概述
-
产品名称 -
产品概述 CRISPR/Cas9实现的敲除细胞裂解物。 -
亲代细胞系 希拉牌手表 -
有机体 人类 -
突变描述 利用CRISPR/Cas9实现敲除,纯合子:外显子3中1 bp缺失。 -
通道编号 <20 -
淘汰验证 Sanger测序,Western Blot(WB) -
重组说明 为了用作白细胞对照,将冻干液重新悬浮在50µL LDS*样品缓冲液中,使最终浓度达到2 mg/ml。对于还原条件,我们建议最终浓度为0.1 M DTT。 *不建议将SDS样品缓冲液用于这些冻干溶血物。 -
说明 裂解液制备: 我们的裂解产物是使用RIPA缓冲液制成的,我们在其中添加了蛋白酶抑制剂鸡尾酒和磷酸酶抑制剂鸡尾液(比例:300:100:10)。 这意味着感兴趣的蛋白质变性了。 如果您需要天然形式的蛋白质,请使用活细胞版本-找到 在这里 。请参阅我们的裂解协议,了解我们裂解产物的制备方法的更多详细信息。 用户存储说明: 冻干液可在4°C下储存。 复原后,在-20°C下短期保存或-80°C下长期保存。 获取数千种由常用癌症细胞系产生的敲除细胞裂解物。 有关敲除细胞裂解物的更多信息,请参阅此处。 Abcam没有也不打算申请客户使用含有欧洲授权清单(附件十四)物质的产品的REACH授权。 我们的客户有责任检查REACH授权和任何其他相关授权的必要性,以供其预期用途。 本产品受The Broad Institute和ERS Genomics limited的有限使用许可,并采用专利技术开发。 有关有限使用许可证和相关专利的详细信息,请参阅我们的 有限使用许可证 和 专利页 . -
经测试应用
性能
-
存放说明 储存于-80°C。 请参阅协议。 -
组件 1套 ab255460-人CTNNB1敲除HeLa细胞裂解物 1 x 100微克 ab255552-人类野生型HeLa细胞裂解物 1 x 100微克 -
研究领域 -
单元格类型 上皮的 -
疾病 腺癌 -
性别 女性 -
STR分析 釉原蛋白X D5S818:11,12 D13S317:12,13.3 D7S820:8、12 D16S539:9、10 vWA:16、18 TH01:7型 TPOX:8、12 CSF1PO:9、10
靶标
-
功能 典型Wnt信号通路的关键下游成分。 在缺乏Wnt的情况下,与AXIN1、AXIN2、APC、CSNK1A1和GSK3B形成复合物,促进N末端Ser和Thr残基的磷酸化,并通过BTRC泛素化CTNNB1,随后被蛋白酶体降解。 在Wnt配体的存在下,CTNNB1不是泛素化的,而是聚集在细胞核中,在细胞核中充当TCF/LEF家族转录因子的辅激活剂,从而激活Wnt应答基因。 参与细胞粘附的调节。 大多数β-catenin定位于细胞膜,是E-cadherin/catenin粘附复合物的一部分,拟将钙粘蛋白偶联到肌动蛋白细胞骨架。 -
组织特异性 在几种毛囊细胞类型中表达:基底和外周基质细胞,以及外根鞘和内根鞘细胞。 以冒号表示。 -
疾病相关 CTNNB1缺陷与结直肠癌(CRC)相关[MIM:114500]。 注:CTNNB1的激活突变具有致癌活性,导致肿瘤发展。 体细胞突变存在于各种肿瘤类型中,包括结肠癌、卵巢癌和前列腺癌、肝母细胞瘤(HB)、肝细胞癌(HCC)。 乙型肝炎表面抗原是一种恶性胚胎性肿瘤,主要影响生命前三年的幼儿。 CTNNB1缺陷是毛瘤(PTR)的原因[MIM:132600]; 一种常见的良性皮肤肿瘤。 CTNNB1缺陷是髓母细胞瘤(MDB)的一个原因[MIM:155255]。 MDB是一种恶性的、侵袭性的小脑胚胎性肿瘤,在儿童中最常见。 CTNNB1缺陷是卵巢癌(OC)易感性的一个原因[MIM:167000]。 卵巢癌起源于卵巢组织的常见恶性肿瘤。 尽管已经描述了许多卵巢肿瘤的组织学类型,但上皮性卵巢癌是最常见的形式。卵巢癌通常无症状,即使是晚期疾病,其公认的症状和体征也是模糊的。 因此,大多数患者被诊断患有晚期疾病。 注=涉及CTNNB1的染色体畸变见于涎腺多形性腺瘤,这是涎腺最常见的良性上皮肿瘤。 用PLAG1易位t(3;8)(p21;q12)。 -
序列相似性 属于beta-catenin家族。 包含12个ARM重复。 -
翻译后修饰 GSK3B的磷酸化需要另一激酶预先磷酸化Ser-45。 然后,磷酸化从Thr-41进行到Ser-37和Ser-33。 EGF刺激酪氨酸磷酸化。 Tyr-654上的磷酸化降低CDH1结合并增强TBP结合。 当GSK3B磷酸化时,SCF(BTRC)E3连接酶复合物泛素化,导致其降解。 被包含UBE2D1、SIAH1、CACYBP/SIP、SKP1、APC和TBL1X的E3泛素连接酶复合物泛素化,导致其随后的蛋白酶体降解。 -
细胞定位 细胞质。 核心。 细胞质>细胞骨架。 细胞连接>粘附连接。 细胞连接。 细胞膜。 当其不稳定(高水平磷酸化)或与CDH1结合时为细胞质。 当其稳定时转移到细胞核(低水平磷酸化)。 与GLIS2和MUC1的相互作用促进核移位。 与EMD的相互作用抑制核定位。 -
UniProt提供的信息 -
别名 b-连环蛋白 β连环蛋白 连环蛋白
查看所有内容
相关产品
-
KO细胞系 -
相关产品
应用
|
|
图片
-
阻隔和稀释缓冲液及浓度:Intercept®(TBS)阻隔缓冲液用等体积0.1%TBST稀释 观察到的分子量与文献中描述的一致(PMID:16288032)。 车道1: 野生型HeLa细胞裂解物(20µg) 车道2: CTNNB1敲除HeLa细胞裂解物(20µg) 1-2车道: 合并信号(红色和绿色)。 绿色- 约246504 在92 kDa下观察到。 红色-加载控制 约8245 (小鼠单克隆[6C5]到GAPDH)在36 kDa时观察到。 约246504 抗β-连环蛋白(非磷酸(活性)S37/T41)抗体[EPR23969-131]显示与野生型HeLa细胞中的β-连环素特异性反应。 敲除细胞系时观察到信号丢失 ab255352号 使用敲除细胞裂解物ab263756。 对野生型和β-连环蛋白敲除样品进行SDS-PAGE分析。 约246504 和抗-GAPDH抗体[6C5]-负荷控制( 约8245 )分别在4°C下以1/1000稀释度和1/20000稀释度培养过夜。 用山羊抗兔IgG H&L(IRDye®800CW)预吸附液开发印迹( ab216773号 )和山羊抗鼠IgG H&L(IRDye®680RD)预吸附床( 约216776 )二级抗体在成像前在室温下以万分之一的比例稀释1小时。 观察到大约45kDa的额外带。 -
车道1: 野生型HeLa细胞裂解物(20µg) 车道2: CTNNB1敲除HeLa细胞裂解物(20µg) 1-2车道: 合并信号(红色和绿色)。 绿色- 约32572 在86 kDa下观察到。 红色-加载控制 约8245 在37 kDa时观察到。 约32572 western blot显示重组抗β-连环蛋白抗体[E247]-ChIP级与野生型HeLa细胞中的CTNNB1特异性反应。 敲除细胞系时观察到信号丢失 ab255352号 使用敲除细胞裂解物ab263756。 对野生型和CTNNB1基因敲除样品进行SDS-PAGE分析。 在室温下,将膜在0.1%的TBST和3%的脱脂奶粉中封闭1小时。 约32572 和抗-GAPDH抗体[6C5]-负荷控制( 约8245 )在4 ° C分别为1/500稀释度和1/20000稀释度。 用山羊抗兔IgG H&L(IRDye ® 800CW)预吸附床( ab216773号 )和山羊抗鼠IgG H&L(IRDye ® 680RD)预吸附床( 约216776 )二级抗体在成像前在室温下以1:20000稀释1小时。 -
纯合子:外显子3中1 bp缺失
缔约方
数据表及文件
-
SDS下载 -
数据表下载