主要功能和细节
兔多克隆到组蛋白H3(三甲基K36)-ChIP级 适用对象:ICC/IF、WB、ChIP 反应对象:奶牛、人类 同种型:IgG
选择批间可重复性更高的重组抗体
研究可靠 —— 各批次间结果一致且可重复 长期批量供应 —— 采用重组技术,可实现快速生产 首次实验即可成功 —— 经过大量验证确认了特异性 符合伦理标准 —— 产品不含动物成分
(美国)
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产品名称 -
描述 兔多克隆抗体 组蛋白H3(三甲基K36)-ChIP级 -
宿主 兔子 -
经测试应用 -
种属反应性 与反应: 奶牛,人类 预测可用于: 小鼠、大鼠、酿酒酵母、非洲爪蟾、拟南芥、秀丽隐杆线虫、黑腹果蝇、植物、葡萄裂殖酵母、斑马鱼、蚕丝虫、水稻、热带爪蟾和布氏锥虫 -
免疫原 合成肽。 此信息为Abcam和/或其供应商专有。 (肽可用作 公元1785年 ) -
阳性对照 ICC:HeLa和Saos-2细胞。 WB:小牛胸腺组蛋白制备核裂解物 ChIP:从U-2 OS制备的染色质。
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常规说明 用于检测甲基化组蛋白H3。 了解ChIP检测试剂盒、其他ChIP抗体、协议等 ChIP分析指南 . 多年来,生命科学行业一直面临着再现性危机。 Abcam正在通过我们的一系列重组单克隆抗体和用于金标准验证的敲除编辑细胞系引领解决这一问题。 购买前请检查此产品是否满足您的需求。 如果您有任何问题、特殊要求或疑虑,请在购买之前向我们发送查询和/或联系我们的支持团队。 以下是本产品的推荐替代品,以及出版物、客户评论和问答
性能
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形式 液体 -
存放说明 在4°C下装运。 短期储存在+4°C下(1-2周)。 交付时,等分。 储存于-20°C或-80°C。 避免冷冻/解冻循环。 -
存储溶液 pH值:7.40 防腐剂:0.02%叠氮化钠 成分:PBS 该产品的浓度可能因批次而异。 浓度<1mg/ml的该产品批次可添加BSA作为稳定剂。 如果您想了解有关特定批次配方的信息,请联系我们的科学支持团队,他们将乐于提供帮助。 -
浓度信息加载。。。 -
纯度 免疫原亲和力纯化 -
一级抗体 说明 用于检测甲基化组蛋白H3 -
克隆 多克隆 -
同种型 IgG抗体 -
研究领域
产品
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ChIP相关产品 -
兼容的辅助设备 -
免疫肽(阻断) -
同位素控制 -
重组蛋白 -
相关产品
应用
靶标
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功能 核小体的核心成分。 核小体将DNA包裹并压缩成染色质,限制了需要DNA作为模板的细胞机制对DNA的访问。 因此,组蛋白在转录调控、DNA修复、DNA复制和染色体稳定性中发挥着核心作用。 DNA可及性是通过组蛋白的一系列复杂的翻译后修饰(也称为组蛋白密码)和核小体重塑来调节的。 -
序列相似性 属于组蛋白H3家族。 -
发展阶段 在S期表达,然后随着分化过程中细胞分裂减慢,表达强烈下降。 -
翻译后修饰 乙酰化通常与基因激活有关。 Lys-10(H3K9ac)上的乙酰化破坏Arg-9(H3R8me2s)的甲基化。 Lys-19(H3K18ac)和Lys-24(H3K24ac)上的乙酰化有利于Arg-18(H3R17me)上的甲基化。 PADI4在Arg-9(H3R8ci)和/或Arg-18(H3R17ci)处的瓜氨酸化会损害甲基化并抑制转录。 CARM1在Arg-18(H3R17me2a)处的不对称二甲基化与基因激活有关。 PRMT5在Arg-9(H3R8me2s)处的对称二甲基化与基因抑制有关。 PRMT6在Arg-3(H3R2me2a)处的不对称二甲基化与基因抑制有关,并且与H3 Lys-5甲基化(H3K4me2和H3K4me3)相互排斥。 H3R2me2a存在于基因的3'处,无论其转录状态如何,它在非活性启动子上富集,而在活性启动子中不存在。 Lys-5(H3K4me)、Lys-37(H3K36me)和Lys-80(H3K 79me)的甲基化与基因激活有关。 Lys-5(H3K4me)的甲基化促进H3和H4的后续乙酰化。 Lys-80甲基化(H3K79me)与DNA双链断裂(DSB)反应相关,是TP53BP1的特异靶点。 Lys-10(H3K9me)和Lys-28(H3K27me)的甲基化与基因抑制有关。 Lys-10的甲基化(H3K9me)是HP1蛋白(CBX1、CBX3和CBX5)的特异性靶标,并阻止随后Ser-11的磷酸化(H3S10ph)和H3和H4的乙酰化。 Lys-5(H3K4me)和Lys-80(H3K 79me)的甲基化需要H2B在“Lys-120”的初步单泛素化。 Lys-10(H3K9me)和Lys-28(H3K27me)的甲基化富集在非活性X染色体染色质中。 前期GSG2/haspin在Thr-4(H3T3ph)下磷酸化,后期去磷酸化。 AURKB在Ser-11(H3S10ph)的磷酸化对有丝分裂和减数分裂期间的染色体凝聚和细胞周期进展至关重要。 此外,RPS6KA4和RPS6KA5在Ser-11(H3S10ph)处的磷酸化在间期很重要,因为它能够在外界刺激后转录基因,如丝裂原、应激、生长因子或紫外线照射,并导致基因的激活,如c-fos和c-jun, 与基因激活相关,防止Lys-10(H3K9me)甲基化,但促进H3和H4的乙酰化。 AURKB在Ser-11(H3S10ph)的磷酸化介导HP1蛋白(CBX1、CBX3和CBX5)与异染色质的分离。 Ser-11的磷酸化(H3S10ph)也是肿瘤细胞转化的重要调节机制。 在有丝分裂期间或紫外线B照射下,MLTK亚型1、RPS6KA5或AURKB在Ser-29(H3S28ph)下磷酸化。 PRKCBB在Thr-7(H3T6ph)处的磷酸化是表观遗传转录激活的特异标记,可防止LSD1/KDM1A对Lys-5(H3K4me)的去甲基化。 在着丝粒处,DAPK3和PKN1在Thr-12(H3T11ph)从前期到后期的早期特异性磷酸化。 PKN1在Thr-12(H3T11ph)处的磷酸化是促进KDM4C/JMJD2C对Lys-10(H3K9me)去甲基化的表观遗传转录激活的特异标记。 JAK2在Tyr-42(H3Y41ph)下的磷酸化促进CBX5(HP1α)从染色质中排除。 RAG1在淋巴细胞中单泛素化,V(D)J重组需要单泛素(根据相似性)。 CUL4-DDB-RBX1复合物对紫外线照射的反应中泛素化。 这可能会削弱组蛋白和DNA之间的相互作用,并促进DNA可接近性以修复蛋白质。 -
细胞定位 核心。 染色体。 -
UniProt提供的信息 -
数据库链接 Entrez基因: 8350 人类 Entrez基因: 8351 人类 Entrez基因: 8352 人类 Entrez基因: 8353 人类 Entrez基因: 8354 人类 Entrez基因: 8355 人类 Entrez基因: 8356 人类 Entrez基因: 8357 人类
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别名 H3组蛋白家族成员E假基因抗体 H3组蛋白家族成员A抗体 H3/A抗体
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图片
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根据Abcam X-ChIP协议,从U-2 OS(人类骨肉瘤上皮细胞系)细胞制备染色质。 用甲醛固定细胞10分钟。 使用25µg染色质、2µg ab9050(蓝色)和20µl蛋白A/g sepharose珠进行ChIP。 未向珠子对照组(黄色)添加抗体。 免疫沉淀DNA在GAPDH(活性)和MYO-D(非活性)启动子和γ-肌动蛋白基因(活性)上定量。 图的顶部显示了γ-肌动蛋白基因的示意图。 黑盒子代表外显子,细线代表内含子。 PCR产物被描述为基因下的棒状物。 -
ab9050在HeLa(来自宫颈腺癌的人上皮细胞系)细胞中染色。 细胞在室温下用100%甲醇固定5分钟,并在室温下与含有10%山羊血清、0.3M甘氨酸、1%牛血清白蛋白和0.1%氚的PBS孵育1小时,以使细胞渗透并阻断非特异性蛋白质相互作用。 然后用抗体ab9050以0.1µg/ml和 约7291 (小鼠单克隆抗体[DM1A]到α-管蛋白-负荷控制),在+4°C下以1/1000稀释过夜。 次要抗体为山羊抗鼠IgG H&L(Alexa Fluor ® 594)预吸附层( ab150120型 )(伪红色)和山羊抗狂犬病IgG H&L(Alexa Fluor ® 488)预吸附( 约150081 )二级抗体(绿色)在室温下以1µg/ml的浓度使用1小时。 DAPI用于在室温下以1.43µM的浓度染色细胞核(蓝色)1小时。 -
所有车道: 抗-Histone H3(三甲基K36)抗体-ChIP等级(ab9050),1µg/ml 车道1: 小牛胸腺组蛋白制备核裂解物 车道2: 用组蛋白H3肽制备小牛胸腺组蛋白核裂解物-未经修饰的K36,0.5µg/ml 车道3: 用人组蛋白H3(单甲基K36)肽制备小牛胸腺组蛋白核裂解物( 公元1783年 )0.5µg/ml 车道4: 小牛胸腺组蛋白核裂解物的制备 人组蛋白H3(二甲基K36)肽( 公元1784年 )0.5µg/ml 车道5: 小牛胸腺组蛋白核裂解物的制备 人组蛋白H3(三甲基K36)肽( 公元1785年 )0.5µg/ml 车道6: 用人组蛋白H3(三甲基K37)肽制备小牛胸腺组蛋白核裂解物( ab24417年 )0.5µg/ml 每车道0.5µg的裂解液/蛋白质。 次要 所有车道: 山羊多克隆至兔IgG-H&L-Pre-Adsorbed(HRP),稀释度为1/3000 在还原条件下进行。 预测的带宽大小: 15千Da 观察到的频带大小: 17千Da 为什么实际的频带大小与预测的不同? -
ab9050染色HeLa细胞组蛋白H3(三甲基K36)。 细胞用100%甲醇固定5分钟,然后用1%牛血清白蛋白/10%正常山羊血清/0.3M甘氨酸和0.1%PBS-Tween封闭1小时。 然后用ab9050以0.1µg/ml和 约7291 (抗β-Tubulin)以1µg/ml在+4°C下过夜,然后在室温下用山羊抗兔AlexaFluor进一步孵育1小时 ® 488次( 约150081 )2μg/ml(绿色显示)和山羊抗鼠AlexaFluor ® 594 ( ab150120型 )浓度为2μg/ml(以伪红色显示)。 核DNA用DAPI标记为蓝色。 阴性对照: 1-兔一级抗体和抗小鼠二级抗体; 2–小鼠一级抗体和抗兔二级抗体。 对照组1和2表明所用的一级和二级抗体之间没有非特异性反应。 -
用ICC/IF(免疫细胞化学/免疫荧光)ab9050染色Saos-2(人骨肉瘤细胞系)细胞中的组蛋白H3(三甲基K36)。 细胞用多聚甲醛固定,用0.25%Triton在PBS中渗透,用1%BSA在室温下封闭1小时。 样品与一级抗体(1/1000)孵育1小时。 Alexa Fluor公司 ® 488-结合山羊抗兔IgG多克隆(1/250)作为二级抗体。
实验方案
数据表及文件
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SDS下载 -
数据表下载
文献 (904)
Stewart-Morgan韩国 等人。 用iDEMS定量DNA甲基化和羟甲基化的传播。 Nat细胞生物学 25:183-193(2023年)。 公共医学:36635504 冯毅 等人。 DNA G-四链体的表观基因组特征及其在水稻基因转录调控中的作用。 植物生理学 188:1632-1648 (2022). 公共医学:34893906 兵营A 等人。 SETDB1/NSD-dependent H3K9me3/H3K36me3双异染色质通过标记平衡增强子维持基因表达谱。 分子电池 82:816-832.e12(2022)。 公共医学:35081363 丁字X 等人。 SlJMJ7通过H3K4me3和DML2介导的DNA去甲基化之间的串扰协调番茄果实成熟。 新植物醇 233:1202-1219 (2022). 公共医学:34729792 康奈利CJ 等人。 Bur1细胞周期素依赖性激酶调节酿酒酵母的端粒长度。 酵母 39:177-192 (2022). 公共医学:34781413