主要功能和细节
一次性90分钟协议 灵敏度:20.6 pg/ml 范围:125 pg/ml-8000 pg/ml 样品类型:细胞培养提取物、细胞培养上清液、Cit血浆、EDTA血浆、牛奶、血清、组织提取物 检测方法:比色法 分析类型:三明治(定量) 反应对象:人类、恒河猴
(美国)
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产品名称 -
检测方法 比色法 -
精确度 批次内 样品 n个 平均值 标准偏差 变异系数% 血清 3 5% 批次间 样品 n个 平均值 标准偏差 变异系数% 血清 5 8.3% -
样品类型 细胞培养上清液、牛奶、血清、细胞培养提取物、组织提取物、EDTA血浆、Cit血浆 -
检测类型 三明治(定量) -
灵敏度 20.6微微克/毫升 -
范围 125微微克/毫升- 8000微微克/毫升 -
回收率 特定样本回收率 样品类型 平均% 范围 细胞培养上清液 102 90% - 117% 鲜奶 102 91% - 111% 血清 93 87% - 102% 细胞培养提取物 89 80% -105% 组织提取物 90 80% - 131% EDTA血浆 86 81% - 94% Cit血浆 99 87% - 120% -
检测时间 1小时 3000万 -
骤 一步分析法 -
种属反应性 与反应: 人类、恒河猴 不与反应: 奶牛 -
产品概述 人纤维结合蛋白ELISA试剂盒(ab219046)是一种单洗90分钟夹心ELISA试剂,用于定量测定细胞培养上清液、cit血浆、edta血浆、牛奶、血清、组织提取物和细胞培养提取物中的纤维结合蛋白。 它使用我们专有的SimpleStep ELISA®技术。 以20.6 pg/ml的灵敏度定量人纤维结合蛋白。
SimpleStep ELISA®技术采用与亲和标签偶联的捕获抗体,该亲和标签被用于涂覆我们的SimpleStep ELISA®板的单克隆抗体识别。 这种夹心ELISA方法允许在一个步骤中形成抗体分析夹心复合物,显著缩短了分析时间。 有关更多详细信息,请参阅图像部分中的SimpleStep ELISA®协议摘要。 我们的SimpleStep ELISA®技术具有以下优点:
-单次刷洗方案将分析时间缩短至90分钟或更短 -高级抗体的高灵敏度、特异性和再现性 -在生物样本中得到充分验证 -96块钢板可分解成12 x 8个井带
384孔单步ELISA®微孔板( 约203359 )可作为SimpleStep ELISA®试剂盒提供的96-well微孔板的替代品使用。
检测特异性 该试剂盒仅识别血清、血浆(柠檬酸盐和EDTA)、牛奶、细胞培养上清液以及细胞和组织提取物样品中的天然和重组人纤维结合蛋白。
交叉反应性 在检测的工作范围内制备重组人Anastelin,并检测交叉反应性。 未观察到交叉反应。 物种反应性 该试剂盒可识别人类纤维结合蛋白。
其他物种的反应性是通过测量各种物种1/100000的血清(小鼠、大鼠、奶牛)或血浆(猕猴)样品来确定的,插入人类标准曲线中的蛋白质浓度, 并将插值浓度表示为在相同稀释度下测定的人类血清或血浆中蛋白质浓度的百分比。
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说明 纤维结合蛋白是一种存在于细胞外基质和循环血浆中的大糖蛋白。 纤维连接蛋白在许多细胞粘附和迁移相关过程中都很重要,包括伤口愈合、胚胎发生和神经再生。 纤维连接蛋白的差异表达见于冠心病、肾小球疾病和肿瘤细胞转移。 该蛋白包含胶原蛋白、肝素和纤维蛋白的结合位点,是几种整合素粘附受体的特异配体。 纤维结合蛋白以二聚体或多聚体的形式存在。 Abcam没有也不打算申请客户使用含有欧洲授权清单(附件十四)物质的产品的REACH授权。 我们的客户有责任检查REACH授权和任何其他相关授权在其预期用途中应用的必要性。 -
平台 预涂层微孔板(12 x 8孔板条)
性能
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存放说明 储存于+4°C。 请参阅协议。 -
组件 1 x 96次测试 10X清洗缓冲液PT(ab206977) 1 x 20毫升 50X细胞提取增强剂溶液(ab193971) 1 x 1毫升 5X细胞提取缓冲液PTR(ab193970) 1 x 10毫升 抗体稀释剂4BR 1 x 6毫升 10X人纤维结合蛋白捕获抗体 1 x 600微升 10X人纤连蛋白检测抗体 1 x 600微升 人纤维结合蛋白冻干重组蛋白 2瓶 平板密封件 1台 样品稀释剂NS(ab193972) 1 x 50毫升 单步预涂96孔微孔板(ab206978) 1台 停止解决方案 1 x 12毫升 TMB开发解决方案 1 x 12毫升 -
研究领域 -
功能 纤维结合蛋白结合细胞表面和各种化合物,包括胶原蛋白、纤维蛋白、肝素、DNA和肌动蛋白。 纤维连接蛋白参与细胞粘附、细胞运动、调理、伤口愈合和细胞形状的维持。 通过纤维连接蛋白-纤维生成细胞介导的基质组装过程参与成骨细胞的压实,对成骨细胞矿化至关重要。 参与成骨细胞对I型胶原沉积的调节。 Anastellin结合纤维连接蛋白并诱导纤维形成。 这种纤维粘连蛋白聚合物被称为超纤维粘连素,具有增强的粘附性能。 阿那替林和超纤连蛋白均抑制肿瘤生长、血管生成和转移。 Anastellin激活p38 MAPK并抑制溶血磷脂信号传导。 -
组织特异性 血浆FN(可溶性二聚体形式)由肝细胞分泌。 细胞FN(二聚体或交联多聚体形式)由成纤维细胞、上皮细胞和其他细胞类型制成,以纤维状沉积在细胞外基质中。尿液中发现Ugl-Y1、Ugl-Y2和Ugl-Y3。 -
疾病相关 肾小球疾病伴纤维连接蛋白沉积2 -
序列相似性 包含12个纤维连接蛋白I型结构域。 包含2个纤维连接蛋白II型结构域。 包含16个纤维连接蛋白III型结构域。 -
发展阶段 Ugl-Y1、Ugl-Y2和Ugl-Y3存在于0至17岁的尿液中。 -
翻译后修饰 硫酸盐。 尚不清楚Thr-2064和Thr-2065中的两个或一个是否为糖基化。 在谷氨酰胺和赖氨酸残基的ε-氨基之间形成由转谷氨酰胺酶如F13A或TGM2介导的共价交联,形成均聚物和杂聚物(例如纤维蛋白原-纤连蛋白、胶原-纤连蛋白杂聚物)。 FAM20C在细胞外培养基中磷酸化。 蛋白质水解过程产生C末端NC1肽,即阿那斯汀。 -
细胞定位 分泌的细胞外基质。 -
UniProt提供的信息 -
别名 CIG公司 冷不溶性球蛋白 冷不溶性球蛋白
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替代版本
图片
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绘制了背景数据值(平均值+/-SD)。 -
样品稀释剂NS中的人纤维结合蛋白标准曲线示例。 如前所述制备纤维结合蛋白标准曲线。 原始数据值显示在表中。 绘制了背景数据值(平均值+/-SD)。 -
根据纤维结合蛋白标准曲线插值并校正样品稀释度,重复测量纤维结合蛋白的浓度。 未稀释样品如下:血清1/20000,血浆(柠檬酸盐)1/20000和血浆(EDTA)1/40000。 绘制插值稀释因子校正值(平均值+/-SD,n=2)。 血清中纤维连接蛋白的平均浓度为126.5µg/mL,血浆(柠檬酸盐)为141.5µg/mL,血浆(EDTA)为232.1µg/mL。 -
绘制了背景数据值(平均值+/-SD)。 -
1X细胞提取缓冲液PTR中的人纤维结合蛋白标准曲线示例。 如前所述制备纤维结合蛋白标准曲线。 原始数据值显示在表中。 绘制了背景数据值(平均值+/-SD)。 -
人纤维连接蛋白单步ELISA标准曲线比较 ® 领先竞争对手的试剂盒和传统ELISA试剂盒。 SimpleStep ELISA试剂盒显示出相当的灵敏度。 -
根据纤维结合蛋白标准曲线插值并校正样品稀释度,重复测量纤维结合蛋白的浓度。 未稀释样品如下:牛奶1/100,HepG2细胞培养上清液1/2000。 绘制插值稀释因子校正值(平均值+/-SD,n=2)。 牛奶中纤维连接蛋白的平均浓度为502.9 ng/mL,HepG2细胞培养上清液中为9683 ng/mL。 -
基于25μg/mL提取量的人HepG2细胞提取液样品、基于100μg/mL提取物量的SW 480细胞提取样品和基于5μg/mL萃取量的U87-MG细胞提取物样品中天然纤维结合蛋白的内插浓度。 两次测量纤维结合蛋白的浓度,并根据纤维结合蛋白标准曲线进行插值,并针对样品稀释进行校正。 绘制插值稀释因子校正值(平均值+/-SD,n=2)。 HepG2细胞提取物中的平均纤连蛋白浓度为7085 pg/mL,SW 480细胞提取物中的平均纤连蛋白浓度为6314 pg/mL,U87-MG细胞提取物中的平均纤连蛋白浓度为1749 pg/mL。 -
人体肝组织提取物中天然纤维结合蛋白的内插浓度基于100μg/mL提取物负荷,心脏组织提取物基于100μg/mL提取物负荷,骨骼肌基于100μg/kL提取物负荷、结肠组织提取物基于5μg/mL提取负荷,胎盘组织提取物基于1.25μg/mL提取物负荷。 两次测量纤维结合蛋白的浓度,并根据纤维结合蛋白标准曲线进行插值,并针对样品稀释进行校正。 绘制插值稀释因子校正值(平均值+/-SD,n=2)。 肝组织提取物中纤维连接蛋白的平均浓度为7634 pg/mL,心脏组织提取物为4910 pg/mL、骨骼肌组织提取物为4278 pg/mL;结肠组织提取物为2684 pg/mL和胎盘组织提取物为1224 pg/mL。 -
绘制插值稀释因子校正值(平均值+/-SD,n=2)。 纤维连接蛋白的平均浓度为146.2µg/mL,范围为35.99–319.2µg/mL。 -
通过计算零个标准品重复的平均值并添加2个标准偏差,然后外推相应的浓度,确定MDD。 -
在三种不同稀释液中测量纤维结合蛋白的浓度,一式两份,根据纤维结合蛋白标准曲线进行插值,并针对样品稀释进行校正。 插值稀释因子校正值以每毫克提取物中纤维结合蛋白的ng为单位绘制(平均值+/-SD,n=3)。 HepG2细胞提取物中纤维连接蛋白的浓度为271.8 ng/mg,SW 480细胞提取物为65.52 ng/mg, 胎盘组织提取物样品中为998.8 ng/mg。 -
稀释线性是根据标准曲线的插值确定的。 稀释线性定义了一个样品浓度区间,在该区间内,内插目标浓度与样品稀释度成正比。 在血清、血浆、脱脂母乳和细胞培养上清液(SN)样品中以2倍稀释系列测定天然纤维结合蛋白。 在样品稀释剂NS中进行样品稀释。 -
在以下生物样品中以2倍稀释系列测量天然纤连蛋白。 样品稀释在1X细胞提取缓冲液PTR中进行。 -
在以下生物样品中以2倍稀释系列测量天然纤连蛋白。 样品稀释在1X细胞提取缓冲液PTR中进行。 -
SimpleStep ELISA技术允许在一个步骤中形成抗体-抗原复合物,将检测时间缩短至90分钟。 一次将样品或标准品和抗体混合物加入孔中,孵育、洗涤并加入最终基质。 有关详细的分步指南,请参阅协议。
实验方案
数据表及文件
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SDS下载 -
数据表下载
文献 (5)
刘X 等人。 在糖尿病肾病小鼠模型中,NGAL基因敲除通过增强氧化应激和纤维化加重肾小管间质损伤。 实验治疗学 21:321 (2021). 公共医学:33732294 秦D 等人。 Gremlin介导TGF诱导的人类视网膜色素上皮细胞中促纤维化基因的诱导。 实验治疗学 19:2353-2359 (2020). 公共医学:32104303 荣格S 等人。 植入材料和表面对人脂肪基质细胞细胞/基质附着模式和强度的影响。 国际分子科学杂志 21:不适用(2020年)。 公共医学:32526920 塞霍夫斯基LJ 等人。 水纤维结合蛋白与视网膜分支静脉阻塞患者黄斑水肿严重程度和视力相关:蛋白质组研究。 投资眼科视觉科学 61:6 (2020). 公共医学:33270842 纳拉亚南K 等人。 血统特异性外泌体可以覆盖细胞外基质介导的人类间充质干细胞分化。 生物材料 182:312-322 (2018). 公共医学:30153612