主要功能和细节
组蛋白H3(二甲基K9)-ChIP级小鼠单克隆抗体[mAbcam 1220] 适用于:ICC/IF、WB、ELISA、IHC-P、ChIP 对奶牛、人类、拟南芥、黑腹果蝇、大米有反应 同位素:IgG2a
相关共轭物和制剂
概述
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产品名称 -
描述 小鼠单克隆抗体 [mAbcam 1220]至组蛋白H3(二甲基K9)-ChIP级 -
宿主 鼠标 -
特异性 通过肽ELISA ab1220识别二甲基K9,但不识别未修饰的K9、一甲基K9、三甲基K9和二甲基K27、三甲基K27、一甲基K4、二甲基K4或三甲基K4。 通过Western blot,ab1220被二甲基K9阻断,但不被未修饰的K9、一甲基K9、三甲基K9,二甲基K27、三甲基K27、一甲基K4、二甲基K4或三甲基K4阻断。 这表明ab1220对组蛋白H3的二甲基K9具有特异性。 -
试验 -
种属反应性 与反应: 奶牛、人类、拟南芥、果蝇、水稻 预测可用于: 小鼠、大鼠、绵羊、鸡、酿酒酵母、非洲爪蟾、秀丽隐杆线虫、葡萄裂殖酵母、玉米、普通绒猴、其他物种 -
免疫原 合成肽。 此信息为Abcam和/或其供应商专有。 (肽可用作 公元1772年 ) -
阳性对照 IHC-P:人肾组织; 小鼠肝组织。 WB:HeLa全细胞裂解液; 小牛胸腺组蛋白裂解物; HEK-293裂解物。 ChIP:AFM ChIP引物对 约269259 ; 由U2OS细胞制备的染色质。 ICC/IF:HeLa细胞。
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常规说明 有关ChIP检测试剂盒、其他ChIP抗体以及更多信息,请访问 ChIP分析指南 . ChIP协议: 用于交联ChIP(X-ChIP)的ChIP协议 本机ChIP协议 ChIP组织染色质制备 ChIP故障排除 ChIP提示和技巧指南 该抗体克隆[mAbcam 1220]由Abcam制造。 如果您需要在特定的缓冲液配方或特定的结合物中使用此抗体进行实验,请联系 orders@abcam.com 或者您可以找到更多信息 在这里 . 多年来,生命科学行业一直面临着再现性危机。 Abcam正在通过我们的一系列重组单克隆抗体和用于金标准验证的敲除编辑细胞系引领解决这一问题。 购买前请检查此产品是否满足您的需求。 如果您有任何问题、特殊要求或疑虑,请在购买之前向我们发送查询和/或联系我们的支持团队。 以下是本产品的推荐替代品,以及出版物、客户评论和问答
性能
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中国 液体 -
存放说明 在4°C下装运。 短期储存在+4°C下(1-2周)。 交付时,等分。 储存于-20°C或-80°C。 避免冷冻/解冻循环。 -
存储溶液 pH值:7.40 防腐剂:0.02%叠氮化钠 成分:PBS,6.97%L-精氨酸 -
正在加载浓度信息。。。 -
纯度 蛋白质G纯化 -
克隆 单克隆 -
协调 单抗1220 -
同种型 IgG2a -
轻链类型 卡帕 -
研究领域
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替代版本 -
ChIP相关产品 -
兼容的辅助设备 -
对应的未修饰肽 -
免疫肽(阻断) -
同位素控制 -
阳性对照 -
重组蛋白 -
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应用
靶标
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功能 核小体的核心成分。 核小体将DNA包裹并压缩成染色质,限制了需要DNA作为模板的细胞机制对DNA的访问。 因此,组蛋白在转录调控、DNA修复、DNA复制和染色体稳定性中发挥着核心作用。 DNA可及性是通过组蛋白的一系列复杂的翻译后修饰(也称为组蛋白密码)和核小体重塑来调节的。 -
序列相似性 属于组蛋白H3家族。 -
发展阶段 在S期表达,然后随着分化过程中细胞分裂减慢,表达强烈下降。 -
翻译后修饰 乙酰化通常与基因激活有关。 Lys-10(H3K9ac)上的乙酰化破坏Arg-9(H3R8me2s)的甲基化。 Lys-19(H3K18ac)和Lys-24(H3K24ac)上的乙酰化有利于Arg-18(H3R17me)上的甲基化。 PADI4在Arg-9(H3R8ci)和/或Arg-18(H3R17ci)处的瓜氨酸化会损害甲基化并抑制转录。 CARM1在Arg-18(H3R17me2a)处的不对称二甲基化与基因激活有关。 PRMT5在Arg-9(H3R8me2s)处的对称二甲基化与基因抑制有关。 PRMT6在Arg-3(H3R2me2a)处的不对称二甲基化与基因抑制有关,并且与H3 Lys-5甲基化(H3K4me2和H3K4me3)相互排斥。 H3R2me2a存在于基因的3'处,无论其转录状态如何,它在非活性启动子上富集,而在活性启动子中不存在。 Lys-5(H3K4me)、Lys-37(H3K36me)和Lys-80(H3K 79me)的甲基化与基因激活有关。 Lys-5(H3K4me)的甲基化促进H3和H4的后续乙酰化。 Lys-80甲基化(H3K79me)与DNA双链断裂(DSB)反应相关,是TP53BP1的特异靶点。 Lys-10(H3K9me)和Lys-28(H3K27me)的甲基化与基因抑制有关。 Lys-10(H3K9me)的甲基化是HP1蛋白(CBX1、CBX3和CBX5)的一个特定靶点,可防止随后Ser-11(H3S10ph)的磷酸化以及H3和H4的乙酰化。 Lys-5(H3K4me)和Lys-80(H3K79me)的甲基化需要H2B在“Lys-120”的初步单泛素化。 Lys-10(H3K9me)和Lys-28(H3K27me)的甲基化富集在非活性X染色体染色质中。 前期GSG2/haspin在Thr-4(H3T3ph)下磷酸化,后期去磷酸化。 AURKB在Ser-11(H3S10ph)的磷酸化对有丝分裂和减数分裂期间的染色体凝聚和细胞周期进展至关重要。 此外,RPS6KA4和RPS6KA5在Ser-11(H3S10ph)处的磷酸化在间期很重要,因为它能够在外界刺激后转录基因,如丝裂原、应激、生长因子或紫外线照射,并导致基因的激活,如c-fos和c-jun, 与基因激活相关,防止Lys-10(H3K9me)甲基化,但促进H3和H4的乙酰化。 AURKB在Ser-11(H3S10ph)的磷酸化介导HP1蛋白(CBX1、CBX3和CBX5)与异染色质的分离。 Ser-11的磷酸化(H3S10ph)也是肿瘤细胞转化的重要调节机制。 在有丝分裂期间或紫外线B照射下,MLTK亚型1、RPS6KA5或AURKB在Ser-29(H3S28ph)下磷酸化。 PRKCBB在Thr-7(H3T6ph)处的磷酸化是表观遗传转录激活的特异标记,可防止LSD1/KDM1A对Lys-5(H3K4me)的去甲基化。 在着丝粒处,DAPK3和PKN1在Thr-12(H3T11ph)从前期到后期的早期特异性磷酸化。 PKN1在Thr-12(H3T11ph)处的磷酸化是促进KDM4C/JMJD2C对Lys-10(H3K9me)去甲基化的表观遗传转录激活的特异标记。 JAK2在Tyr-42(H3Y41ph)处的磷酸化促进CBX5(HP1α)从染色质中排除。 RAG1在淋巴细胞中单泛素化,V(D)J重组需要单泛素(根据相似性)。 CUL4-DDB-RBX1复合物对紫外线照射的反应中泛素化。 这可能会削弱组蛋白和DNA之间的相互作用,并促进DNA对修复蛋白质的可及性。 -
细胞定位 核心。 染色体。 -
UniProt提供的信息 -
数据库链接 Entrez基因: 8350 人类 Entrez基因: 8351 人类 Entrez基因: 8352 人类 Entrez基因: 8353 人类 Entrez基因: 8354 人类 Entrez基因: 8355 人类 Entrez基因: 8356 人类 Entrez基因: 8357 人类
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别名 H3组蛋白家族成员E假基因抗体 H3组蛋白家族成员A抗体 H3/A抗体
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图片
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Alarcon V等人研究了由于抑制LSD1而产生的pargyline效应。 使用siRNA(siLSD1)降低LSD1蛋白水平。 在HBV基因组(A)转染之前,分别用siLSD1和不使用siLSD2处理Huh7(人肝细胞癌)细胞,并孵育24小时。 蛋白质印迹分析显示LSD1在处理后减少。 组蛋白H3的共价翻译后修饰由ChIP使用ab1220作为特异性抗体(C-G)之一进行测定。 用qPCR(H)检测HBV cccDNA和细胞质水平。 -
ab1220染色HeLa(人宫颈腺癌上皮细胞)细胞组蛋白H3(二甲基K9)。 细胞用4%PFA固定(10分钟),用0.1%Triton X-100渗透5分钟,然后用1%BSA/10%正常山羊血清/0.3M甘氨酸在0.1%PBS-Tween中封闭1小时。 然后在+4°C下用ab1220以5µg/ml和 约190573 ,兔α-微管蛋白单克隆抗体(Alexa Fluor ® 647),浓度为2µg/ml(以红色显示)。 二级抗体(以绿色显示)为 第150117页 ,Alexa Fluor公司 ® 488羊抗鼠IgG(H+L),在室温下以1/1000稀释度使用1h。 用DAPI标记细胞核DNA(以蓝色显示)。 使用高含量分析仪(Operetta CLS、Perkin Elmer)采集图像,并显示共焦截面的最大强度投影。 在使用100%甲醇固定的HeLa电池(5分钟)中,在相同的测试条件下,该产品也显示出阳性结果。 -
所有车道: 抗-Histone H3(二甲基K9)抗体[mAbcam 1220]-ChIP级(ab1220) 车道1: 小牛胸腺组蛋白裂解物 车道2: 含组蛋白H3肽的小牛胸腺组蛋白裂解物-未在1µg/ml条件下进行修改 3号车道: 小牛胸腺组蛋白裂解物与人类组蛋白H3(单甲基K9)肽( 公元1771年 )浓度为1µg/ml 车道4: 小牛胸腺组蛋白裂解物 人组蛋白H3(二甲基K9)肽( 公元1772年 )浓度为1µg/ml 车道5: 小牛胸腺组蛋白裂解物 人组蛋白H3(三甲基K9)肽( 公元1773年 )浓度为1µg/ml 车道6: 小牛胸腺组蛋白裂解物与人类组蛋白H3(二甲基K4)肽( 约7768 )浓度为1µg/ml 7号车道: 小牛胸腺组蛋白裂解物 人组蛋白H3(二甲基K27)肽( 公元1781年 )浓度为1µg/ml 次要 所有车道: 兔抗鼠IgG H&L(HRP)( ab6728号 )稀释1/5000 使用ECL技术开发。 在还原条件下进行。 预测的带宽大小: 17千Da 暴露时间: 1分钟 -
染色质是根据 Abcam X-ChIP协议 用甲醛固定细胞10分钟。 使用25µg染色质、2µg ab1220(蓝色)和20µl蛋白A/g sepharose珠进行ChIP。 未向珠子对照组(黄色)添加抗体。 免疫沉淀DNA通过实时PCR(Taqman方法用于活性和非活性位点,Sybr green方法用于异色位点)进行定量。 引物和探针位于转录区的第一Kb。 -
Chen L等人研究了Trim 28(包含28的三部分基序)在上皮细胞向间充质细胞转化中的作用,这与癌症转移有关。 使用ab1220进行ChIP。 在Trim 28敲低A549细胞和对照(A)中进行ChIP分析。 在对照组中进行ChIP分析,在A549细胞(B)中表达Trim28。 -
使用ab1220进行ChIP。 将幼鼠ES细胞重新悬浮在PBS中,并在室温下与1%甲醛交联5分钟。 用125m M甘氨酸淬灭交联。 小鼠抗IgG抗体( 约18413年 )用作控件。 用ChIP-seq检测服用和不服用维生素C的ES细胞中的H3K9me2(图a)。 比较未经处理和维生素C处理的细胞,绘制H3K9me2信号全基因组图(图b)。 基因启动子处平均H3K9me2信号的折叠变化。 大多数基因启动子显示维生素C处理的ES细胞中H3K9me2减少(图C)。 基因启动子处含或不含维生素C的ES细胞中H3K9me2的ChIP-qPCR。 对IgG进行ChIP作为阴性对照(图像d)。 星号通过t检验表示P<0.05 -
抗-Histone H3(二甲基K9)抗体[mAbcam 1220]-ChIP等级(ab1220)(1/1000稀释)+HEK293(30µg) 次要 HRP结合多克隆羊抗鼠IgG(1/5000稀释) 在还原条件下进行。 预测的带宽大小: 17千Da 封闭缓冲液:5%牛奶 -
使用EXPOSE IHC检测试剂盒通过IHC-P对人肾切片进行ab1220染色( 约80436 ). 福尔马林固定石蜡包埋组织切片采用热介导抗原回收(使用压力锅)和柠檬酸钠缓冲液(pH6)预处理30分钟。 在室温下用ab1220(5µg/ml)培养切片1小时。 DAB用作染色原,切片用苏木精复染并用DPX固定。 -
抗组蛋白H3(二甲基K9)抗体[mAbcam 1220]-1µg/ml的ChIP级(ab1220)+20µg的HeLa(人上皮癌细胞系)全细胞裂解物 次要 山羊多克隆至小鼠IgG-H&L-前吸附物(HRP)(1/10000稀释) 使用ECL技术开发。 在还原条件下进行。 预测的带宽大小: 17千Da 观察到的频带大小: 17千Da 暴露时间: 5分钟 车道1:标记器。 所有阻断和抗体培养步骤都是用5%的牛奶和0.1%的TWEEN-20在20mM Tris-HCL中完成的。 -
所有车道: 抗-Histone H3(二甲基K9)抗体[mAbcam 1220]-ChIP等级(ab1220),2.5µg/ml 车道1: 果蝇胚胎组织裂解物-核4.5µg 车道2: 果蝇胚胎组织裂解物-核1.5µg 3号车道: 果蝇胚胎组织裂解物-0.5µg的细胞核 次要 所有车道: HRP-结合山羊抗鼠IgG多克隆(1/2000稀释) 使用ECL技术开发。 在还原条件下进行。 预测的带宽大小: 17千Da 观察到的频带大小: 15千Da 为什么实际的频带大小与预测的不同? 暴露时间: 1分钟
实验方案
数据表及文件
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数据表下载
文献 (886)
王S 等。 组蛋白介导修复限制引起的父系DNA损伤的遗传。 性质 613:365-374 (2023). 公共医学:36544019 李W 等。 4,5-二甲氧基斑蝥素-6-酮是一种新型LSD1抑制剂,可抑制胶质母细胞瘤细胞的增殖,诱导细胞凋亡和凋亡。 癌细胞Int 22:32 (2022). 公共医学:35042538 安德森EM 等。 组蛋白甲基转移酶G9a介导应激调节性饮酒。 成瘾生物 27:e13060(2022)。 公共医学:34013595 芬克·D 等。 组蛋白脱乙酰酶4缺失广泛影响心脏表观遗传抑制,并通过H3K9甲基化调节转录敏感性。 J Mol Cell心脏病学 162:119-129 (2022). 公共医学:34492228 杨斯(Yang S) 等。 在高温高湿条件下,茄科植物对青枯菌的免疫转向细胞分裂素介导的免疫。 植物细胞环境 45:459-478 (2022). 公共医学:34778967