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非常感谢你的帮助!-制备核裂解物时是否添加了蛋白酶抑制剂?你知道药盒里有没有蛋白酶抑制剂吗?我没有添加任何蛋白酶抑制剂,因为试剂盒中包含一种乳脂抑制剂混合物。-在什么温度下,用样品缓冲液(LDS)加热提取物,加热多长时间?样品在95℃下用DTT变性5分钟。谢谢!
Abcam社区
已验证客户
2012年3月30日被问及
非常感谢您的电子邮件。我再次彻底检查了方案,我觉得很好。核提取试剂盒也有蛋白酶抑制剂,所以这些也不成问题。根据你的反馈,抗体在免疫组织化学中表现良好,所以目前我对多条带的原因不太确定。不幸的是,我们也没有特定于老鼠的图像,所以很抱歉,我无法对结果进行任何比较。我建议使用大鼠背角组织的标准裂解物(RIPA缓冲液裂解)和K562细胞裂解物作为阳性对照。通过这种方式,您可以比较数据表上的数据以及相关出版物上的数据。我相信抗体会好的。如果在尝试阳性对照后仍有多个波段没有消失,请告诉我,我很乐意进一步协助。
回复于 2012年3月30日