主要功能和细节
一次性90分钟协议 样品类型:细胞裂解液、组织匀浆 检测方法:比色法 检测类型:半定量 反应对象:老鼠、人类
概述
-
产品名称 ERK1(磷酸化T202+Y204)+ERK2(磷酸化T185+Y187)+总ELISA 试剂盒 -
检测方法 比色法 -
精确度 批次内 样品 n个 平均值 标准偏差 变异系数% (第202/Y204页) 6 3.3% (总计) 6 3% 批次间 样品 n个 平均值 标准偏差 变异系数% (第202/Y204页) 三 1.3% (总计) 三 4.9% -
样品类型 细胞裂解液,组织匀浆 -
检测类型 半定量 -
检测时间 1小时 3000万 -
实验步骤 一步测定法 -
种属反应性 与反应: 老鼠,人类 预测可用于: 老鼠 -
产品概述 Abcam的ERK1(磷酸化T202+Y204)+ERK2(磷酸化T185+Y187)+总ELISA试剂盒设计用于人和小鼠细胞中ERK1/2(pT202/Y204)和总ERK1/2蛋白的半定量测量。
SimpleStep ELISA™采用亲和标记捕获抗体和报告结合检测器抗体,免疫捕获溶液中的样品分析物。 整个复合物(捕获抗体/分析物/检测器抗体)依次通过包被微孔的抗抗原抗体的免疫亲和力固定。 为了进行分析,将样品或标准品添加到微孔中,然后添加抗体混合物。 孵育后,清洗微孔以去除未结合的物质。 添加TMB底物,在孵育过程中由HRP催化,生成蓝色。 然后通过添加停止溶液来停止该反应,完成从蓝色到黄色的任何颜色变化。 信号的产生与结合分析物的量成比例,强度在450 nm处测量。 或者,可以在600 nm处动态记录TMB的发展,而不是终点读数。
检测特异性
ERK1/2(pT202/Y204)分析检测细胞裂解物中ERK1/2的内源性水平(GenBank Accessions NP 002737.2[ERK1],NP 620407[ERK2]),仅当在Thr202/Tyr204处磷酸化时。
ERK1/2总量分析检测细胞裂解物中ERK1/2的内源性水平(GenBank Accessions NP 002737.2[ERK1],NP 620407[ERK2]),与磷酸化状态无关。
物种反应性
该试剂盒检测人类和小鼠细胞培养提取物中的ERK1/2(pT202/Y204)和ERK1/2 Total。 预计也会在大鼠样本中检测到。 其他物种应逐个进行测试。
血清和血浆样本未使用此试剂盒进行测试。
截至2019年10月,该试剂盒用新抗体重新配制,以保持长期持续供应。
-
说明 估计灵敏度 :磷酸ERK(Thr202/Tyr204):0.1 ng/mL(用重组蛋白测试),总ERK1/2:0.6 ng/mL 范围 :磷酸ERK(Thr202/Tyr204):0.2-20ng/mL,总ERK1/2:0.6-60ng/mL Abcam没有也不打算为客户使用含有欧洲授权清单(附件十四)物质的产品申请REACH授权。 我们的客户有责任检查REACH授权和任何其他相关授权在其预期用途中应用的必要性。 -
平台 微孔板
性能
-
存放说明 储存于+4°C。 请参阅协议。 -
组件 1 x 96测试 1 x 96测试 10X清洗缓冲液PT 1 x 15毫升 1 x 15毫升 50X细胞提取增强剂溶液 1 x 1毫升 1 x 1毫升 5X细胞提取缓冲液PTR 1 x 10毫升 1 x 10毫升 ERK1/2(pT202/Y204)捕获抗体 1 x 1.5毫升 1 x 1.5毫升 ERK1/2(pT202/Y204)检测抗体 1 x 1.5毫升 1 x 1.5毫升 ERK1/2(总)捕获抗体 1 x 1.5毫升 1 x 1.5毫升 ERK1/2(总)检测抗体 1 x 1.5毫升 1 x 1.5毫升 冻干ERK1/2对照裂解液 1瓶 1瓶 平板密封件 1台 1台 单步预涂96孔微孔板(ab206978) 1台 1台 停止解决方案 1 x 12毫升 1 x 12毫升 底物溶液 1 x 12毫升 1 x 12毫升 -
研究领域 -
细胞定位 ERK2:核。 -
别名 ERK公司 ERK 1型 ERK 2号机组
查看所有内容 -
数据库链接 Entrez基因: 5594 人类 Entrez基因: 5595 人类 Entrez基因: 26413 鼠标 Entrez基因: 26417 鼠标 Entrez基因: 116590 老鼠 Entrez基因: 50689 老鼠 Omim公司: 176948 人类 Omim公司: 601795 人类
查看所有内容
图片
-
ERK1/2裂解液稀释系列按所述制备。 原始数据值显示在表中。 试剂盒对照裂解物以在不同批次之间提供一致信号的浓度提供。 根据信号强度生产和配制裂解液,使其与前一批次的30%保持一致。 因此,对照裂解物不具有蛋白质浓度。 -
ERK1/2裂解液稀释系列按所述制备。 原始数据值显示在表中。 试剂盒对照裂解物的浓度在不同批次之间提供一致的信号。 根据信号强度生产和配制裂解液,使其与前一批次的30%保持一致。 因此,对照裂解物不具有蛋白质浓度。 -
典型ERK1/2(pT202/Y204)和ERK1/2重组蛋白标准曲线的示例。 磷酸化的总蛋白比例未知-数据仅供参考。 绘制了背景数据值(平均值+/-SD)。 -
原始数据值显示在表中。 绘制了背景数据值(平均值+/-SD)。 -
代表性样本矩阵中稀释的线性。 在含有1X细胞提取缓冲液PTR的普通培养基中以3种浓度制备细胞裂解物。 对ERK1/2(pT202/Y204)的重复测量数据进行归一化并绘制曲线。 -
100µg/mL细胞提取物制剂中总ERK1/2的细胞系分析。 绘制三次测量的数据(平均值+/-SD),并与1X细胞提取缓冲液PTR(零)进行比较。 -
EGF处理诱导MCF-7细胞ERK1/2(pT202/Y204)磷酸化。 MCF-7细胞在96周的组织培养板中培养,血清饥饿,细胞溶解前用一定剂量范围的EGF处理(10分钟)。 绘制ERK1/2(pT202/Y204)的四次测量数据,并与总ERK1/2蛋白水平进行比较。 Western Blot也显示了ERK1/2(pT202/Y204)和ERK1/2的比较数据。 -
SimpleStep ELISA技术允许在一个步骤中形成抗体-抗原复合物,将检测时间缩短至90分钟。 一次将样品或标准品和抗体混合物添加到微孔中,培养、清洗并添加最终基质。 有关详细的分步指南,请参阅协议。
实验方案
数据表及文件
-
SDS下载 -
数据表下载
文献 (33)
王M 等。 BMP4通过Ube2s和Chmp4b介导的染色体稳定性保护来保持mESCs的发育潜力。 蛋白质细胞 13:580-601 (2022). 公共医学:35147915 尤尼斯NS&加尼姆AMH Celastrol通过激活Nrf2/HO-1、PI3K/AKT信号通路、调节NF-κb信号通路和抑制ERK磷酸化在肾缺血再灌注损伤中的保护作用。 细胞生物化学 80:191-202 (2022). 公共医学:35157199 Fawzy文学硕士 等。 长春花胺通过减弱MAPK和凋亡信号通路调节泮托拉唑在肾缺血/再灌注损伤中的作用。 分子 27:不适用(2022年)。 公共医学:35209172 李毅和窦S FLOT2通过激活MEK/ERK1/2通路促进宫颈癌的增殖和上皮-间质转化。 巴尔干地中海J 39:267-274 (2022). 公共医学:35872627 谢美忠 等。 通过巴豆醛诱导的DNA链间交联、谷胱甘肽扰动、有丝分裂原活化蛋白激酶、Wnt和ErbB信号通路对血管损伤机制进行基于蛋白质组学的评估。 临床蛋白质组学 19:33(2022)。 公共医学:36002804