主要功能和细节
重组生产(无动物),具有高批次一致性和长期供应安全性 抗HIF-1α-BSA和无叠氮化合物的兔单克隆抗体[EP1215Y] 适用于:ICC/IF、WB、ChIC/CUT&RUN seq、Flow Cyt(Intra)、IP、IHC-P 反应对象:人类
相关共轭物和制剂
概述
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产品名称 -
描述 兔单克隆抗体 [EP1215Y]到HIF-1α-BSA和无氮化物 -
宿主 兔子 -
特异性 -
经测试应用 -
种属反应性 以下内容: 人类 -
免疫原 合成肽。 此信息为Abcam和/或其供应商专有。 -
阳性对照 WB:DFO处理的HeLa核裂解物( 约180880 ),经Cocl2处理的Ramos细胞裂解物。 IHC-P:人类卵巢癌和乳腺癌、结肠腺癌和宫颈鳞状细胞癌组织。 人胃癌与大肠癌组织 ICC/IF:DFO处理的Hela细胞、Cocl2处理的Hela细胞和黄芩素处理的HepG2细胞 Flow Cyt(内部):DFO处理的HeLa细胞 IP:DFO处理的HeLa核裂解物 ChIC/CUT&RUN-Seq:HeLa细胞。
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常规说明 ab210073是的无载波版本 ab51608型 . 关于小鼠特异性Hif-1-alpha兔单克隆抗体,请参见 ab179483(克隆ID:EPR16897)。 约179483 已确认WB中的老鼠样本。 我们对大鼠的特异性有不同的客户反馈,因此我们无法用大鼠样本确认和保证其性能。 有关更多信息,请联系技术团队。 我们的 无载体 抗体通常以只含PBS的配方提供,纯化后不含BSA、叠氮化钠和甘油。 无载体缓冲液和高浓度允许提高缀合效率。 这种共轭-成熟格式设计用于荧光色素、金属同位素、寡核苷酸和酶,使其成为抗体标记、功能和基于细胞的分析、基于流的分析(例如,质谱仪)和多重成像应用的理想选择。 使用我们的 接合试剂盒 抗体结合物在20分钟内即可使用,动手时间<1分钟,抗体回收率100%:可用于荧光染料、HRP、生物素和金。 此产品与Maxpar兼容 ® Fluidigm抗体标记试剂盒,无需抗体制备。 Maxpar公司 ® 是Fluidigm Canada Inc.的商标。 该产品是一种重组单克隆抗体,具有以下优点: -高批次一致性和再现性 -提高敏感性和特异性 -长期供应安全 -无动物制作
有关更多信息 请看这里 . 我们的RabMAb ® 该技术是一种基于杂交瘤的专利技术,用于制备兔单克隆抗体。 有关我们专利的详细信息,请参阅 拉布MAb ® 专利 .
性能
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形式 液体 -
存放说明 在4°C下装运。 储存于+4°C。 请勿冻结。 -
解离常数 (K) D类 ) -
存储溶液 pH值:7.20 成分:PBS -
无载体 是 -
浓度信息加载。。。 -
纯度 蛋白质A纯化 -
克隆 单克隆 -
协调 EP1215Y型 -
同种型 免疫球蛋白G -
研究领域
相关产品
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替代版本 -
检测试剂盒 -
兼容的辅助设备 -
共轭试剂盒 -
同种型对照 -
阳性对照 -
重组蛋白 -
相关产品
应用
靶标
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功能 作为缺氧适应性反应的主转录调节器发挥作用。 在缺氧条件下,激活40多个基因的转录,包括促红细胞生成素、葡萄糖转运蛋白、糖酵解酶、血管内皮生长因子和其他蛋白产物增加氧气输送或促进代谢适应缺氧的基因。 在胚胎血管生成、肿瘤血管生成和缺血性疾病的病理生理学中发挥重要作用。 与靶基因启动子缺氧反应元件(HRE)内的核心DNA序列5'-[AG]CGTG-3'结合。 激活需要招募转录辅激活物,如CREBPB和EP300。 活动通过与NCOA1或NCOA2两者的交互增强。 与氧化还原调节蛋白APEX的相互作用似乎激活了CTAD,并增强了NCOA1和CREBBP的激活。 -
组织特异性 在肾脏和心脏中含量最高的大多数组织中表达。 由于肿瘤内缺氧以及编码癌蛋白和抑癌基因突变,在大多数常见人类癌症及其转移瘤中过度表达。 -
序列相似性 包含1个基本螺旋-环-螺旋(bHLH)域。 包含1个PAC(PAS-associated C-terminal)域。 包含2个PAS(PER-ARNT-SIM)域。 -
结构域 包含两个独立的C末端交易激活域,NTAD和CTAD,它们协同工作。 它们的转录活性受到干预抑制域(ID)的抑制。 -
翻译后修饰 在常氧条件下,通过EGLN1/PHD1和EGLN2/PHD2在氧依赖降解域(ODD)的Pro-402和Pro-564上羟基化。 EGLN3/PHD3也显示为羟基化Pro-564。 羟基脯氨酸促进与VHL的相互作用,启动快速泛素化和随后的蛋白酶体降解。 USP20脱去泛素。 缺氧时,脯氨酸羟基化受损,泛素化减弱,导致稳定。 在常氧条件下,HIF1AN在Asn-803上羟基化,从而消除与CREBBP和EP300的相互作用并阻止转录激活。 这种羟基化被Cu/Zn-亲水体Clioquinol抑制。 Cys-800的S-亚硝基化可能是增加HIF-1复合物转录活性所必需的p300辅活化子的募集的原因。 DNA结合需要磷酸化。 磺酰化; 缺氧条件下SUMO1。 Sumoylation通过与RWDD3的相互作用而增强。 SENP1的去甲酰化导致HIF1A稳定性和转录活性增加。 泛素化; 在常压下,在羟基化和与VHL相互作用后。 Lys-532似乎是泛素化的主要位点。 铜/锌螯合剂氯喹啉通过阻止Asn-803的羟基化来抑制泛素化。 天冬酰胺的铁和2-酮戊二酸依赖性3-羟基化在HIF-CTAD结构域内具有(S)立体特异性。 -
细胞定位 细胞质。 核心。 常氧状态下的细胞质,缺氧反应中的核移位。 低氧条件下,在细胞核中与SUMO1进行结肠酸化。 -
UniProt提供的信息 -
数据库链接 -
别名 ARNT相互作用蛋白抗体 ARNT相互作用蛋白抗体 碱性螺旋-环-螺旋PAS蛋白MOP1抗体
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图片
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该数据是在含有PBS、BSA、甘油和叠氮化钠的不同缓冲液配方中使用相同的抗体克隆得到的( ab51608型 ). 流式细胞术叠加直方图显示左侧HeLa用1mM去甲氧胺处理24小时,右侧HeLa未处理阴性 ab51608型 (红线)。 用80%甲醇固定细胞(5分钟),然后用0.1% PBS-Triton X-100渗透15分钟。然后将细胞培养在含有10%正常山羊血清的1x PBS中,以阻断非特异性蛋白-蛋白质相互作用,然后再接种抗体( ab51608型 )(1个10 6 在100μl中0.2μg/ml(1/11000)),在22°C下保持30分钟。 将二级抗体山羊抗狂犬病IgG H&L(Alexa Fluor®488)预吸附液在1/4000的温度下于22°C孵育30分钟 同位素对照抗体(黑线)为重组兔IgG,单克隆[EPR25A]-同位素对照,使用的浓度和条件与主要抗体相同。 未标记样本(蓝线)也用作对照。 使用50 mW蓝光激光器(488nm)和525/40带通滤波器采集了超过5000个事件。 该抗体在含4%甲醛的HeLa Fixed(10分钟)中发出阳性信号,并在相同条件下用0.1% PBS-Triton X-100渗透15分钟。 -
抗-HIF-1α抗体[EP1215Y]-BSA和无氮化物(ab210073)+Ramos(人类Burkitt淋巴瘤)用10µg的cocl2全细胞裂解物治疗 次要 山羊抗狂犬病IgG H&L(HRP)( ab97051型 ) 预测的带宽大小: 92千帕 观察到的频带大小: 120千帕 为什么实际的频带大小与预测的不同? 暴露时间: 3分钟 封闭缓冲液和浓度:5%NFDM/TBST 稀释缓冲液和浓度:5%NFDM/TBST -
克隆EP1215Y(ab210073)已被Abcam成功偶联。 该图像是使用抗-HIF-1α抗体[EP1215Y](Alexa Fluor®488)生成的。 请参阅 约190197 了解协议详细信息。 约190197 DFO处理的HeLa细胞HIF-1α染色。 用1mM去铁胺(DFO)处理细胞24小时或仅用溶剂处理,以进行对照。 细胞用4%甲醛固定(10分钟),在0.1%Triton X-100中渗透5分钟,然后在1%BSA/10%正常山羊血清/0.3M甘氨酸在0.1%PBS-Tween中封闭1小时。 然后将细胞与 约190197 工作稀释度为1/100(以绿色显示) 约195889年 ,小鼠单克隆[DM1A]到α-管蛋白(Alexa Fluor ® 594,以红色显示),温度为+250℃,温度为1:250。 细胞核DNA用DAPI标记为蓝色。 使用共焦显微镜(Leica-Microsystems,TCS SP8)拍摄图像。 -
克隆EP1215Y(ab210073)已被Abcam成功偶联。 该图像是使用抗-HIF-1α抗体[EP1215Y](Alexa Fluor®647)生成的。 请参阅 ab190569年 了解协议详细信息。 约190569 HeLa细胞+/-CoCl中HIF-1-alpha染色 2 (0.5毫米,16小时)。 用4%甲醛固定细胞(10分钟),用0.1%Triton X-100渗透5分钟,然后用1%牛血清/10%正常山羊血清/0.3M甘氨酸在0.1%PBS-Tween中封闭1小时。 然后将细胞在+4°C下培养过夜 约190569 1/50稀释度(以红色显示)和 约195887年 ,小鼠单克隆抗α-管蛋白(Alexa Fluor ® 488),稀释度为1/250(以绿色显示)。 用DAPI标记细胞核DNA(以蓝色显示)。 使用共焦显微镜(Leica-Microsystems,TCS SP8)拍摄图像。 -
福尔马林固定石蜡包埋人CRC肿瘤组织的免疫组织化学分析 ab51608型 HIF-1α染色。 7.5%H抑制切片内源性过氧化物酶 2 O(运行) 2 在室温下 在人CRC的中央肿瘤区域,β-catenin通常定位于细胞膜(A),而细胞质GRP78(B)和 HIF-1α 染色呈阴性(C)。 在入侵前沿可检测到强核β-连环蛋白,表明EMT(D,G)。 在相应的区域中发现了强烈的细胞质GRP78表达(E,H)。 在某些情况下,强烈的核反应 HIF-1α 观察到染色(F,缺氧),但其他(I,无缺氧)(放大200倍;比例尺:100µm)未观察到染色。 该数据是在含有PBS、BSA、甘油和叠氮化钠的不同缓冲液配方中使用相同的抗体克隆得到的( ab51608型 ). -
叠加直方图显示用 ab51608型 用80%甲醇固定细胞(5分钟),然后用0.1%PBS-Tween渗透20分钟。然后在1x PBS/10%正常山羊血清/0.3M甘氨酸中培养细胞,以阻断非特异性蛋白-蛋白质相互作用,然后用抗体( ab51608型 ,1/11709稀释)在22°C下保持30分钟。 使用的二级抗体是Alexa Fluor ® 488山羊抗兔IgG(H&L)( 约150081 )在22°C下以1/2000稀释30分钟。 使用20mW氩离子激光器(488nm)和525/30带通滤波器采集了超过5000个事件。 该数据是在含有PBS、BSA、甘油和叠氮化钠的不同缓冲液配方中使用相同的抗体克隆得到的( ab51608型 ). -
使用0.5mg HeLa Nuclear DFO处理的全细胞提取物免疫沉淀HIF-1-alpha( 约180880 )、5µg兔多克隆到HIF1α和50µl蛋白g磁珠(+)。 对照组(-)未添加抗体。 将抗体与G蛋白珠在搅拌下孵育10分钟,将在RIPA缓冲液中稀释的HeLa DFO处理的全细胞提取物裂解物添加到每个样品中,并在搅拌下再孵育10分钟。 通过添加40µl SDS负载缓冲液洗脱蛋白质,并在70°C下培养10分钟; 在SDS-PAGE凝胶上分离10µl每个样品,转移到硝化纤维素膜上,用5%BSA封闭,并用未净化的 ab51608型 . 次要:鼠单克隆[SB62a]兔IgG轻链二级抗体( ab99697型 ). 频带:110kDa; HIF1α 该数据是在含有PBS、BSA、甘油和叠氮化钠的不同缓冲液配方中使用相同的抗体克隆得到的( ab51608型 ). -
未净化 ab51608型 黄芩素对HepG2细胞HIF-1-alpha的染色( 约120723 )如文献所述,HIF-1α表达增加与黄芩素浓度增加相关。 细胞在37°C的培养基中培养6小时,培养基中含有不同浓度的 约120723 (黄芩素)置于二甲基亚砜中,室温下用4%甲醛固定10分钟,室温下使用含10%山羊血清、0.3M甘氨酸、1%牛血清白蛋白和0.1%吐温的PBS封闭2小时。 用 ab51608型 (5µg/ml)在含1%BSA和0.1%吐温的PBS中于4°C下过夜。 DyLight 488羊抗兔多克隆抗体( 约96899 )以1/250稀释液作为二级抗体。 该数据是在含有PBS、BSA、甘油和叠氮化钠的不同缓冲液配方中使用相同的抗体克隆得到的( ab51608型 ).
数据表及文件
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数据表下载
合格证书
文献 (21)
洛茨伯格ML 等。 异型3D球体模型的高维单细胞分析揭示了上皮和间充质表型的同基因肺癌细胞之间时空组织和基质细胞相互作用的内在差异。 前Oncol 12:818437 (2022). 公共医学:35530312 麦克道尔SAC 等。 中性粒细胞氧化应激介导肥胖相关血管功能障碍和转移性迁移。 Nat癌症 2:545-562 (2021). 公共医学:35122017 雅曼T 等。 [18F]FMISO PET/CT作为胰腺癌患者术前预后因素。 EJNMMI研究 9:39 (2019). 公共医学:31073705 徐LJ 等。 JAK1,2/Stat3-PD-L1信号通路的联合抑制抑制去势耐药前列腺癌在缺氧时对NK细胞的免疫逃逸。 分子医学代表 17:8111-8120 (2018). 公共医学:29693186 长春K 等。 白细胞介素-17增强肿瘤坏死因子a介导的低氧诱导因子-1a的增加,并抑制血管扩张剂刺激的磷酸蛋白表达,以减少乳腺癌细胞的粘附。 肿瘤Lett 13:3253-3260 (2017). 公共医学:28521432