主要功能和细节
重组生产(无动物),实现高批次一致性和长期供应安全 兔单克隆[EP38Y]抗EGFR-低内毒素,无氮 适用于:间接ELISA、流式细胞仪(Intra)、IHC-P、WB、ICC/IF、IP 敲除已验证 反应对象:小鼠、大鼠、人类
概述
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产品名称 -
描述 兔单克隆抗体 [EP38Y]至EGFR-低内毒素,无氮 -
宿主 兔子 -
特异性 该产品的免疫原是合成的磷酸肽,对应于人EGFR的Tyr1068周围的残基。 筛选后,发现克隆EP38Y识别总EGFR,并且对磷酸化Tyr1068 EGFR没有特异性。 该产品使用A431(人类鳞癌)裂解液在western blot中产生强烈信号,该裂解液自然过度表达EGFR蛋白。 对于内源性EGFR水平较低的细胞系和组织,可能需要优化Western blot条件。 小鼠和大鼠的推荐基于WB结果。 这种抗体可能不适用于小鼠或大鼠样本的IHC。 -
经测试应用 -
不合格品 与反应: 老鼠、老鼠、人 -
免疫原 合成肽。 此信息为Abcam和/或其供应商专有。 -
阳性对照 WB:A431、HeLa、Caco-2和MDA-MB-468细胞裂解物。 野生型HCT 116细胞裂解物。 IHC-P:人宫颈癌组织。 IP:HeLa全细胞裂解物。 流动周期:A431单元。 ICC:A431电池。
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常规说明 ab174481是无载波版本的 约52894 . 我们的 无载体 抗体通常以只含PBS的配方提供,纯化后不含BSA、叠氮化钠和甘油。 无载体缓冲液和高浓度可提高共轭效率。 这种共轭-成熟格式设计用于荧光色素、金属同位素、寡核苷酸和酶,使其成为抗体标记、功能和基于细胞的分析、基于流的分析(例如,质谱仪)和多重成像应用的理想选择。 使用我们的 接合试剂盒 抗体结合物在20分钟内即可使用,动手时间<1分钟,抗体回收率100%:可用于荧光染料、HRP、生物素和金。 我们的RabMAb ® 该技术是一种基于杂交瘤的专利技术,用于制备兔单克隆抗体。 有关我们专利的详细信息,请参阅 拉布MAb ® 专利 . 我们的 低内毒素,无叠氮格式 具有低内毒素水平(≤1 EU/ml,由LAL分析测定)且不含叠氮化物,以在功能分析中获得一致的实验结果。
性能
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形式 液体 -
存放说明 在4°C下装运。 储存于+4°C。 请勿冻结。 -
存储溶液 成分:PBS -
无载体 是 -
浓度信息加载。。。 -
纯度 纯化蛋白A -
克隆 单克隆 -
克隆编号 EP38Y系列 -
同种型 免疫球蛋白G -
研究领域
相关产品
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替代版本 -
共轭试剂盒 -
同位素控制 -
KO细胞系 -
KO细胞裂解物 -
重组蛋白 -
相关产品
应用
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靶标
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功能 受体酪氨酸激酶结合EGF家族配体并激活几个信号级联,将细胞外信号转换为适当的细胞反应。 已知配体包括EGF、TGFA/TGF-alpha、双调节蛋白、表观蛋白/EPGN、BTC/β细胞壁蛋白、表调节蛋白/EREG和HBEGF/肝素结合EGF。 配体结合触发关键细胞质残基上的受体同源和/或异源二聚和自磷酸化。 磷酸化受体招募GRB2等适配蛋白,后者反过来激活复杂的下游信号级联。 激活至少4个主要下游信号级联,包括RAS-RAF-MEK-ERK、PI3激酶-AKT、PLCgamma-PKC和STATs模块。 也可能激活NF-kappa-B信号级联。 还可直接磷酸化其他蛋白质,如RGS16,激活其GTPase活性,并可能将EGF受体信号与G蛋白偶联受体信号耦合。 还磷酸化MUC1并增加其与SRC和CTNNB1/β-catenin的相互作用。 异构体2可能是EGF作用的拮抗剂。 -
组织特异性 普遍表达。 异构体2也在卵巢癌中表达。 -
疾病相关 肺癌 炎症性皮肤和肠道疾病,新生儿,2 -
序列相似性 属于蛋白激酶超家族。 酪氨酸蛋白激酶家族。 EGF受体亚家族。 包含1个蛋白激酶结构域。 -
翻译后修饰 Ser-695处的磷酸化是部分的,只有当Thr-693被磷酸化时才会发生。 PRKD1在Thr-678和Thr-693处的磷酸化抑制EGF诱导的MAPK8/JNK1活化。 PTPRJ的去磷酸化可防止内吞并稳定质膜上的受体。 Tyr-1197的自磷酸化由Arg-1199的甲基化刺激,并增强与PTPN6的相互作用。 Tyr-1092和/或Tyr-1110的自磷酸化招募STAT3。 通过PTPN1和PTPN2脱磷。 EGF刺激下的单泛素化和多泛素化; 它不影响酪氨酸激酶活性或信号传导能力,但可能在溶酶体靶向中发挥作用。 多泛素连接主要通过“Lys-63”进行,但也会通过“Lys-48”、“Lys-11”和“Lys-29”进行连接。 OTUD7B的去泛素作用可防止降解。 RNF115和RNF126泛素化。 甲基化。 PRMT5在Arg-1199的甲基化刺激Tyr-1197的磷酸化。 -
细胞定位 分泌膜和细胞膜。 内质网膜。 高尔基体膜。 细胞核膜。 内体。 内膜。 核心。 作为对EGF的反应,通过高尔基体和内质网从细胞膜转运到细胞核。经配体激活后内吞。 在雌激素激动剂诱导的癌症相关成纤维细胞(CAF)的细胞核中与GPER1共定位。 -
UniProt提供的信息 -
数据库链接 Entrez基因: 1956 人类 Entrez基因: 13649 鼠标 Entrez基因: 24329 老鼠 奥密姆: 131550 人类 瑞士保护银行: P00533号 人类 瑞士保护银行: 企01279 鼠标 尤尼金: 488293 人类 尤尼金: 605083 人类
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别名 禽红细胞白血病病毒癌基因同源抗体 细胞生长抑制蛋白40抗体 细胞增殖诱导蛋白61抗体
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图片
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所有车道: 抗-EGFR抗体[EP38Y]( 约52894 )稀释度为1/1000 车道1: 野生型HCT 116细胞裂解物 车道2: EGFR CRISPR-Cas9编辑的HCT 116细胞裂解物 3号车道: Caco-2细胞裂解物 每条泳道20µg的裂解物/蛋白质。 在还原条件下进行。 预测的带宽大小: 134千帕 观察到的频带大小: 160千帕 为什么实际的频带大小与预测的不同? 该数据是在含有PBS、BSA、甘油和叠氮化钠的不同缓冲液配方中使用相同的抗体克隆得到的( 约52894 ). Western blot假彩色图像:抗-EGFR抗体[EP38Y]在1/1000稀释度下染色,以绿色显示; 小鼠抗α-管蛋白[DM1A]( 约7291 )以1/20000稀释度进行负荷控制染色,以红色显示。在Western blot中, 约52894 被证明与EGFR特异结合。 在野生型HCT 116细胞裂解液中在160 kDa处观察到一条带,在Egfr CRISPR-Cas9编辑的细胞系中未观察到该大小的信号 约281597 (CRISPR-Cas9编辑的细胞裂解物 约282949 ). 在CRISPR-Cas9编辑的低于160kDa的裂解液通道中观察到的谱带可能代表EGFR的截断形式。 这还没有进一步研究,基因产物的功能特性也没有确定。 为了生成该图像,分析了野生型和Egfr CRISPR-Cas9编辑的HCT 116细胞裂解物。 首先,样品在SDS-PAGE凝胶上运行,然后转移到硝化纤维素膜上。 TBS-0.1%吐温中3%牛奶中的膜被堵塞 ® 20(TBS-T),然后在4°C下与一级抗体孵育过夜。 在TBS-T中清洗四次斑点,在室温下与二级抗体孵育1小时,再次清洗四次,然后成像。 使用的二级抗体是山羊抗兔IgG H&L(IRDye ® 800CW)预吸收床( ab216773号 )和山羊抗鼠IgG H&L(IRDye ® 680RD)预吸收床( 约216776 )稀释1/20000。 -
所有车道: 抗-EGFR抗体[EP38Y]( 约52894 )稀释度为1/1000 车道1: A431细胞裂解物 车道2: MDA-MB-468细胞裂解物 3号车道: 野生型HeLa细胞裂解物 车道4: EGFR敲除HeLa细胞裂解物 每条泳道20µg的裂解物/蛋白质。 在还原条件下进行。 预测的带宽大小: 134千帕 观察到的频带大小: 134千帕 该数据是在不同的缓冲液配方中使用相同的抗体克隆得到的( 约52894 ). 1-4车道: 合并信号(红色和绿色)。 绿色- 约52894 在175 kDa下观察到。 红色-装载控制, 约130007 在125kDa下观察到。 约52894 在野生型HeLa中显示与EGFR反应。 敲除细胞系时观察到信号丢失 ab255385磅 (敲除细胞裂解物 约263845 )已使用。 对野生型和EGFR敲除样品进行SDS-PAGE分析。 约52894 和抗V蛋白抗体[VIN-54]( 约130007 )分别在4°C下以1/1000稀释度和1/20000稀释度培养过夜。 用山羊抗兔IgG H&L(IRDye ® 800CW)预吸附床( ab216773号 )和山羊抗鼠IgG H&L(IRDye ® 680RD)预吸附床( 约216776 )二级抗体在成像前在室温下以1:20000稀释1小时。 -
约52894 (纯化)1:20稀释(0.5ug)免疫沉淀EGFR在HeLa(人宫颈腺癌上皮细胞)全细胞裂解液中。 车道1(输入): HeLa(人宫颈腺癌上皮细胞)全细胞裂解液10ug 车道2(+): 约52894 &HeLa(人宫颈腺癌上皮细胞)全细胞裂解物 车道3(-): 兔单克隆IgG( 约172730 )而不是 约52894 HeLa(人宫颈腺癌上皮细胞)全细胞裂解物 用于蛋白质印迹,用于IP检测试剂(HRP)的VeriBlot( 阿布131366 )用于1:1000稀释度的检测。 封闭和稀释缓冲液:5%NFDM/TBST。 该数据是在含有PBS、BSA、甘油和叠氮化钠的不同缓冲液配方中使用相同的抗体克隆得到的( 约52894 ). -
1000 ng/ml人EGFR重组蛋白的ELISA分析 约52894 采用1/2500稀释度的碱性磷酸酶结合亲和纯山羊抗狂犬病IgG(H+L)作为二级抗体。
数据表及文件
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