主要功能和细节
Hsp70的小鼠单克隆抗体[5A5] 适用于:IHC-P、WB、ICC/IF、IP、Flow Cyt 反应对象:老鼠、老鼠、狗、人类、非洲绿猴 同位素:IgG1
概述
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产品名称 -
描述 小鼠单克隆抗体 [5A5]至Hsp70 -
宿主 鼠标 -
经测试应用 -
不合格品 与反应: 老鼠、老鼠、狗、人类、非洲绿猴 -
免疫原 人Hsp70 aa 122-264(N末端)内的重组片段。 确切的顺序是专有的。 -
表位 一组HSP 70缺失突变体的表位映射表明,识别的表位位于人类HSP 70的122-264氨基酸之间,该区域已被证明与ATP结合有关。 这是报告的第一种单克隆抗体与以下物质反应: 1) HSP 70的ATP结合区。 2) HSP70氨基末端的表位。 -
阳性对照 WB:HEK-293、A549、IMR-32、Jurkat、热休克处理的Jurkat,MDCK、NIH/3T3、PC-12、COS-7、HeLa、K562、A431、U-2 OS全细胞和小鼠卵巢组织裂解物。 IHC-P:人类前列腺、扁桃体和睾丸组织。 ICC:HeLa、NIH-3T3、U251 MG、C6细胞。 IP:HeLa细胞裂解物。
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常规说明 多年来,生命科学行业一直面临着再现性危机。 Abcam正在通过我们的一系列重组单克隆抗体和用于金标准验证的敲除编辑细胞系引领解决这一问题。 购买前请检查此产品是否满足您的需求。 如果您有任何问题、特殊要求或疑虑,请在购买之前向我们发送查询和/或联系我们的支持团队。 以下是本产品的推荐替代品,以及出版物、客户评论和问答
性能
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形式 液体 -
存放说明 在4°C下装运。 短期储存在+4°C下(1-2周)。 交付时,等分试样。 储存于-20°C。 避免冷冻/解冻循环。 -
存储溶液 防腐剂:0.05%叠氮化钠 成分:PBS、BSA -
浓度信息加载。。。 -
纯度 纯化蛋白A -
一级抗体 说明 热休克蛋白70家族是一组高度保守的蛋白质,在每一个检测过这些蛋白质的生物体中,由包括热应激在内的各种生物应激诱导。 人类HSP70家族成员包括:HSP70,一种在所有生物体中都能强烈诱导但在灵长类细胞中也能组成性表达的蛋白质; HSP 72,一种仅在应激条件下诱导的72kDa蛋白; HSC 70,或同源蛋白,是一种组成性表达的72kDa蛋白质,参与氯氰菊酯包被囊泡的脱膜; GRP78或BiP是一种葡萄糖调节的78kDa蛋白,定位于内质网; 和p75,或HSP 75,一种在线粒体内发现的75kDa蛋白。 -
克隆 单克隆 -
克隆编号 第五章 -
同种型 IgG1 -
研究领域
相关产品
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兼容的辅助设备 -
共轭试剂盒 -
同位素控制 -
重组蛋白 -
相关产品
应用
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靶标
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相关性 功能:与其他伴侣分子合作,Hsp70家族稳定先前存在的蛋白质以对抗聚集,并调节细胞溶质和细胞器内新翻译多肽的折叠。 这些伴侣通过识别其他蛋白质的非天然构象的能力参与所有这些过程。 它们将延伸的肽段与多肽在翻译和膜移位期间或应激诱导损伤后暴露的净疏水性结合。 在轮状病毒A感染的情况下,作为病毒的附着后受体,促进病毒进入细胞。 组织特异性:HSPA1B具有睾丸特异性。 -
细胞定位 细胞质。 定位于含有未翻译mRNA的细胞质mRNP颗粒。 -
数据库链接 Entrez基因: 403612 狗 Entrez基因: 15511 人类 Entrez基因: 3303 人类 Entrez基因: 193740 鼠标 Entrez基因: 3304 鼠标 Entrez基因: 24472 老鼠 Entrez基因: 294254 老鼠 奥密姆: 140550 人类
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别名 DnaK型分子伴侣HSP70 1抗体 附睾分泌蛋白Li 103抗体 FLJ54303抗体
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图片
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所有车道: 1/500稀释的抗-Hsp70抗体[5A5](ab2787) 车道1: HEK-293(人胚胎肾上皮细胞系)全细胞裂解物 车道2: A549(人肺癌细胞系)全细胞裂解物 3号车道: IMR32(人脑成神经细胞系)全细胞裂解物 4-5车道: Jurkat(外周血T细胞白血病细胞系)全细胞裂解物 车道6: MDCK(犬肾细胞系)全细胞裂解物 7号车道: NIH/3T3(小鼠胚胎成纤维细胞系)全细胞裂解物 第8车道: PC-12(大鼠肾上腺嗜铬细胞瘤细胞系)全细胞裂解物 9号车道: COS-7(非洲绿猴肾成纤维细胞样细胞系)全细胞裂解物 10号车道: 小鼠卵巢组织裂解物 每个泳道30µg的裂解物/蛋白质。 次要 所有车道: 羊抗鼠IgG(H+L)HRP(稀释度为1/4) 使用ECL技术开发。 -
用ab2787标记Hsp70(绿色)的U-251 MG(人脑胶质瘤细胞系)细胞的免疫荧光分析。 F-肌动蛋白染色法显示为磷脂(红色)和细胞核DAPI(蓝色)。 细胞在培养箱载玻片上生长,染色前用甲醛固定。 在没有(对照)、有或有识别热休克蛋白70 ab2787的抗体的情况下,以1/10-1/200的稀释度在4 o(o) C用PBS洗涤并用DyLight-488结合二级抗体孵育。 图像是在放大60倍的条件下拍摄的。 -
对脱蜡人扁桃体组织的正常活检进行免疫组化。 为了暴露目标蛋白,使用10mM柠檬酸钠(pH6.0)缓冲液微波加热8-15分钟进行热诱导抗原回收。 在室温下,用3%BSA-PBS封闭抗原回收组织30分钟。 然后用识别热休克蛋白70的小鼠单克隆抗体以1/200的稀释度探测组织( 约2787 )或在4°C的加湿室中过夜,不含初级抗体(阴性对照)。 用PBST广泛清洗组织,用过氧化物酶抑制剂抑制内源性过氧化物酶活性。 使用生物素结合二级抗体和SA-HRP进行检测,然后使用DAB进行比色检测。 用苏木精对组织进行复染,并准备贴装。 -
重叠直方图显示用ab2787染色的Jurkat细胞(红线)。 用4%多聚甲醛固定细胞(10分钟),然后用0.1%PBS-Tween渗透20分钟。然后在1x PBS/10%正常山羊血清/0.3M甘氨酸中培养细胞,以阻止非特异性蛋白质相互作用,然后在22℃下用抗体(ab2787,1:100稀释)培养30分钟。 使用的二级抗体是DyLight ® 488山羊抗鼠IgG(H+L)( 约96879 )在22ºC下以1:500稀释30分钟。 同型对照抗体(黑线)为小鼠IgG1[ICIGG1]( ab91353型 ,2微克/1x10 6 细胞)在相同条件下使用。 采集了超过5000个事件。 该抗体在80%甲醇固定/0.1%PBS-Tween渗透20分钟的Jurkat细胞中发出阳性信号。 -
在HeLa(宫颈腺癌人上皮细胞系)全细胞裂解液上进行Hsp70免疫沉淀。 抗原:将500µg全细胞裂解液与2µg ab2787在4°C的摇摆平台上孵育过夜,形成抗体复合物。 免疫复合物用50µl蛋白A/G琼脂糖捕获,广泛洗涤,并用缓冲液洗脱。 然后在4-20%Tris-HCl聚丙烯酰胺凝胶上解析样品,转移到PVDF膜上,并用5%BSA/TBST封闭至少1小时。 将膜与ab2787(1:1000)在4°C下旋转培养过夜,在TBST中清洗,并用IP检测试剂-HRP在1:1000的稀释度下进行至少一小时的探测。 进行化学发光检测。 -
所有车道: 稀释1/1000的抗-Hsp70抗体[5A5](ab2787) 车道1: HEK-293T(用大T抗原转化的胚胎肾人上皮细胞系)全细胞裂解物 车道2: HeLa(宫颈腺癌人上皮细胞系)全细胞裂解物 3号车道: K562(人骨髓慢性粒细胞白血病细胞系)全细胞裂解物 车道4: A431(人表皮样癌细胞系)全细胞裂解物 车道5: U-2 OS(人骨肉瘤上皮细胞系)全细胞裂解物 每车道50µg的裂解液/蛋白质。 次要 所有车道: 1/2000稀释的山羊抗小鼠IgG HRP二级抗体 将15µl预处理蛋白阶梯放在4-20%Tris-HCl聚丙烯酰胺凝胶上,对Hsp70进行Western blot分析。 将蛋白质转移到PVDF膜上,并用5%BSA/TBST封闭至少1小时。 将膜在4°C下在摇摆平台上培养过夜,在TBS-0.1%吐温20中清洗,并与二级抗体培养至少1小时。 进行化学发光检测。 -
用ab2787对标记Hsp70(绿色)的HeLa(宫颈腺癌人上皮细胞系)细胞进行免疫荧光分析。用磷脂酶(红色)和DAPI(蓝色)对细胞核进行F-肌动蛋白染色。 细胞在培养箱载玻片上生长,染色前用甲醛固定。 在没有(对照)或有或有识别热休克蛋白70 ab2787的抗体的情况下,以1/100-1/200的稀释度在夜间4小时对细胞进行检测 o(o) C用PBS洗涤并用DyLight-488结合二级抗体孵育。 图像是在放大60倍的条件下拍摄的。 -
用ab2787标记Hsp70(绿色)的C6(大鼠胶质瘤细胞系)细胞的免疫荧光分析。 F-肌动蛋白染色法显示为磷脂(红色)和细胞核DAPI(蓝色)。 细胞在培养箱载玻片上生长,染色前用甲醛固定。 在没有(右)或有或有识别热休克蛋白70(ab2787)的抗体(左)的情况下,以1/100-1/200的稀释度在夜间4小时检测细胞 o(o) C用PBS洗涤并用DyLight-488结合二级抗体孵育。 图像是在放大60倍的条件下拍摄的。 -
用ab2787标记Hsp70(绿色)的HeLa(宫颈腺癌人上皮细胞系)和NIH/3T3(小鼠胚胎成纤维细胞系)细胞的免疫荧光分析。 在室温下,用0.1%Triton X-100在TBS中渗透福尔马林固定细胞10分钟,并在室温下用1%阻断剂BSA封闭细胞15分钟。 用HSP70单克隆抗体在室温下以1:50稀释至少1小时,用PBS洗涤,并在室温下用DyLight 488羊抗鼠IgG二级抗体以1/400稀释培养30分钟。 细胞核(蓝色)用Hoechst 33342染料染色。 -
用免疫细胞化学/免疫荧光法对2089细胞中的Hsp70进行ab2787染色。 将细胞在-20°C的甲醇中固定30分钟,用PBS洗涤,并在室温下在封闭溶液(PBS中的10%人血清)中孵育1小时。 在室温下,在加湿室中用ab2787在封闭溶液中稀释1小时,对细胞进行染色。 用PBS清洗细胞,然后在室温下在不透明的加湿室中用稀释1/200的二级抗体在封闭溶液中培养1小时。 -
对脱蜡人前列腺癌组织的癌症活检进行免疫组织化学。 为了暴露目标蛋白,使用10mM柠檬酸钠(pH6.0)缓冲液微波加热8-15分钟进行热诱导抗原回收。 在室温下将抗原回收组织在3%BSA-PBS中封闭30分钟。 然后用识别热休克蛋白70的小鼠单克隆抗体以1/100的稀释度探测组织( 约2787 )或在4°C的加湿室中过夜,不含初级抗体(阴性对照)。 用PBST广泛清洗组织,用过氧化物酶抑制剂抑制内源性过氧化物酶活性。 使用生物素结合二级抗体和SA-HRP进行检测,然后使用DAB进行比色检测。 用苏木精对组织进行复染,并准备贴装。 -
对脱蜡人睾丸组织的正常活检进行免疫组化。 为了暴露目标蛋白,使用10mM柠檬酸钠(pH6.0)缓冲液微波加热8-15分钟进行热诱导抗原回收。 在室温下,用3%BSA-PBS封闭抗原回收组织30分钟。 然后用识别热休克蛋白70的小鼠单克隆抗体以1/200的稀释度探测组织( 约2787 )或在4°C的加湿室中过夜,不含初级抗体(阴性对照)。 用PBST广泛清洗组织,用过氧化物酶抑制剂抑制内源性过氧化物酶活性。 使用生物素结合二级抗体和SA-HRP进行检测,然后使用DAB进行比色检测。 用苏木精对组织进行复染,并准备贴装。 -
约2787 人类皮肤染色。 染色局限于细胞质和细胞核。 左侧面板:初级抗体为1/100。 右侧面板:同型控制。 切片在室温下使用自动系统进行染色。 对切片进行再水化,并取回抗原。 将载玻片在3%过氧化氢中甲醇中过氧化物酶封闭10分钟。 然后将其封闭10分钟(PBS中含有0.25%酪蛋白),然后与一级抗体孵育20分钟。 用二氨基联苯胺进行5分钟的比色检测。 用血红素对载玻片进行复染,盖玻片置于DePeX下。 请注意,对于手动染色,我们建议优化一级抗体浓度和孵育时间(过夜孵育),可能需要扩增。 -
U2OS细胞裂解物(30μg/lane)的Western blot分析用ab2787标记Hsp70(1/1000),在4°C的TBST中5%牛奶中放置13小时。 一个爱尔兰人 ® 使用800缀合的山羊抗小鼠多克隆(1/10000)作为第二抗体。
数据表及文件
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文献 (174)
Lai C公司 等。 滑膜成纤维细胞miR-214-3p衍生的外泌体抑制骨关节炎大鼠软骨组织的炎症和变性。 摩尔细胞生物化学 478:637-649 (2023). 公共医学:36001206 李杰 等。 携氧连续保存可减轻肝移植物的缺血再灌注损伤。 i科学 26:105858 (2023). 公共医学:36636350 Mills BN公司 等。 立体定向放射治疗对人胰腺导管腺癌免疫微环境的调节。 临床癌症研究 28:150-162 (2022). 公共医学:34862242 谢A 等。 Kartogenin诱导的脂肪源性干细胞外显子增强脂肪源性细胞的软骨分化能力。 Dis标记 2022:6943630 (2022). 公共医学:36072901 缺乏RE 等。 应激诱导磷蛋白1(HOP/STI1/STIP1)调节体内α-突触核蛋白的积累和毒性。 神经病理学学报 144:881-910 (2022). 公共医学:36121476