主要功能和细节
重组生产(无动物),实现高批次一致性和长期供应安全 兔单克隆[UMB2]到CXCR4 适用人群:IHC-Fr、Flow Cyt(Intra)、WB、IHC-P、ICC/IF 反应对象:小鼠、大鼠、人类
相关偶联物和制剂
(美国)
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产品名称 -
日本 兔单克隆抗体 [UMB2]到CXCR4 -
宿主 兔子 -
土耳其 虽然一些客户可以让这种抗体在小鼠和大鼠中成功发挥作用,但我们无法在IHC内部复制这种抗体,因此无法保证。我们建议使用抗-CXCR4抗体[EPUMBR3]( 约181020 )用于鼠标IHC。 该抗体仅识别CXCR4的非磷酸化C末端(残基341-352)。 S346/347的磷酸化阻断抗体结合。 PMID:24154522、25451233。 我们建议使用lambda磷酸酶处理对样品进行去磷酸化。 请参阅申请说明。 -
经测试应用 -
种属反应性 与反应: 老鼠、老鼠、人 -
免疫原 合成肽。 此信息为Abcam和/或其供应商专有。 -
阳性对照 WB:HeLa、Jurkat和WI-38细胞裂解物; HEK239转染CXCR4,细胞裂解物。 ICC/IF:Jurkat细胞。 IHC-P:人宫颈癌、膀胱癌组织、卵巢腺癌组织和扁桃体组织。 流式细胞术(内):Jurkat细胞,HEK-293T细胞转染人CXCR4表达载体。 IHC-Fr:小鼠和大鼠E14.5大脑
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常规说明
性能
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形式 液体 -
存放说明 在4°C下装运。 储存于-20°C。 在-20°C下稳定12个月。 -
存储溶液 pH值:7.20 防腐剂:0.01%叠氮化钠 成分:40%甘油、0.05%BSA、59%PBS -
浓度信息加载。。。 -
纯度 蛋白质A纯化 -
克隆 单克隆 -
克隆编号 UMB2型 -
同种型 免疫球蛋白G -
研究领域
相关产品
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替代版本 -
兼容的辅助设备 -
共轭试剂盒 -
同位素控制 -
重组蛋白 -
相关产品
应用
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靶标
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功能 C-X-C趋化因子CXCL12/SDF-1的受体,通过增加细胞内钙离子水平和增强MAPK1/MAPK3激活来传递信号。 作为细胞外泛素的受体; 从而增强细胞内钙离子并降低细胞内cAMP水平。 参与造血和心室间隔形成。 可能通过调节内皮细胞中的血管分支和/或重塑过程,在胃肠道血管形成中也发挥重要作用。 可能参与小脑发育。 在中枢神经系统中,可以调节海马神经元的存活。 作为HIV-1 X4分离株的辅受体(CD4是主要受体),以及一些HIV-2分离株的主要受体。 促进病毒的环境介导融合。 -
组织特异性 表达于多种组织,如外周血白细胞、脾脏、胸腺、脊髓、心脏、胎盘、肺、肝脏、骨骼肌、肾脏、胰腺、小脑、大脑皮层和髓质(小胶质细胞和星形胶质细胞)、脑微血管、冠状动脉和脐带内皮细胞。 异构体1在所有测试的组织中占主导地位。 -
疾病相关 CXCR4缺陷是WHIM综合征(WHIM)的原因[MIM:193670]; 也称为疣、低丙种球蛋白血症、感染和骨髓坏死。 WHIM综合征是一种以中性粒细胞减少、低丙种球蛋白血症和广泛的人乳头瘤病毒(HPV)感染为特征的免疫缺陷疾病。 尽管外周血中性粒细胞减少,但受累个体的骨髓抽吸物中含有丰富的成熟髓样细胞,这种情况称为骨髓分裂症。 -
序列相似性 属于G蛋白偶联受体1家族。 -
结构域 氨基末端对配体结合至关重要。 所有四个细胞外区域的残基都有助于HIV-1共受体活性。 -
翻译后修饰 激动剂刺激磷酸化。 快速磷酸化C末端的丝氨酸和苏氨酸残基。 Ser-324和Ser-325的磷酸化导致ITCH的补充、泛素化和蛋白质降解。 在激动剂刺激下,ITCH在细胞膜上泛素化。 泛素依赖机制,即转运所需的内体分选复合物(ESCRT),然后将CXCR4作为溶酶体降解的靶点。 这一过程还取决于CXCR4 C末端先前的Ser-/Tr-磷酸化。 ARRB1与STAM的结合也通过调节SFR5S的泛素化负调控CXCR4对溶酶体的分选。 Tyr-21上的硫酸化是CXCL12/SDF-1α有效结合所必需的,并促进其二聚化。 O-和N-糖基化。 Asn-11是N-糖基化的主要位点。 Asn-176似乎很少或没有糖基化。 N-糖基化通过抑制与Env糖蛋白的相互作用,掩盖了X4和R5实验室适应型和原发性HIV-1毒株中的协同受体功能。 O-糖基化硫酸软骨素附着物不影响与CXCL12/SDF-1α的相互作用及其共受体活性。 -
细胞定位 细胞膜。 在未受刺激的细胞中,质膜上的扩散模式。 在激动剂刺激下,与ITCH在质膜上共定位,并在那里泛素化。 -
UniProt提供的信息 -
数据库链接 Entrez基因: 7852 人类 Entrez基因: 12767 鼠标 Entrez基因: 60628 老鼠 Omim公司: 162643 人类 瑞士保护银行: 第61073页 人类 瑞士保护银行: 第70658页 鼠标 瑞士保护银行: O08565号 老鼠 尤尼金: 593413 人类
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别名 C-X-C趋化因子受体4型抗体 CD184抗体 CD184抗原抗体
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图片
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流式细胞术重叠直方图显示左Jurkat阳性细胞和右阴性HepG2用ab124824染色(红线)。 用80%甲醇固定细胞(5分钟),然后用0.1%PBS-Triton X-100渗透15分钟。然后将细胞培养在含有10%正常山羊血清的1x PBS中,以阻止非特异性蛋白-蛋白质相互作用,然后再接种抗体(ab124824)(1x 10 6 100μl,1.0μg/ml(1/1900)),22°C,30分钟。 将二级抗体山羊抗狂犬病IgG H&L(Alexa Fluor®488)预吸附液在1/4000的温度下于22°C孵育30分钟 同位素对照抗体(黑线)为重组兔IgG,单克隆[EPR25A]-同位素对照,使用的浓度和条件与主要抗体相同。 未标记样本(蓝线)也用作对照。 使用50 mW蓝光激光器(488nm)和525/40带通滤波器采集了超过5000个事件。 在相同条件下,该抗体在使用4%甲醛(10分钟)/0.1%PBS-Triton X-100渗透15分钟的Jurkat Fixed中发出阳性信号。 -
用含有myc-his标记(左)/HEK-293T的人CXCR4表达载体转染含有myc-his标记(右)的人类CXCR1、CXCR2、CXCR3和CXCR5表达载体的混合物转染4%多聚甲醛固定90%甲醇渗透的HEK-293 T(人胚肾)细胞进行流式细胞术分析 在1/2000稀释度(0.1μg)/左右用ab124824标记CXCR4。 将山羊抗兔IgG(Alexa Fluor®488, 约150081 )以1/3000稀释液作为二级抗体。 与CXCR1/CXCR2/CXCR3/CXCR5无交叉反应。 -
小鼠E14.5大脑在1/250(10.8μg/mL)时用ab124824标记CXCR4的免疫组织化学(冷冻)分析。 切片用4%PFA固定,并用0.2%Triton X-100渗透 约150077 lexaFluor公司 ® 488山羊抗兔二级抗体为1/1000(2μg/mL)。 细胞核用DAPI复染成蓝色。 使用柠檬酸钠缓冲液(10mM柠檬酸盐pH 6.0+0.05%吐温-20)进行热介导抗原回收。 小鼠胚胎大脑染色阳性。 -
正常人组织标本中CXCR4表达的免疫组织化学检测 使用ab124824以5μ/ml的浓度在4°C下过夜,在所示PFA固定、石蜡包埋的人体组织中检测到CXCR4。 A、 肾脏。 B、 肾上腺。 C、 小脑。 D、 骨髓,棕色染色:CXCR4,绿色染色:CD45。 E、 脾脏。 F、 睾丸。 G、 肺。 H、 冒号。 -
所有车道: 抗CXCR4抗体[UMB2](ab124824) 车道1: CHO(阴性对照) 车道2: Jurkat整间牢房 3号车道: Jurkat膜 车道4: Jurkat核电(阴性对照) 每车道20µg的裂解液/蛋白质。 次要 所有车道: 羊抗兔(1/10000稀释) 预测的带宽大小: 39千帕 观察到的频带大小: 41千Da 为什么实际的频带大小与预测的不同? 运行缓冲区:MOPS。 条件:变性/还原。 该印迹是在MOPS缓冲系统下使用4-12%Bis-Tris凝胶生成的。 凝胶在200V下运行60分钟,然后在30V下转移到硝化纤维膜上70分钟。 在与ab124824(抗CXCR4)和 约7671 (加载控制),在4°C下过夜。 成像前,使用标记的山羊抗兔(H+L;绿色)和标记的山羊抗鼠(H+L;红色)在室温下以1:10000稀释1小时检测抗体结合。 -
通过转染细胞的免疫荧光染色鉴定UMB-2(ab124824)。 表达CCR7或CXCR4的HEK-293细胞未暴露或暴露于100 ng/ml MIP-3或100 ng/ml SDF-1 30 min,随后固定并用1µg/ml抗CCR7{1188}或抗CXCR4{UMB-2}以1∶100的稀释度进行免疫荧光染色。 注意,UMB-2仅在CXCR4细胞的质膜水平上检测到显著的免疫荧光,但在CCR7表达细胞中没有检测到,SDF-1暴露诱导CXCR4受体免疫染色从质膜快速转移到细胞液中。 显示了三个独立实验之一的代表性结果。 比例尺,20µm。 -
大鼠E14.5大脑在1/250(10.8μg/mL)时用ab124824标记CXCR4的免疫组织化学(冷冻)分析。 切片用4%PFA固定,并用0.2%Triton X-100渗透 约150077 lexaFluor公司 ® 488羊抗兔次级抗体为1/1000(2μg/mL)。 细胞核用DAPI复染成蓝色。 使用柠檬酸钠缓冲液(10mM柠檬酸盐pH 6.0+0.05%吐温-20)进行热介导抗原回收。 大鼠胚胎大脑染色阳性。 -
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未纯化的ab124824,以1/50稀释,通过免疫组织化学染色石蜡包埋的人宫颈癌组织中的CXCR4。 在开始IHC染色方案之前,执行热介导抗原检索。 -
用纯化的ab124824以1/250的工作稀释度对Jurkat细胞进行免疫荧光染色,并用DAPI进行反染色。 微管蛋白用小鼠抗微管蛋白以1/1000的稀释度染色( 约7291 )和Alexa Fluor ® 594羊用1/500稀释液抗鼠( ab150120型 )。 二级抗体是 约150077 Alexa Fluor公司 ® 488羊抗兔药,稀释比例为1/500。 细胞固定在4%PFA中,并使用0.1%Triton X 100进行渗透。 阴性对照显示在底部中间和右侧面板中-对于第一个阴性对照,使用纯化的ab124824,稀释度为1/200,然后使用Alexa Fluor ® 555羊抗鼠抗体,稀释度为1/500,用于第二阴性对照鼠一级抗体( 约7291 )和抗兔二级抗体( 约15007 )使用了。 -
抗CXCR4抗体特异性的Western blot分析。 稳定转染表达CCR7或CXCR4的HEK-293细胞的膜制剂在10%SDS-聚丙烯酰胺凝胶上分离,并在硝化纤维素膜上印迹。 然后用亲和纯化的1µg/ml抗CCR7{1188}或抗CXCR4{UMB-2}杂交瘤上清液以1:100的稀释度培养膜。 使用增强化学发光法开发印迹。 注意,UMB-2仅在CXCR4中检测到预期分子量的条带,但在CCR7转染细胞中未检测到。 另外两个实验给出了类似的结果。 -
所有车道: 稀释1/1000的抗CXCR4抗体[UMB2](ab124824) 车道1: HeLa(人宫颈腺癌上皮细胞)全细胞裂解物 2-3车道: Jurkat(人类T细胞白血病T淋巴细胞)全细胞裂解物 每车道15µg的裂解液/蛋白质。 次要 所有车道: 山羊抗狂犬病IgG H&L(HRP)( ab97051型 )稀释1/20000 预测的带宽大小: 39千帕 观察到的频带大小: 43千帕 为什么实际的频带大小与预测的不同? 暴露时间: 1秒 封闭和稀释缓冲液:5%NFDM/TBST 我们建议在分解后不要煮沸样品。 -
1/100稀释(纯化)的抗-CXCR4抗体[UMB2](ab124824)+10µg的WI-38细胞裂解液 次要 HRP山羊抗兔(H+L),稀释度为1/1000 预测的带宽大小: 39千帕 观察到的频带大小: 43千帕 为什么实际的频带大小与预测的不同? 阻塞缓冲区:5%NFDM/TBST 稀释缓冲液:5%NFDM/TBST -
以1/500工作稀释度纯化的ab124824对石蜡包埋人膀胱癌进行免疫组织化学染色。 使用的二级抗体是 ab97051型 ,HRP缀合的山羊抗兔IgG(H+L),稀释度为1/500。 用苏木精对样品进行反染色。 使用pH 9.0的Tris-EDTA缓冲液进行抗原检索。 使用PBS代替一级抗体作为阴性对照,如插图所示。 -
ab124824染色Jurkat细胞。 将细胞在-20°C下100%甲醇固定5分钟,然后在室温下在1%BSA/10%正常山羊血清/0.3M甘氨酸的0.1%PBS吐温中孵育1小时,以使细胞透化并阻断非特异性蛋白质-蛋白质相互作用。 然后将细胞与抗体(ab124824,5ug/ml)在+4°C下孵育过夜。 二级抗体(伪绿色)为山羊抗狂犬病IgG H&L(Alexa Fluor®488)预吸附抗体( 约150081 )在室温下以1/1000的稀释度使用1小时。 Alexa Fluor®594 WGA用于在室温下以1/200稀释1小时的方式标记质膜(伪彩色红色)。 DAPI用于在室温下以1.43µM的浓度对细胞核(伪蓝色)染色1小时。 -
未经纯化的ab124824,1/50稀释,通过免疫组织化学染色石蜡包埋人卵巢腺癌组织中的CXCR4。 在开始IHC染色方案之前,执行热介导抗原检索。 -
未经纯化的ab124824,1/50稀释,通过免疫组织化学染色石蜡包埋的人类扁桃体组织中的CXCR4。 在开始IHC染色方案之前,执行热介导抗原检索。 -
车道1: 1/500稀释的抗CXCR4抗体[UMB2](ab124824)(未纯化) 车道2: 1/500稀释度的抗CXCR4抗体[UMB2](ab124824) 车道1: 用CXCR4(小鼠)表达载体细胞裂解物转染HEK239 车道2: 用空表达载体细胞裂解物转染HEK239 每车道100000个细胞的裂解物/蛋白质。 次要 所有车道: HRP-结合山羊抗兔IgG多克隆(1/50000稀释) 使用ECL技术开发。 在还原条件下进行。 预测的带宽大小: 39千帕 观察到的频带大小: 42.47千Da 为什么实际的频带大小与预测的不同? 暴露时间: 10秒
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文献 (217)
程M 等人。 心肌细胞CXCR4表达的消融加剧了异丙肾上腺素诱导的细胞死亡和心力衰竭。 国际分子医学杂志 51:不适用(2023年)。 公共医学:36579657 金·S 等人。 新辅助放化疗后局部晚期直肠癌细胞膜CXCL12升高:潜在的预后标志物。 J癌症 13:162-173 (2022). 公共医学:34976180 斯塔齐M 等人。 CXCR4受体激动剂对银环蛇毒液诱导的神经麻痹有治疗作用。 临床翻译医学 12:e651(2022)。 公共医学:35075797 杨H 等人。 通过趋化因子受体4显像对肝转移瘤进行无创检测和辅助诊断。 癌症基因治疗 29:1827-1839(2022)。 公共医学:35145271 施尼文一世 等人。 质子辐照后的细胞可塑性决定了肿瘤细胞的放射敏感性。 单元格代表 38:110422 (2022). 公共医学:35196495