主要功能和细节
小鼠单克隆[4A2]到E Cadherin 适用人群:WB、ICC/IF、IHC-P 敲除已验证 反应对象:小鼠、大鼠、人类 同位素:IgG1
概述
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产品名称 -
描述 小鼠单克隆抗体 [4A2]至E Cadherin -
宿主 鼠标 -
经测试应用 -
种属反应性 与反应: 老鼠、老鼠、人 -
免疫原 重组全长蛋白。 此信息为Abcam和/或其供应商专有。 -
表位 4A2单克隆抗体识别E-钙粘蛋白的细胞质结构域。该表位已被定位到757-778残基(PubMed ID:12393869)。 -
阳性对照 ICC/IF:MCF7和野生型A431细胞。 IHC-P:FFPE人结肠癌、大鼠大肠和小鼠大肠组织切片。 WB:MCF7细胞、大鼠和小鼠结肠组织裂解物。
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常规说明 该抗体克隆由Abcam制造。 如果您需要为您的实验定制缓冲配方或共轭物,请联系 orders@abcam.com . 多年来,生命科学行业一直面临着再现性危机。 Abcam正在通过我们的一系列重组单克隆抗体和用于金标准验证的敲除编辑细胞系引领解决这一问题。 购买前请检查此产品是否满足您的需求。 如果您有任何问题、特殊要求或疑虑,请在购买前向我们发送询问和/或联系我们的支持团队。 以下是本产品的推荐替代品,以及出版物、客户评论和问答
性能
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形式 液体 -
存放说明 在4°C下装运。 短期储存在+4°C下(1-2周)。 交付时,等分。 长期储存于-20°C。 避免冷冻/解冻循环。 -
存储溶液 防腐剂:0.02%叠氮化钠 成分:PBS -
正在加载浓度信息。。。 -
发动机 蛋白质G纯化 -
克隆 单克隆 -
克隆编号 4A2型 -
同种型 IgG1 -
轻链类型 卡帕 -
研究领域
相关产品
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替代版本 -
兼容的辅助设备 -
同位素控制 -
重组蛋白
应用
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靶标
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功能 钙粘蛋白是钙依赖的细胞粘附蛋白。 在连接细胞时,它们优先以亲同方式与自身相互作用; 因此,钙粘蛋白可能有助于异质细胞类型的分类。 CDH1参与调节上皮细胞的细胞间粘附、迁移和增殖的机制。 具有强大的侵袭抑制作用。 它是整合素α-E/β-7的配体。 E-Cad/CTF2促进阿贝塔前体的非淀粉样降解。 对APP C99和C83的产生具有较强的抑制作用。 -
组织特异性 非神经上皮组织。 -
疾病相关 CDH1缺陷是遗传性弥漫性胃癌(HDGC)的原因[MIM:137215]。 一种常染色体显性癌症易感综合征,对弥漫性胃癌的易感性增加。 弥漫性胃癌是一种恶性疾病,其特征是分化不良的浸润性病变导致胃壁增厚。 恶性肿瘤始于胃,可扩散至食道或小肠,并可穿过胃壁延伸至附近的淋巴结和器官。 它也可以转移到身体的其他部位。 注:杂合生殖系突变CDH1与弥漫性胃癌家族性病例有关。 在散发性弥漫性胃癌和小叶性乳腺癌患者中也发现了体细胞突变。 CDH1缺陷是子宫内膜癌(ENDMC)易感性的一个原因[MIM:608089]。 CDH1缺陷是卵巢癌(OC)易感性的一个原因[MIM:167000]。 卵巢癌起源于卵巢组织的常见恶性肿瘤。 尽管已经描述了许多卵巢肿瘤的组织学类型,但上皮性卵巢癌是最常见的形式。卵巢癌通常无症状,即使是晚期疾病,其公认的症状和体征也是模糊的。 因此,大多数患者被诊断患有晚期疾病。 -
序列相似性 包含5个钙粘蛋白域。 -
翻译后修饰 在细胞凋亡或钙内流期间,被膜结合金属蛋白酶(ADAM10)、PS1/gamma-分泌酶和caspase-3裂解,分别产生约38 kDa(E-CAD/CTF1)、33 kDa。 由钙内流诱导的金属蛋白酶处理导致细胞间粘附中断,随后β-catenin释放到细胞质中。 残余的膜系留裂解产物通过细胞内蛋白水解途径快速降解。 半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-3裂解释放细胞质尾部,导致肌动蛋白微丝系统解体。 γ-分泌酶介导的分裂促进粘附连接的分解。 -
细胞定位 细胞连接。 细胞膜。 内体。 高尔基体>转高尔基体网络。在肠上皮细胞的细胞-细胞接触部位与DLGAP5进行结肠化。 通过与α-、β-和γ-肌动蛋白结合锚定在肌动蛋白微丝上。 凋亡或钙内流诱导的连续蛋白水解导致细胞与细胞接触部位向细胞质移位。 在从高尔基体运输到质膜的过程中,与RAB11A内体发生结肠化。 -
UniProt提供的信息 -
数据库链接 Entrez基因: 999 人类 Entrez基因: 12550 鼠标 Entrez基因: 83502 老鼠 奥密姆: 192090 人类 瑞士保护银行: 第12830页 人类 瑞士保护银行: P09803号 鼠标 瑞士保护银行: Q9R0T4型 老鼠 尤尼金: 461086 人类
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别名 Arc 1抗体 CADH1_人类抗体 钙粘蛋白1抗体
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图片
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所有车道: 1µg/ml的抗E钙粘蛋白抗体[4A2](ab231303) 车道1: 野生型A431细胞裂解物 车道2: CDH1敲除A431细胞裂解物 3号车道: Caco-2细胞裂解物 每车道20µg的裂解液/蛋白质。 在还原条件下进行。 预测的带宽大小: 97千帕 观察到的频带大小: 110130,55千帕 为什么实际的频带大小与预测的不同? Western blot:抗CDH1抗体[4A2](ab231303)以1 ug/ml染色,以绿色显示; 兔抗GAPDH抗体[EPR16891]( 约181602 )以1/20000稀释度进行负荷对照染色,以红色显示。在Western blot中,ab231303显示与CDH1特异性结合。 在野生型A431细胞裂解液中在130、110、55 kDa处观察到一条带,在CDH1敲除细胞系中未观察到该大小的信号 约273747 (敲除细胞裂解物 约273781 ). 为了生成此图像,分析了野生型和CDH1敲除A431细胞裂解物。 首先,样品在SDS-PAGE凝胶上运行,然后转移到硝化纤维素膜上。 TBS-0.1%吐温中5%牛奶中的膜被堵塞 ® 20(TBS-T),然后在4°C下与一级抗体孵育过夜。 在TBS-T中清洗四次斑点,在室温下与二级抗体孵育1小时,再次清洗四次,然后成像。 二级抗体为羊抗鼠IgG H&L 800CW和羊抗兔IgG H&L 680RD,稀释度为1/20000。 -
使用ab231303对野生型A431细胞和CDH1敲除A431细胞中的E-Cadherin进行免疫荧光染色(顶面板)。 用4%甲醛固定细胞(10分钟),用0.1%Triton-X-100渗透5分钟,然后用1%牛血清/10%正常山羊血清/0.3M甘氨酸在0.1%PBS-Tween中封闭1小时。 然后用ab231303以1.0µg/mL和 约6046 以1µg/mL在+4°C下过夜,然后在室温下用山羊抗鼠IgG H&L(Alexa Fluor ® 488)预吸附层( ab150117号 )(以绿色显示)和山羊抗狂犬病IgG H&L(Alexa Fluor ® 594)预吸附层( 约150084 )(以红色显示),均为1/1000。 用DAPI标记细胞核DNA(以蓝色显示)。 使用高含量分析仪(Operetta CLS、Perkin Elmer)采集图像,并显示共焦截面。 -
使用ab231303对野生型A431细胞和CDH1敲除A431细胞中的E-Cadherin进行免疫荧光染色(顶面板)。 细胞用100%甲醇固定(5分钟),用0.1%Triton-X-100渗透5分钟,然后用1%BSA/10%正常山羊血清/0.3M甘氨酸在0.1%PBS-Tween中封闭1小时。 然后用ab231303以1.0µg/mL和 约6046 以1µg/mL在+4°C下过夜,然后在室温下用山羊抗鼠IgG H&L(Alexa Fluor ® 488)预吸附层( ab150117号 )(以绿色显示)和山羊抗狂犬病IgG H&L(Alexa Fluor ® 594)预吸附层( 约150084 )(以红色显示),均为1/1000。 用DAPI标记细胞核DNA(以蓝色显示)。 使用高含量分析仪(Operetta CLS、Perkin Elmer)采集图像,并显示共焦截面。 -
Leica Biosystems BOND®RX仪器上进行的福尔马林固定石蜡包埋正常小鼠大肠切片中E-Cadherin染色的IHC图像。 用柠檬酸钠缓冲液(pH6,表位检索溶液1)进行热介导抗原检索预处理20分钟。 然后将切片与1ug/ml的ab231303在室温下孵育15分钟,并使用HRP缀合的紧密聚合物系统进行检测。 DAB被用作显色剂。 然后用苏木精对切片进行复染,并用DPX固定。 插入的二级对照图像取自无一级抗体的相同分析。 对于其他IHC染色系统(自动化和非自动化),客户应优化可变参数,如抗原回收条件、初级抗体浓度和抗体孵育时间。 -
Leica BOND上福尔马林固定石蜡包埋正常大鼠大肠切片中E Cadherin染色的IHC图像 TM(TM) 系统使用标准方案F。使用柠檬酸钠缓冲液(pH6,表位检索溶液1)热介导抗原检索对切片进行20分钟的预处理。 然后在室温下将切片与ab231303(5ug/ml)孵育15分钟,并使用HRP共轭紧凑聚合物系统进行检测。 DAB被用作显色剂。 然后用苏木精对切片进行复染,并用DPX固定。 插入的二级对照图像取自无一级抗体的相同分析。 对于其他IHC染色系统(自动化和非自动化),客户应优化可变参数,如抗原回收条件、初级抗体浓度和抗体孵育时间。 -
所有车道: 车道1: MCF7全细胞裂解物 车道2: 小鼠结肠组织裂解物 3号车道: 大鼠结肠组织裂解物 每车道20µg的裂解液/蛋白质。 在还原条件下进行。 预测的带宽大小: 97千帕 观察到的频带大小: 105千帕 为什么实际的频带大小与预测的不同? 该印迹是在MOPS缓冲系统下使用4-12%双三凝胶生成的。 凝胶在200V下运行55分钟,然后在30V下转移到硝化纤维膜上70分钟。 然后在ab231303和 约181602 (兔抗GAPDH负荷对照)分别在4°C、1 ug/ml浓度和1/10000稀释度下培养过夜。 使用预先吸附的山羊抗兔IgG H&L(IRDye®800CW)检测抗体结合( ab216773号 )成像前在室温下以1/20000稀释1小时。 -
ab231303染色MCF7细胞中的E-Cadherin。 细胞用4%PFA固定(10min),用0.1%PBS-Tween渗透5分钟,然后用1%BSA/10%正常山羊血清/0.3M甘氨酸在0.1%PBS Tween中封闭1小时。 然后将细胞在+4°C下与ab231303以1μg/ml和 约6046 ,兔多克隆到β-管蛋白-负载控制,稀释度为1/1000。 然后将细胞与 ab150117号 、山羊抗鼠IgG H&L(Alexa Fluor ® 488),稀释度为1/1000(以绿色显示) 约150084 ,羊对兔IgG-H&L(Alexa Fluor®594)的多克隆次级抗体,稀释度为1/1000(以伪红色显示)。 用DAPI标记细胞核DNA(以蓝色显示)。 使用共焦显微镜(Leica-Microsystems,TCS SP8)拍摄图像。 -
Leica BOND上福尔马林固定石蜡包埋的正常人结肠癌*切片中E Cadherin染色的IHC图像 TM(TM) 系统使用标准方案F。使用柠檬酸钠缓冲液(pH6,表位检索溶液1)热介导抗原检索对切片进行20分钟的预处理。 然后将切片与1ug/ml的ab231303在室温下孵育15分钟,并使用HRP缀合的紧密聚合物系统进行检测。 DAB被用作显色剂。 然后用苏木精对切片进行复染,并用DPX固定。 插入的二级对照图像取自无一级抗体的相同分析。 对于其他IHC染色系统(自动化和非自动化),客户应优化可变参数,如抗原回收条件、初级抗体浓度和抗体孵育时间。 * 组织取自人类研究组织库,由NIHR剑桥生物医学研究中心支持
实验方案
数据表及文件
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数据表下载
文献 (84)
张磊 等。 TRIM24的高表达预示着卵巢上皮癌的预后较差,并促进其增殖和转移。 卵巢研究杂志 15:19 (2022). 公共医学:35105347 党L 等。 下调精子相关抗原5通过调节叉头盒蛋白M1/A去整合素和金属蛋白酶17/NOTCH1信号传导抑制黑色素瘤进展。 生物工程 13:4744-4756 (2022). 公共医学:35138218 黄CS 等。 长非编码RNA LINC02470海绵状MicroRNA-143-3p并增强SMAD3介导的上皮-间充质转化以促进膀胱癌的侵袭性。 癌症(巴塞尔) 14:不适用(2022年)。 公共医学:35205713 王H 等。 TAGLN2调节的滋养层细胞迁移、侵袭和融合在子痫前期受损。 前电池开发生物 10:810633 (2022). 公共医学:35281112 施Y 等。 NCAPG通过激活Wnt/β-catenin信号通路促进结直肠癌细胞增殖、迁移、侵袭和上皮-间质转化。 癌细胞Int 22:119 (2022). 公共医学:35292013