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打印缓冲液和母液
目录
RIPA公司缓冲液
RIPA公司缓冲液含有离子去垢剂脱氧胆酸钠作为活性成分,特别适用于破坏核膜提取细胞核内物质。RIPA公司缓冲液产生的背景低,但可使激酶变性。它还能破坏蛋白质与蛋白质的相互作用,因此可能会给免疫沉淀分析和下拉实验带来一些问题。
50 mM Tris HCl,pH 8.0150 mM氯化钠1%NP-400.5% 脱氧胆酸钠0.1%十二烷基硫酸钠
10% 脱氧胆酸钠母液(5克脱氧胆酸钠溶于 50毫升意大利)
NP-40型缓冲液
20 mM Tris HCl,pH 8.0137 mM氯化钠10% 甘油1%NP-402 mM乙二胺四乙酸二乙酯
胞骨胞骨
10 mM Tris,pH 7.4100 mM氯化钠1 mM乙二胺四乙酸二乙酯1 mM EGTA1 mM氟化钠20 mM钠4P(P)2O(运行)72 mM钠三VO(旁白)41%Triton®声波风廓线仪X-10010% 甘油0.1%十二烷基硫酸钠0.5% 脱氧胆酸盐
可溶蛋白缓冲液
20 mM Tris-HCl,pH值7.51 mM EGTA(钙2+ 螯合剂)
制备原钒酸钠
所有流程必须在通风橱中进行。
1. 用双蒸水制备 100毫米原钒酸钠溶液
2. 用 盐酸将 酸碱度调节至 9
3. 煮沸至无色
4. 冷却至室温
5再次将 酸碱度调节至 9
6. 再次煮沸至无色
7、重复以上循环,直到煮沸并冷却溶液之后的 酸碱度保持 9
8. 用水补至初始体积
9、分装之后保存于 -20 ℃
10. 如果样品变黄,丢弃样品
避免煮沸期间体积变化过大,可用盖子稍微盖住容器上方,减少蒸发。
TBS 10×(浓缩 特里斯缓冲盐溶液)
1升溶液:24克Tris碱(式量:121.1克)88克氯化钠(式量:58.4克)溶于 900毫升中国水利用 12 N盐酸将 酸碱度调节至 7.6加入蒸馏水至终体积为 1升
要制备 1× 溶液,将 1份 10× 溶液与 9水酸碱度调节至 7.6。1× 溶液的最终摩尔浓度为 20 mM Tris和 150 mM氯化钠
特里斯缓冲液的替代配方同时含有 特里斯碱和三氯化氢这可避免大量使用具有潜在危险性的盐酸来中和单独的 特里斯碱。
TBS 10×替代配方(浓缩 特里斯缓冲盐溶液)
1升溶液:24克Tris-HCl(式量:157.6克)5.6克Tris碱(式量:121.1克)88克氯化钠(式量:58.4克)溶于 900毫升中国水利
1. 在室温下将溶液 酸碱度调节至约 7.6。如果溶液过碱,用浓 盐酸将 酸碱度完7.6;如果溶液过酸,用浓 氢氧化钠将 酸碱度调节至 7.6。
2加入蒸馏水至终体积为 1升
3. 要制备 1倍溶液,将 1份 10× 溶液与 9份蒸馏水混合,并再次将 酸碱度调节至 7.6。
4. 1× 溶液的最终摩尔浓度为 20 mM三通和 150 mM氯化钠
TBST(三个缓冲盐溶液,0.1%吐温20)
1升溶液:100毫升TBS 10×900毫升蒸馏水1毫升吐温20
中强膜再生液
15克甘氨酸1克十二烷基硫酸钠10 mL吐温20
1. 用超纯水将体积调节至 800毫升
2. 将 酸碱度调节至 2.2。
3. 加蒸馏水至 1升
中国
需要在通风橱中进行。
100毫升溶液:20毫升十二烷基硫酸钠10%12.5 mL Tris HCl,pH 6.8,0.5 M67.5毫升蒸馏水在通风橱中加入 0.8毫升β-巯基乙醇
细胞核分离实验方案试剂缓冲液 A类
10 mM HEPES1.5 mM氯化镁210 mM氯化钾0.5 DTT0.05%NP-40(或 0.05%Igepal或 Tergitol),pH 7.9
要制备 250毫升缓冲液 A类的母液:高效微粒子:1 M=238.3 g/L因此 10 mM=0.59克/250毫升氯化镁2:1 M=203.3 g/L因此 1.5 mM=0.076克/250毫升氯化钾:1 M=74.5 g/L因此 10 mM=0.187克/250毫升DTT:1 M=154.2 g/L因此 0.5 mM=0.019克/250毫升NP-40:0.05%
细胞核分离实验方案试剂缓冲液 B类
5 mM水电站1.5 mM氯化镁0.2 mM乙二胺四乙酸二乙酯0.5毫米DTT26% 甘油 (v/v),pH值7.9
要制备 250毫升缓冲液 B的母液:高效微粒子:1 M=238.3 g/L因此 5 mM=0.295克/250毫升MgCl2:1 M=203.3 g/L因此 1.5 mM=0.076克/250毫升乙二胺四乙酸:1 M=372.2 g/L完0.2 mM=0.0186克/250毫升DTT:1 M=154.2 g/L因此 0.5 mM=0.019克/250毫升26% 甘油 (v/v)=65毫升
TBS 0.025%Triton X-100
1升溶液:250µL Triton®声波风廓线仪X-1001升TBS,pH值7.6–7.8
1.6%高2O(运行)2(过氧化氢)的 TBS(待定)溶液
400毫升溶液:6.4毫升(高)2O(运行)2(GPR=30%w/w)393.6毫升TBS,pH 7.6–7.8
一抗的 TBS(待定)溶液(含 1%BSA)
以使用稀释度为 1:10 的一抗为例。
1毫升溶液:100微升一抗10毫克牛血清白蛋白900µL TBS,pH 7.6–7.8
生物素化二抗的 TBS(待定)溶液(含 1%BSA)
以使用稀释度为 1:200 的生物素化二抗为例。
1毫升溶液:5微升生物素化二抗995µL TBS,pH 7.6–7.8
美国广播公司(抗生物素-生物素复合物)的 TBS(待定)溶液
以每种组分的使用稀释度为 1:100 的 基础知识为例。
1毫升溶液:10微升链霉亲和素10微升HRP(或 亚太地区)-生物素980µL TBS,pH值7.6–7.8
碳酸氢盐/碳酸盐包被缓冲液 (100毫米)
3.03克钠2一氧化碳三6.0克NaHCO三(1升蒸馏水),pH值9.6PBS:1.16克钠2高性能操作40.1克氯化钾0.1克K三人事军官44克氯化钠(500毫升蒸馏水),pH值7.4