概述
-
产品名称 -
种属反应性 与反应: 人类 -
产品概述 HIF-1α(H1alpha67,EP1215Y,ESEE122,EPR16897)抗体小组ab263460包含多个针对HIF-1 alpha的抗人抗体克隆的试验规模版本,专门为在各种应用中的高性能而选择。 该面板包含2种重组兔单克隆抗体和2种鼠抗人HIF-1α单克隆抗体。 它们作为取样器面板提供,允许您轻松评估每个抗体。
有关如何在小组内使用每种抗体的指南,请参阅每种抗体各自的数据表。
面板包含:
-小鼠单克隆[H1alpha67]到HIF-1α(20µg) ab1型
-兔单克隆[EP1215Y]抗HIF-1α(20µL) ab51608型
-小鼠抗HIF-1α单克隆抗体[ESE122](20µg) ab8366型
-兔单克隆[EPR16897]到HIF-1α(20µL) 约179483
HIF-1α作为缺氧适应性反应的主转录调节器发挥作用。 在这种条件下,它可以激活40多个基因,这些基因的蛋白产物可以增加氧气输送或促进代谢适应缺氧。 ( 瑞士保护银行:Q16665 ). 在常氧条件下,HIF-1α在很大程度上无法检测到,在测试之前,需要在大多数细胞系和组织中诱导缺氧。 对于肿瘤微环境中常见缺氧区域的癌组织,通常不需要诱导(PubMed:18501211689469)。 -
说明 探索我们的抗体样本面板范围 旨在以方便且经济高效的方式为您提供各种试验规模的抗体。 我们的抗体的直接偶联版本可用于多色流式细胞术或免疫细胞化学分析。 请参阅下面的“相关产品”部分。 无载体配方 我们的重组抗体也可以很容易地与您选择的标签结合,并用于多种用途。 请参阅下面的“相关产品”部分。
性能
-
存放说明 储存于-20°C。 请参阅协议。 -
年 1套 ab51608-抗-HIF-1α抗体 2 x 10微升 ab179483-抗-HIF-1α抗体[EPR16897] 2 x 10微升 ab8366-抗-HIF-1α抗体[ESE122] 2 x 10微克 ab1-抗-HIF-1α抗体[H1α67]-ChIP等级 2 x 10微克 -
研究领域 -
功能 作为缺氧适应性反应的主转录调节器发挥作用。 在缺氧条件下,激活40多个基因的转录,包括促红细胞生成素、葡萄糖转运蛋白、糖酵解酶、血管内皮生长因子和其他蛋白产物增加氧气输送或促进代谢适应缺氧的基因。 在胚胎血管生成、肿瘤血管生成和缺血性疾病的病理生理学中发挥重要作用。 与靶基因启动子缺氧反应元件(HRE)内的核心DNA序列5'-[AG]CGTG-3'结合。 激活需要招募转录辅激活物,如CREBPB和EP300。 活动通过与NCOA1或NCOA2两者的交互增强。 与氧化还原调节蛋白APEX的相互作用似乎激活了CTAD,并增强了NCOA1和CREBBP的激活。 -
美国 在肾脏和心脏中含量最高的大多数组织中表达。 由于肿瘤内缺氧以及编码癌蛋白和抑癌基因突变,在大多数常见人类癌症及其转移瘤中过度表达。 -
序列相似性 包含1个基本螺旋-环-螺旋(bHLH)域。 包含1个PAC(PAS相关的C-终端)域。 包含2个PAS(PER-ARNT-SIM)域。 -
结构域 包含两个独立的C末端交易激活域,NTAD和CTAD,它们协同工作。 它们的转录活性受到干预抑制域(ID)的抑制。 -
翻译后修饰 在常氧条件下,通过EGLN1/PHD1和EGLN2/PHD2在氧依赖降解域(ODD)的Pro-402和Pro-564上羟基化。 EGLN3/PHD3也显示为羟基化Pro-564。 羟基脯氨酸促进与VHL的相互作用,启动快速泛素化和随后的蛋白酶体降解。 USP20脱去泛素。 缺氧时,脯氨酸羟基化受损,泛素化减弱,导致稳定。 在常氧条件下,HIF1AN在Asn-803上羟基化,从而消除与CREBBP和EP300的相互作用并阻止转录激活。 这种羟基化被Cu/Zn-亲水体Clioquinol抑制。 Cys-800的S-亚硝基化可能是增加HIF-1复合物转录活性所必需的p300辅活化子的募集的原因。 DNA结合需要磷酸化。 磺酰化; 缺氧条件下SUMO1。 Sumoylation通过与RWDD3的相互作用而增强。 SENP1的去甲酰化导致HIF1A稳定性和转录活性增加。 泛素化; 在常压下,在羟基化和与VHL相互作用后。 Lys-532似乎是泛素化的主要位点。 Clioquinol是Cu/Zn的亲合物,通过阻止Asn-803的羟基化来抑制泛素化。 天冬酰胺的铁和2-酮戊二酸依赖性3-羟基化在HIF-CTAD结构域内具有(S)立体特异性。 -
细胞定位 细胞质。 核心。 常氧状态下的细胞质,缺氧反应中的核移位。 在缺氧条件下与细胞核中的SUMO1共定位。 -
UniProt提供的信息 -
别名 ARNT相互作用蛋白 ARNT相互作用蛋白 碱性螺旋-环-螺旋PAS蛋白MOP1
查看所有内容 -
数据库链接
相关产品
-
兼容的辅助设备 -
相应抗体 -
相关产品
图片
-
ll车道: 抗-HIF-1α抗体[EPR16897]( 约179483 )稀释度为1/1000 车道1: 野生型HAP1全细胞裂解物 车道2: DMOG(0.5mM 18hr)全细胞裂解物处理野生型HAP1 3号车道: HIF1A敲除HAP1全细胞裂解物 车道4: 用DMOG(0.5mM 18小时)全细胞裂解物处理HIF1A敲除HAP1 车道5: HeLa全细胞裂解物 车道6: 用DMOG(0.5mM 18小时)全细胞裂解液处理HeLa 每车道40µg的裂解液/蛋白质。 预测的带宽大小: 92千帕 观察到的频带大小: 105千帕 1-6车道: 合并信号(红色和绿色)。 绿色- 约179483 在105 kDa时观察到。 红色-装载控制, ab24834号 ,在50 kDa下观察到。 约179483 在野生型HAP1处理的DMOG(0.5mM 18hr)细胞中显示与HIF-1α特异性反应,因为HAP1敲除处理的DMOG(0.5mM 18hr)敲除细胞中信号丢失。 野生型和HAP1敲除样品进行SDS-PAGE分析。 约179483 和 ab24834号 (小鼠抗组蛋白H3负荷对照)分别在4°C下以1/1000稀释度和1/10000稀释度孵育过夜。 用山羊抗兔IgG H&L(IRDye ® 800CW)预吸收床 邮编:216773 和山羊抗鼠IgG H&L(IRDye ® 680RD)预吸收床 约216776 二级抗体在成像前在室温下以1/20000稀释1小时。 -
所有车道: 抗-HIF-1α抗体[EP1215Y]( ab51608型 )稀释1/2000
车道1 :MCF-7(常氧)
2号车道 :用0.5%氧气处理MCF-7 24小时
每车道30000个细胞的裂解物/蛋白质。
所有车道的次要车道: 1/1000稀释度的多克隆猪抗兔IgG HRP
预测的带宽大小: 93千帕
阻塞缓冲区: 5%的牛奶在4°C下放置16小时。 -
所有车道: 抗-HIF-1α抗体[H1alpha67]-ChIP等级( ab1型 )浓度为5µg/ml
车道1: HeLa核提取物裂解物( 约150036 )40µg
车道2: Hela DFO处理的(0.5mM,24小时)核裂解物( 约180880 )40µg
3号车道: 40µg HeLa核控制
车道4: 40µg处理的HeLa核DFO
车道5: 重组人HIF-1α蛋白( ab154478年 )0.001微克
次要
所有车道: 山羊抗鼠IgG H&L(HRP)预吸附( 约97040 )稀释度为1/10000
在还原条件下进行。
预测的带宽大小: 92千帕
暴露时间: 20分钟
我们建议使用TBST中5%的牛奶作为阻断剂,在一级和二级抗体孵育期间将TBST中的牛奶降至2%。
用山羊抗鼠IgG H&L(HRP)预吸附物制备印迹( 约97040 )次级抗体 -
4%对甲醛固定、0.1%Triton X-100渗透HeLa(宫颈腺癌人上皮细胞)细胞标记HIF-1-alpha的免疫荧光分析 约179483 1/50稀释,然后使用山羊抗兔IgG(Alexa Fluor ® 488) ( 约150077 )1/500稀释的第二抗体(绿色)。 共焦图像显示HeLa细胞系上的细胞质和弱核染色。 经CoCl2处理(0.6nM持续6小时)后,HIF-1-alpha的表达增加; 蛋白质也从细胞质转移到细胞核。 【Biochimica et Biophysica Acta 1745(2005)187–195。】核反染为DAPI(蓝色)。 用检测到微管蛋白 约7291 (抗Tubulin小鼠单克隆抗体),稀释度为1/1000 约150120 (Alexa Fluor公司 ® 594羊抗鼠次级),稀释度为1/500(红色)。 阴性对照如下: 1 约179483 稀释1/50,然后 约150120 (Alexa Fluor公司 ® 594羊抗鼠次级),稀释1/500。 2 约7291 (抗Tubulin小鼠单克隆抗体),稀释1/1000,然后 约150077 (Alexa Fluor公司 ® 488山羊抗狂犬病IgG H&L),稀释度为1/500。 -
低氧诱导人胎盘标记HIF-1-alpha的免疫组织化学(福尔马林/PFA-固定石蜡包埋切片)分析 ab8366型 . -
ab8366型 染色的Hela细胞。 将细胞用4%甲醛固定10分钟,在0.1%PBS Triton X-100中透化5分钟,然后在室温下用1%BSA/10%正常山羊血清/0.3M甘氨酸在0.1%PBS吐温中封闭1小时,以阻断非特异性蛋白质-蛋白质相互作用。 然后用抗体培养细胞( ab8366型 10µg/ml)在+4°C下过夜。 二级抗体(伪绿色)为 ab150117号 山羊抗鼠IgG H&L(Alexa Fluor®488)预吸附剂,在室温下以1/1000稀释1小时使用。 Alexa Fluor®594 WGA用于在室温下以1/200稀释1小时的方式标记质膜(伪彩色红色)。 DAPI用于在室温下以1.43µM的浓度对细胞核(伪蓝色)染色1小时。 -
ab51608型 用免疫组织化学(IHC-P-副甲醛固定石蜡包埋切片)染色人卵巢癌组织切片中的HIF-1-alpha。 将组织固定并包埋石蜡,在Tris/EDTA缓冲液pH9中通过热介导回收抗原。 样品与一级抗体孵育(1/100)。 未稀释的HRP结合抗兔IgG用作二级抗体。 组织用苏木精复染。 -
ab1型 盐酸二甲双胍处理的MCF7(人乳腺癌细胞系)细胞HIF-1-alpha染色 公元12084年 如文献所述,HIF-1α表达的减少与盐酸二甲双胍浓度的增加相关。 细胞在37°C的培养基中培养24小时,培养基中含有不同浓度的 约120847 (盐酸二甲双胍),室温下用4%甲醛固定10分钟,室温下使用含10%山羊血清、0.3M甘氨酸、1%牛血清白蛋白和0.1%吐温的PBS封闭2小时。 用 ab1型 (10µg/ml)在4°C下在含有1%BSA和0.1%吐温的PBS中过夜。 山羊抗鼠IgG H&L(DyLight ® 488)预吸附层( 约96879 )以1/250稀释液作为二级抗体。 细胞核用DAPI复染,显示为蓝色。
实验方案
数据表及文件
-
SDS下载 -
数据表下载