天第539页:第9页,第10页 vWA:16、18 TH01:7型 TPOX:8、12 CSF1PO:9、10
靶标
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功能 与KRT19一起,有助于将收缩装置与横纹肌中的肌萎缩蛋白联系起来。 -
组织特异性 在含有肌营养不良蛋白和精蛋白的结构中,观察到肌肉纤维在肌膜上的肌浆共聚体中积聚。表达于口腔的牙龈粘膜和硬腭。 -
疾病相关 肝硬化 -
序列相似性 属于中间丝族。 -
翻译后修饰 丝氨酸残基上的磷酸化在EGF刺激和有丝分裂过程中增强。 Ser-74磷酸化在角蛋白丝重组中起重要作用。 O-糖基化。 多个位点的O-GlcNA酰化通过诱导蛋白酶体降解增加溶解度,降低稳定性。 O-糖基化(O-GlcNAcylated),以细胞周期依赖的方式。 -
细胞定位 细胞质。 细胞核,核质。 细胞核基质。 -
UniProt提供的信息 -
别名 卡D2 对照8 CK-8型
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KO细胞系 -
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应用
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图片
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车道1: A431细胞裂解物(20µg) 车道2: MCF7细胞裂解物(20µg) 3号车道: 野生型HeLa细胞裂解物(20µg) 车道4: KRT8敲除HeLa细胞裂解物(20µg) 车道1-4: 合并信号(红色和绿色)。 绿色- 约53280 在55 kDa时观察到。 红色-装载控制, 约8245 在37kDa下观察到。 约53280 显示在野生型HeLa细胞中与细胞角蛋白8反应。 敲除细胞系时观察到信号丢失 255400英镑 使用敲除细胞裂解物ab263785。 对野生型和细胞角蛋白8敲除样品进行SDS-PAGE分析。 约53280 和抗-GAPDH抗体[6C5]-负荷控制( 约8245 )分别在4°C、万分之一稀释度(用于未纯化用途,稀释度为1/25000-1/50000)和万分之一稀释度下孵育过夜。 用山羊抗兔IgG H&L(IRDye ® 800CW)预吸附床( ab216773号 )和山羊抗鼠IgG H&L(IRDye ® 680RD)预吸附床( 约216776 )二级抗体在成像前在室温下以1:20000稀释1小时。 -
车道1: A431细胞裂解物(20µg) 车道2: MCF7细胞裂解物(20µg) 3号车道: 野生型HeLa细胞裂解物(20µg) 车道4: KRT8敲除HeLa细胞裂解物(20µg) 车道1-4: 合并信号(红色和绿色)。 绿色- 约9023 在55 kDa时观察到。 红色-装载控制, 约181602 在37kDa下观察到。 约9023 在野生型HeLa细胞中显示与细胞角蛋白8反应。 敲除细胞系时观察到信号丢失 255400英镑 使用敲除细胞裂解物ab263785。 对野生型和细胞角蛋白8敲除样品进行SDS-PAGE分析。 约9023 和抗GAPDH抗体EPR16891]-负载控制( 约181602 )分别在4°C下以1/1000稀释度和1/20000稀释度培养过夜。 用山羊抗鼠IgG H&L(IRDye ® 800CW)预吸附床( 约216772 )和山羊抗狂犬病IgG H&L(IRDye ® 680RD)预吸附床( ab216777号 )二级抗体在成像前在室温下以1:20000稀释1小时。 -
等位基因-1:4bp外显子2缺失 -
等位基因2:外显子2中2 bp缺失 -
等位基因-3:1bp外显子2插入
实验方案
数据表及文件
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SDS下载 -
数据表下载